新型碳正离子多肽缩合剂在多肽合成中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种新型碳正离子多肽缩合剂在多肽合成中的应用，属于多肽合成技术领域。本发明专利技术的技术方案要点为：新型碳正离子多肽缩合剂在多肽合成中的应用，该新型碳正离子多肽缩合剂为N,N,N',N'‑四甲基‑O‑(3,4‑二氢‑4‑氧代‑1,2,3‑苯并三嗪‑1‑基)脲四氟硼酸盐，其结构式为

Application of a New Carbon Positive Ion Polypeptide Condenser in Polypeptide Synthesis

The invention discloses the application of a novel carbonium cationic polypeptide condensation agent in polypeptide synthesis, belonging to the technical field of polypeptide synthesis. The main points of the technical scheme of the present invention are: the application of a new type of carbon positive ion polypeptide condensation agent in the synthesis of polypeptide. The new type of carbon positive ion polypeptide condensation agent is N, N, N', N', tetramethyl O (3,4 dihydro 4 oxy 1,2,3 benzotriazine 1 1 group) urea tetrafluoroborate, and its structure is as follows

【技术实现步骤摘要】
新型碳正离子多肽缩合剂在多肽合成中的应用
本专利技术属于多肽合成
，具体涉及一种新型碳正离子多肽缩合剂在多肽合成中的应用。
技术介绍
多肽合成的方法分为酶促法和化学法。酶促法，优点是具有专一性好，无需保护，甚至可以在水中进行，缺点是尚不能大规模应用。化学法，最早使用的是将氨基酸活化为酰氯、叠氮、对称酸酐以及混合酸酐的方法，存在氨基酸消旋、反应试剂危险和制备复杂等缺点，逐渐被后来的肽缩合试剂法取代。理想的多肽缩合剂应该具有制备方便、价格低、活性高、无消旋及副反应少等特点。目前使用的多肽缩合剂按照其结构可分为二亚胺型、磷正离子型和脲正离子型。第一个多肽缩合剂是于1955年开发出来的N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)(J.Am.Chem.Soc.,1955,77:1067.)。但是该多肽缩合剂在反应中生成的N,N'-二环己基脲(DCU)在大多数有机溶剂中溶解度很小，很难除尽。自1975年，Castro等人设计合成了第一个基于HOBt的磷正离子型缩合剂BOP以来，1-羟基苯并三唑HOBt为活化酯的磷正离子和碳正离子型肽缩合剂迅速发展，再后来这种以3-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮衍生化的碳正离子肽缩合剂N,N,N',N'-四甲基-O-(3,4-二氢-4-氧代-1,2,3-苯并三嗪-3-基)脲四氟硼酸盐(TDBTU)(OrganicSynthesis,1-3,2013；WO2005007634；TetrahedronLetters,1989,30(15),1927-1930.)也得到了制备和应用。2014年，专利(ZL20141010745.2)报道了3-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮的同分异构体，1-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮的制备方法，并应用在多肽缩合中(ZL201410107410.6)。目前，基于1-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮的有机碳正离子缩合剂应用尚未见相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供了一种新型碳正离子多肽缩合剂在多肽合成中的应用。本专利技术为实现上述目的采用如下技术方案，新型碳正离子多肽缩合剂在多肽合成中的应用，其特征在于：该新型碳正离子多肽缩合剂为N,N,N',N'-四甲基-O-(3,4-二氢-4-氧代-1,2,3-苯并三嗪-1-基)脲四氟硼酸盐，其结构式为本专利技术所述的新型碳正离子多肽缩合剂在多肽合成中的应用，其特征在于具体过程为：在有机溶剂中加入N-端保护的氨基酸或多肽片段、C-端保护的氨基酸或多肽片段、有机碱和碳正离子多肽缩合剂，于-5～30℃搅拌反应合成目标产物多肽，其中有机溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃或N,N-二甲基甲酰胺，有机碱为二异丙基乙胺、三乙胺、DBU或碳酸钾。进一步优选，所述N-端保护的氨基酸或多肽片段、C-端保护的氨基酸或多肽片段、有机碱与碳正离子多肽缩合剂的投料摩尔比为1:1:1-2:1-2。进一步优选，所述N-端保护的氨基酸或多肽片段为Cbz-Phe-OH、Cbz-Val-OH或Cbz-Ala-OH，所述C-端保护的氨基酸或多肽片段为H2N-Leu-OMe·HCl、H2N-Val-OMe·HCl、H2N-Ala-OMe·HCl、H2N-Phe-OMe·HCl或H2N-Gly-OEt·HCl。本专利技术与现有技术相比具有以下有益效果：使用新型碳正离子多肽缩合剂合成的产物用Youngtest方法进行测试，没有观察到氨基酸的消旋，进一步表明该新型碳正离子多肽缩合剂N,N,N',N'-四甲基-O-(3,4-二氢-4-氧代-1,2,3-苯并三嗪-1-基)脲四氟硼酸盐能够很好地抑制缩合过程中氨基酸的消旋。具体实施方式通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本专利技术上述内容实现的技术均属于本专利技术的范围。以Cbz-Phe-OH和H2N-Leu-OMe·HCl缩合生成Z-Phe-Leu-OMe为例(实施例1～5)。实施例1Z-Phe-Leu-OMe的合成取10mmolCbz-Phe-OH和10mmolH2N-Leu-OMe·HCl置于250mL圆底烧瓶，再加入50mL二氯甲烷、10mmol二异丙基乙胺和10mmol碳正离子缩合剂，于-5℃搅拌反应，反应结束后依次用水(100mL)、1mol/LHCl溶液(100mL)、饱和Na2CO3溶液(100mL)和饱和食盐水溶液(100mL)洗涤，有机相用无水Na2SO4干燥过夜，过滤除去干燥剂，减压蒸馏除去溶剂得到粗产品，精制后得白色固体，产率为98.1％，纯度为99.5％。MS(ESI,m/z):449.2[M+Na]+。实施例2Z-Phe-Leu-OMe的合成取10mmolCbz-Phe-OH和10mmolH2N-Leu-OMe·HCl置于250mL圆底烧瓶，再加入50mL三氯甲烷、20mmol二异丙基乙胺和20mmol碳正离子缩合剂，于30℃搅拌反应，反应结束后依次用水(100mL)、1mol/LHCl溶液(100mL)、饱和Na2CO3溶液(100mL)和饱和食盐水溶液(100mL)洗涤，有机相用无水Na2SO4干燥过夜，过滤除去干燥剂，减压蒸馏除去溶剂得到粗产品，粗品精制后得白色固体，产率为97.0％，纯度为99.3％。实施例3Z-Phe-Leu-OMe的合成取10mmolCbz-Phe-OH和10mmolH2N-Leu-OMe·HCl置于250mL圆底烧瓶，再加入50mL四氢呋喃、10mmol三乙胺和20mmol碳正离子缩合剂，于0℃搅拌反应，反应结束后依次用水(100mL)、1mol/LHCl溶液(100mL)、饱和Na2CO3溶液(100mL)和饱和食盐水溶液(100mL)洗涤，有机相用无水Na2SO4干燥过夜，过滤除去干燥剂，减压蒸馏除去溶剂得到粗产品，粗品精制后得白色固体，产率为97.8％，纯度为99.4％。实施例4Z-Phe-Leu-OMe的合成取10mmolCbz-Phe-OH和10mmolH2N-Leu-OMe·HCl置于250mL圆底烧瓶，再加入50mLN,N-二甲基甲酰胺、20mmolDBU和20mmol碳正离子缩合剂，于0℃搅拌反应，反应结束后依次用水(100mL)、1mol/LHCl溶液(100mL)、饱和Na2CO3溶液(100mL)和饱和食盐水溶液(100mL)洗涤，有机相用无水Na2SO4干燥过夜，过滤除去干燥剂，减压蒸馏除去溶剂得到粗产品，粗品精制后得白色固体，产率为98.6％，纯度为99.7％。实施例5Z-Phe-Leu-OMe的合成取10mmolCbz-Phe-OH和10mmolH2N-Leu-OMe·HCl置于250mL圆底烧瓶，再加入50mL二氯甲烷、15mmol碳酸钾和15mmol碳正离子缩合剂，于3℃搅拌反应，反应结束后依次用水(100mL)、1mol/LHCl溶液(100mL)、饱和Na2CO3溶液(100mL)和饱和食盐水溶液(100mL)洗涤，有机相用无水Na2SO4干燥过夜，过滤除去干燥剂，减压蒸馏除去溶剂得到粗产品，粗品精制后得白色固体，产率为98.0％，纯度为99.8％。实施例6Z-Val-Val-OMe取5mmolCb本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.新型碳正离子多肽缩合剂在多肽合成中的应用，其特征在于：该新型碳正离子多肽缩合剂为N,N,N',N'‑四甲基‑O‑(3,4‑二氢‑4‑氧代‑1,2,3‑苯并三嗪‑1‑基)脲四氟硼酸盐，其结构式为

【技术特征摘要】
1.新型碳正离子多肽缩合剂在多肽合成中的应用，其特征在于：该新型碳正离子多肽缩合剂为N,N,N',N'-四甲基-O-(3,4-二氢-4-氧代-1,2,3-苯并三嗪-1-基)脲四氟硼酸盐，其结构式为2.根据权利要求1所述的新型碳正离子多肽缩合剂在多肽合成中的应用，其特征在于具体过程为：在有机溶剂中加入N-端保护的氨基酸或多肽片段、C-端保护的氨基酸或多肽片段、有机碱和碳正离子多肽缩合剂，于-5～30℃搅拌反应合成目标产物多肽，其中有机溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃或N,N-二甲基甲酰胺，有机碱为二异丙基乙胺、三乙胺、DBU或碳酸钾。3.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔振伟，张玮玮，张甫青，李玲，
申请(专利权)人：重庆奥舍生物化工有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50