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热稳定性提高的β-葡萄糖苷酶突变体及其应用制造技术

技术编号:20561133 阅读:54 留言:0更新日期:2019-03-14 05:35
本发明专利技术公开了热稳定性提高的β‑葡萄糖苷酶突变体及其应用。本发明专利技术提供了一种热稳定性提高的β‑葡萄糖苷酶突变体,是在野生型β‑葡萄糖苷酶氨基酸序列的基础上突变得到,突变位点为T167I/A298G或T167I/V181F/A187E/A298G,得到突变体1R2和3R1的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1和2所示。该β‑葡萄糖苷酶突变体1R2和3R1在50℃下的半衰期分别是野生酶Ks5A7的15倍和4800倍,对纤维二糖的水解活性分别是野生酶的1.8和1.6倍,且依然保持了对葡萄糖的高耐受性。因此,利用该β‑葡萄糖苷酶突变体可以大大提高β‑葡萄糖苷酶的热稳定性,为其在食品、生物能源、纺织、造纸、医药领域提供了应用基础。

Mutant beta-glucosidase with improved thermal stability and its application

The present invention discloses a mutant of beta glucosidase with improved thermal stability and its application. The present invention provides a mutant of beta glucosidase with improved thermal stability, which is obtained by mutation based on the amino acid sequence of wild beta glucosidase. The mutant site is T167I/A298G or T167I/V181F/A187E/A298G. The amino acid sequences of mutant 1R2 and 3R1 are obtained as shown in SEQ ID NO.1 and 2, respectively. The half-lives of the beta-glucosidase mutants 1R2 and 3R1 were 15 and 4800 times higher than those of the wild enzyme Ks5A7 at 50 C, respectively. The hydrolysis activity of cellobiose was 1.8 and 1.6 times higher than that of the wild enzyme, and the high tolerance to glucose was maintained. Therefore, using this mutant of beta-glucosidase can greatly improve the thermal stability of beta-glucosidase and provide a basis for its application in food, bio-energy, textile, paper-making and pharmaceutical fields.

【技术实现步骤摘要】
热稳定性提高的β-葡萄糖苷酶突变体及其应用
本专利技术属于基因工程和酶工程
,更具体地,涉及热稳定性提高的β-葡萄糖苷酶突变体及其应用。
技术介绍
纤维素是地球上分布最广泛、含量最丰富的可再生资源,全球每年通过光合作用产生的纤维素多达1011-1012吨。纤维素的降解产物葡萄糖,是可替代能源生物乙醇的原料。因此,纤维素的高效降解对可替代能源的发展至关重要。纤维素酶是一类多组分酶系的总称,这些酶通过协同作用,分解纤维素产生纤维二糖和纤维寡糖,最终将其水解为葡萄糖。其中,β-葡萄糖苷酶能水解纤维二糖及纤维寡糖生成葡萄糖。β-葡萄糖苷酶(EC3.2.1.21),全称β-D-吡喃葡萄糖苷葡萄糖水解酶,是一类可以水解糖类和糖苷化合物的非还原性末端糖苷键,释放出相应糖苷配基和葡萄糖的酶。该类酶广泛分布于古菌、细菌和真核生物中,发挥着多种生物学功能,例如,微生物和动物体内生物质转化、糖脂和糖苷裂解、植物的木质化以及细胞壁的寡糖代谢等。β-葡萄糖苷酶广泛应用于食品、生物能源、纺织、造纸、医药等各个领域,在降解纤维素;水解果汁、果酒中的风味前体,释放风味活性物质,改善饮料的风味和品质;水解异黄酮本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.热稳定性提高的β‑葡萄糖苷酶突变体,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.热稳定性提高的β-葡萄糖苷酶突变体,其特征在于,其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.热稳定性提高的β-葡萄糖苷酶突变体,其特征在于,其氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。3.热稳定性提高的β-葡萄糖苷酶突变体基因,其特征在于,编码权利要求1所述的突变体。4.热稳定性提高的β-葡萄糖苷酶突变体基因,其特征在于,编码权利要求2所述的突变体。5.根据权利要求3所述的突变体基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQI...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘玉焕曹立创黄欣李水凤覃宗敏孔伟
申请(专利权)人:中山大学
类型:发明
国别省市:广东,44

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