提取全血中基因组DNA的方法和试剂盒技术

本发明专利技术提供了一种提取全血中基因组DNA的方法和试剂盒。该方法包括从全血中分离出白细胞；对白细胞进行打断，得到打断后的白细胞；对打断后的白细胞进行细胞裂解和DNA‑蛋白质解交联，得到基因组DNA。通过创造性的采用打断白细胞处理的方法，通过将DNA和蛋白质打断为小片段，从而使DNA‑蛋白质交联的位点暴露，易于被裂解和解交联，从而使所提取的DNA相对更全面完整。且得到的DNA片段满足后续建库的需求，不需要再重新进行打断。从而针对性的解决了游离DNA采血管的保存液对白细胞固定后所导致的染色体Z值异常，出现大量片段缺失和重复的现象。

【技术实现步骤摘要】
提取全血中基因组DNA的方法和试剂盒
本专利技术涉及核酸领域，具体而言，涉及一种提取全血中基因组DNA的方法和试剂盒。
技术介绍
我国每年的新生儿中，发生出生缺陷的比例约为5.9％，缺陷患儿的出生为家庭带来了巨大的精神负担和经济压力；且随着孕妇年龄的增加，缺陷胎儿的患病率显著提高，而70％出生缺陷是可以预先经检测发现的。与传统的产前筛查如血清学筛查和穿刺诊断方法相比，基于孕妇外周血进行的无创产前基因检测具有无创、安全、准确、检测周期短等优点，并且能够有效避免侵入性产前检测带来的流产和感染风险。NIPT通过提取血浆游离DNA从而对胎儿基因组进行检测，但是检测都是在较高的母体DNA背景下进行的，容易引起假阳性或假阴性结果。为了尽可能消除母体DNA背景干扰，提高诊断的准确率，除血浆游离DNA外，通常还需要同时对孕妇的白细胞DNA进行提取和分析，以排除假阳性和假阴性结果。为减少孕妇的负担，目前使用游离DNA采血管进行血液采集，上层血浆检测游离DNA，下层的白细胞用于母体DNA检测。目前，市面上针对白细胞基因组DNA的提取试剂盒主要包括以下步骤：裂解红细胞，得到较为纯净的白细胞；裂解白细胞，促本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提取全血中基因组DNA的方法，所述方法包括：从全血中分离出白细胞；对所述白细胞进行打断，得到打断后的白细胞；对所述打断后的白细胞进行细胞裂解和DNA‑蛋白质解交联，得到所述基因组DNA。

【技术特征摘要】
1.一种提取全血中基因组DNA的方法，所述方法包括：从全血中分离出白细胞；对所述白细胞进行打断，得到打断后的白细胞；对所述打断后的白细胞进行细胞裂解和DNA-蛋白质解交联，得到所述基因组DNA。2.根据权利要求1所述的方法，从全血中分离出白细胞的步骤包括：向所述全血中加入红细胞裂解液，得到裂解浆液；对所述裂解浆液进行过滤，得到所述白细胞。3.根据权利要求1所述的方法，对所述白细胞进行超声打断，得到所述打断后的白细胞；优选地，所述超声打断的条件为：功率为10～50％，超声5～40秒，暂停5～30秒，总时间为0.5～1小时。4.根据权利要求1或3所述的方法，对所述打断后的白细胞进行细胞裂解和DNA-蛋白质解交联，得到所述基因组DNA的步骤包括：采用盐离子溶液和蛋白酶K对所述打断后的白细胞进行细胞裂解和DNA-蛋白质解交联，得到解交联混合液；对所述解交联混合液中的DNA进行沉淀和纯化，得到所述基因组DNA。5.根据权利要求4所述的方法，所述沉淀和纯化的步骤中，采用...

【专利技术属性】
技术研发人员：方楠，白灵，李红蕊，王建伟，伍启熹，刘倩，刘珂弟，唐宇，
申请(专利权)人：北京优迅医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11