The invention provides a method for rapid and early identification of papaya sex, including the following steps: screening and acquiring sex-determining molecular marker Sex79 in papaya hybrid population, designing primers according to the nucleotide sequence of sex-determining molecular marker Sex79; using the primers for PCR amplification, detection and result determination. The invention provides a single DNA molecular marker Sex79, and designs a pair of primers for Sex79. The primers can be directly used for sex identification of papaya, and can be directly detected by PCR and electrophoresis without extracting DNA. The method can also be directly detected by test strip. The operation is simple, the cost is saved, and the method is fast and efficient. The invention also designs LAMP detection primers based on sex-determining molecular marker Sex79 and combines LAMP technology to realize rapid field batch detection.
【技术实现步骤摘要】
一种快速早期鉴定番木瓜性别的方法
本专利技术涉及植物性别鉴定
,特别涉及一种快速早期鉴定番木瓜性别的方法。
技术介绍
番木瓜是雌花雄花两性花异株的(trioecious)植物。通常番木瓜有三种性别的树:雌树(Female)、雄树(Male)和两性树(Hermaphrodite)。只有雌树和两性树才能结果,在传统耕作中,需要通过播种、开花后才能判定番木瓜性别,此过程耗费3-6个月的时间,限制了番木瓜的生产。目前判断番木瓜性别的主要技术有:(1)外部形态:番木瓜在苗期鉴定性别对其育种及栽培均有一定意义,但在幼苗形态上各种类型的株型几乎没有区别,难以实现苗期快速鉴定;(2)生理生化差异:Jaiswal研究了番木瓜无性组织和生殖组织的酸性和碱性磷酸酶活力,发现雄株生殖组织的酸性和碱性磷酸酶活力高于雌株。此方法受到不同栽培条件、取样部位以及取样时间的影响,存在很高的假阳性率,且成本高,操作复杂;(3)同工酶图谱:陈中海采用同工本酶技术研究番木瓜性别发现雌株、雄株和两性株过氧化物酶(PODD)、酯酶(ESTD)和多酚氧化酶(PPOD)同工酶谱上存在差异。此技术操作复杂,成本高,同时只能适用于成熟植株,不能对苗期进行性别鉴定;(4)分子标记技术:番木瓜性别的分子水平研究一直是研究热点和难点。(a)夏威夷大学的Deputy等获得了与番木瓜性别紧密连锁的3个RAPD标记,经测序合成引物转换为SCAR标记,并认为SCART12和SCARW11在两性株和雄株与间能够产生特异的PCR产物,而在雌株中却极少出现;SCART1在所有的株性间均有该PCR产物产生,因此利用T1、T ...
【技术保护点】
1.一种快速早期鉴定番木瓜性别的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、获得DNA分子标记:在番木瓜杂交群体中筛选获得性别决定分子标记Sex79,所述性别决定分子标记Sex79的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;S2、设计引物:根据性别决定分子标记Sex79的核苷酸序列设计引物;S3、采用步骤S2所述的引物进行PCR扩增,检测,结果判定。
【技术特征摘要】
1.一种快速早期鉴定番木瓜性别的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、获得DNA分子标记:在番木瓜杂交群体中筛选获得性别决定分子标记Sex79,所述性别决定分子标记Sex79的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示;S2、设计引物:根据性别决定分子标记Sex79的核苷酸序列设计引物;S3、采用步骤S2所述的引物进行PCR扩增,检测,结果判定。2.根据权利要求1所述的快速早期鉴定番木瓜性别的方法,其特征在于,性别决定分子标记Sex79位于番木瓜雄性特异区。3.根据权利要求2所述的快速早期鉴定番木瓜性别的方法,其特征在于,步骤S2中,所述引物的核苷酸序列如SEQIDNO:2和SEQIDNO:3所示。4.根据权利要求3所述的快速早期鉴定番木瓜性别的方法,其特征在于,步骤S3中,以番...
【专利技术属性】
技术研发人员:贾瑞宗,郭安平,朱芸,魏卿,
申请(专利权)人:中国热带农业科学院热带生物技术研究所,
类型:发明
国别省市:海南,46
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