一种提取液及其在提取RNA中的应用制造技术

技术编号:20857547 阅读:68 留言:0更新日期:2019-04-13 11:19
本发明专利技术公开了一种提取液及其在提取RNA中的应用,包括以体积分数计的30‑65vt%的水饱和苯酚和9‑15vt%的甘油,余量为溶剂;提取液B还包括以摩尔浓度计的0.20‑1mol/L的硫氰酸胍、0.4‑0.8mol/L的硫氰酸铵和0.0073‑0.018mol/L的表面活性剂;所述提取液的pH为3.5‑4.5。本发明专利技术提取液中的各组分配比设计合理,相互之间协同作用,使得提取的RNA纯度高、收率高,且蛋白污染低;提取液性质均较稳定,不易受季节、湿度等条件影响,并能充分配合使用,可实现实验室快速、低廉、高质量、规模化提取动物RNA的目的。

【技术实现步骤摘要】
一种提取液及其在提取RNA中的应用
本专利技术属于生物制剂
,具体涉及一种提取液和该提取液在提取RNA中应用。
技术介绍
现代分子生物学实验、临床分子诊断中常常要从组织和细胞中分离和纯化RNA,而RNA的质量高低常常会影响cDNA库、RT-PCR和NorthernBlot等分子生物学实验的成败。现在常用的方法是先通过组织保护液对组织进行保护,再采用提取液对组织或细胞中的RNA进行提取。常用的保护方式包括液氮保护和保护液保护,所述常用保护液包括RNAlater试剂和RNAsafety试剂。其中,液氮保护方式不仅所需条件苛刻,且成本较高,仅适合临时性的组织保护。而保护液通常也需要在低温下进行贮藏,且其中RNAlater溶液与TRIzol、硅胶柱和磁珠法的化学成分不兼容,RNAlater溶液中含有异硫氰酸铵,当组织块从RNAlater溶液中取出用于提取RNA时,若未将组织块上带有的RNAlater溶液清洗干净,则RNAlater溶液中的异硫氰酸铵会与提取液中的酚、SDS结合或反应生成沉淀,导致提取液成分和浓度改变,裂解不彻底,降低RNA的纯度和收率。因此,采用RNAlater溶液保存本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提取液,其特征在于:包括以体积分数计的30‑65vt%的水饱和苯酚和9‑15vt%的甘油,余量为溶剂;提取液B还包括以摩尔浓度计的0.20‑1mol/L的硫氰酸胍、0.4‑0.8mol/L的硫氰酸铵和0.0073‑0.018mol/L的表面活性剂;所述提取液的pH为3.5‑4.5。

【技术特征摘要】
1.一种提取液,其特征在于:包括以体积分数计的30-65vt%的水饱和苯酚和9-15vt%的甘油,余量为溶剂;提取液B还包括以摩尔浓度计的0.20-1mol/L的硫氰酸胍、0.4-0.8mol/L的硫氰酸铵和0.0073-0.018mol/L的表面活性剂;所述提取液的pH为3.5-4.5。2.根据权利要求1所述的一种提取液,其特征在于:所述提取液中的表面活性剂为十二烷基硫酸钠。3.根据权利要求1所述的一种提取液,其特征在于:所述提取液采用乙酸调节pH值。4.根据权利要求1所述的一种提取液,其特征在于:还包括摩尔浓度为6.4mmol/L-19.20mmol/L的β-巯基乙醇。5.根据权利要求1所述的一种提取液,其特征在于:还包括摩尔浓度为0.05-0.15mmol/L的柠檬酸钾。6.根据权利要求1所述的一种提取液,其特征在于:还包括摩尔浓度为74.62μmol/L-223.87μm...

【专利技术属性】
技术研发人员:邱坤赵伟廖东升赵仲玖
申请(专利权)人:成都导胜生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:四川,51

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