一种制备罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白的方法技术

本发明专利技术提供一种制备罗非鱼‑豆粕共沉淀蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.将罗非鱼肉和脱脂豆粕粉以1:5‑5:1的质量比混合（干基计），以物料:水=1:5‑15(g:mL)加冰蒸馏水；S2.10000‑15000r/min均质1‑5 min；S3.将均质混合物的pH调整为3.0‑8.0，静置5min；S4.加入2%质量比的助溶剂，室温搅拌溶解5‑30 min；S5.4℃、8000‑11000 r/min下离心10‑20 min；S6.取上清液，调整pH使上清液出现沉淀，重复步骤S5；S7.收集步骤S5、S6离心后的沉淀，真空冷冻干燥，获得罗非鱼‑豆粕共沉淀蛋白。本发明专利技术制备出新型“双蛋白”制品，以改善鱼肉蛋白溶解性、乳化性、凝胶特性等，开发动植物蛋白相联合的新型双蛋白制品。

A Method for Preparing Tilapia-Soybean Meal Coprecipitated Protein

The invention provides a method for preparing co-precipitated protein from tilapia and soybean meal, which is characterized by the following steps: S1. Mixing tilapia meat and defatted soybean meal powder at a mass ratio of 1:5 5:1 (dry basis) with material: water = 1:5 15 (g: mL) plus ice distilled water; S2.10000 15000r/min with homogeneous 1 5 min; S3. Adjusting the pH of homogeneous mixture to 3.0 8.0, and adding S4. The supernatant was centrifuged at room temperature for 10 20 min at S5.4, 8000, 11000 r/min, and the supernatant was precipitated by adjusting the pH to repeat 5. S7. The co-precipitated protein of tilapia and soybean meal was obtained by collecting the precipitation after centrifugation and vacuum freeze-drying. The new double protein product is prepared to improve the solubility, emulsification and gel properties of fish protein, and develop a new type of double protein product combined with animal and plant protein.

【技术实现步骤摘要】
一种制备罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白的方法
本专利技术属于水产蛋白高值化利用
，具体涉及一种制备罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白的方法。
技术介绍
我国是罗非鱼生产大国，贸易大国，也是消费大国，罗非鱼出口主要是鲜销，且产品以冻罗非鱼片和冻整条罗非鱼为主。罗非鱼加工产品中初级加工占主要部分，产品较单一，利润低，因此制约罗非鱼产业的发展。针对以上问题，精深加工以提高罗非鱼附加值和利润率。不同种类的蛋白一般具有不同营养特性和功能特性，混合不同来源的蛋白可以提高高蛋白质原料的利用，克服单一来源蛋白质中必需氨基酸含量的不足、营养价值不和功能特性较差等问题。蛋白质的混合主要包括蛋白原料直接混合（物理混合）和化学混合。共沉淀蛋白（Co-precipitatedprotein,Co-PP）是指采用等电点沉淀、酸-热沉淀、或酸-热诱导并辅以沉淀剂如CaCl2等方法，从一种或者多种原料中得到的一种混合蛋白。不同来源的蛋白质制备的共沉淀蛋白，不仅在营养上可以实现氨基酸的互补，而且有良好的功能特性和理想的感官特性。以上研究说明共沉淀蛋白在食品工业中有巨大的潜在应用。目前，以罗非鱼为原料，市场上出现的新型产品有鱼糜制品、腌制品、冷冻品等。罗非鱼蛋白在实际生产加工过程中不稳定，易发生变性，且溶解性较差，进而引起蛋白的结构和功能特性发生改变。这使得罗非鱼蛋白凝胶特性和乳化性能较低，影响产品的品质，限制其在食品领域的应用。目前，急需一种提高罗非鱼产品的品质，扩大其在食品领域的应用的方法，提高罗非鱼的整体利润率。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术利用罗非鱼蛋白的营养优势和大豆蛋白的功能特性优势，以罗非鱼肉和脱脂豆粕为原料，用pH调节法制备共沉淀蛋白，制备新型“双蛋白”制品，以改善鱼肉蛋白溶解性、乳化性、凝胶特性等，开发动植物蛋白相联合的新型双蛋白制品。本专利技术的技术方案为：一种制备罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.将罗非鱼肉和脱脂豆粕粉以1:5-5:1的质量比混合（干基计），以物料:水=1:5-15(g:mL)加冰蒸馏水；S2.10000-15000r/min均质1-5min；S3.将均质混合物的pH调整为3.0-8.0，静置5min；S4.加入2%质量比的助溶剂，室温搅拌溶解5-30min；所述质量比为助溶剂与加入的罗非鱼和豆粕质量之和的比值。S5.4℃、8000-11000r/min下离心10-20min；S6.取上清液，调整pH使上清液出现沉淀，重复步骤S5；S7.收集步骤S5、S6离心后的沉淀，真空冷冻干燥，获得罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白。进一步的，步骤S3中，是将均质混合物的pH4.0-6.0。进一步的，步骤S6中，是将pH调整至4.0-6.0。通过发现偏离等电点的酸性和碱性pH范围内，可溶性蛋白得率呈现上升趋势，且在极端酸碱pH2.0、3.0、11.0、12.0条件下溶解得率达到最大。这是因为酸性范围内，部分酸性氨基酸的残基支链羧基所带的负电荷被中和，所以蛋白分子带有净正电荷；碱性条范围内，部分氨基酸的碱性集团发生去质子化反应，导致蛋白分子带有净负电荷，蛋白的水合作用增强，蛋白溶解性增大。本专利技术通过大量的创造性试验发现，罗非鱼肉和脱脂豆粕粉以质量比（干基计）混合提取的可溶性蛋白溶液在pH2.0、3.0、11.0和12.0溶解，pH4.0-6.0时沉淀，沉淀得率为88%-95%，优选的，在pH4.5沉淀时的得率最高，由此确定罗非鱼-豆粕酸/碱可溶性蛋白的最适等电点为4.5。而对于植物蛋白酸沉等电点pH一般相对较低，罗非鱼与豆粕混合后，酸沉等电点的pH偏向于豆粕的等电点。因此可以确定罗非鱼-豆粕酸/碱可溶性蛋白的沉淀pH为4.0-6.0，优选为pH4.5。进一步的，步骤S1中，是将罗非鱼肉和脱脂豆粕粉以1:2-2:1的质量比混合（干基计），以物料:水=1:7-10(g:mL)加冰蒸馏水。本专利技术通过大量创造性实验，结合两种不同蛋白质的特性，获得最佳的混合比例以及溶解时的料水比，获得最佳的共沉淀蛋白制备条件。进一步的，所述助溶剂包括以下重量份数组分：卵磷脂1-10、甘露糖12-19、二氧化硅3-9、溶菌酶0.2-0.9、赖氨酸11-18、精氨酸14-22、谷氨酸7-16。本专利技术中，添加的助溶剂的作用是能够在罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白的形成的过程中，增强其在等电点附近蛋白质的交互作用，使罗非鱼蛋白与豆粕蛋白进一步的结合形成稳定的共沉淀蛋白结构，提高共沉淀蛋白的得率。具体的，在溶菌酶、赖氨酸、精氨酸、谷氨酸共存的环境下，有助于蛋白质复性，促进蛋白质正确折叠成天然活性态，避免蛋白质在形成共沉淀蛋白前提前发生不可逆聚集和沉淀，确保罗非鱼蛋白与豆粕蛋白在等电点的交互作用；同时，卵磷脂、甘露糖、二氧化硅能够提高整个反应体系的均一性和稳定性，使得罗非鱼蛋白与豆粕蛋白在等电点附近的不会出现不理想的反应。进一步的，所述助溶剂包括以下重量份数组分：卵磷脂3-7、甘露糖14-16、二氧化硅4-7、溶菌酶0.3-0.6、赖氨酸13-17、精氨酸15-20、谷氨酸9-14。进一步的，所述助溶剂包括以下重量份数组分：卵磷脂5、甘露糖15、二氧化硅5.5、溶菌酶0.4、赖氨酸14、精氨酸17、谷氨酸11。特别的，所述溶菌酶的酶活为100-300U/g，优选的，所述溶菌酶的酶活为150U/g。本专利技术的创新点在于：由于罗非鱼蛋白在实际生产加工过程中不稳定，易发生变性，且溶解性较差，进而引起蛋白的结构和功能特性发生改变，使得罗非鱼蛋白凝胶特性和乳化性较低。本专利技术通过结合大豆分离蛋白较好的溶解性、乳化稳定性、发泡性和良好的感官特性等优点，开发制备出一种罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白，使得鱼肉蛋白溶解性、乳化性、凝胶特性等具有很好地改善，本专利技术开发出了一种动植物蛋白相联合的新型双蛋白制品。通过专利技术制备的罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白得率高，安全稳定，为提高罗非鱼产品的品质，扩大其在食品领域的应用的方法，提高罗非鱼的整体利润率提供一种有效途径。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。实施例1一种制备罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.将罗非鱼肉和脱脂豆粕粉以1:5的质量比混合（干基计），以物料:水=1:5(g:mL)加冰蒸馏水；S2.10000r/min均质1min；S3.将均质混合物的pH调整为3.0，静置5min；S4.加入2%质量比的助溶剂，室温搅拌溶解5min；S5.4℃、8000r/min下离心10min；S6.取上清液，调整pH使上清液出现沉淀，重复步骤S5；S7.收集步骤S5、S6离心后的沉淀，真空冷冻干燥，获得罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白。进一步的，步骤S6中，是将pH调整至4.5。进一步的，所述助溶剂包括以下重量份数组分：卵磷脂1、甘露糖12、二氧化硅3、150U/g溶菌酶0.2、赖氨酸11、精氨酸14、谷氨酸7。本专利技术中，添加的助溶剂的作用是能够在罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白的形成的过程中，增强其在等电点附近蛋白质的交互作用，使罗非鱼蛋白与豆粕蛋白进一步的结合形成稳定的共沉淀蛋白结构，提高共沉淀蛋白的得率。实施例2一种制备罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白的方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备罗非鱼‑豆粕共沉淀蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.将罗非鱼肉和脱脂豆粕粉以1:5‑5:1的质量比混合（干基计），以物料:水=1:5‑15(g:mL)加冰蒸馏水；S2.10000‑15000r/min均质1‑5 min；S3.将均质混合物的pH调整为3.0‑8.0，静置5min；S4.加入2%质量比的助溶剂，室温搅拌溶解5‑30 min；S5. 4 ℃、8000‑11000 r/min下离心10‑20 min；S6.取上清液，调整pH使上清液出现沉淀，重复步骤S5；S7.收集步骤S5、S6离心后的沉淀，真空冷冻干燥，获得罗非鱼‑豆粕共沉淀蛋白。

【技术特征摘要】
1.一种制备罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.将罗非鱼肉和脱脂豆粕粉以1:5-5:1的质量比混合（干基计），以物料:水=1:5-15(g:mL)加冰蒸馏水；S2.10000-15000r/min均质1-5min；S3.将均质混合物的pH调整为3.0-8.0，静置5min；S4.加入2%质量比的助溶剂，室温搅拌溶解5-30min；S5.4℃、8000-11000r/min下离心10-20min；S6.取上清液，调整pH使上清液出现沉淀，重复步骤S5；S7.收集步骤S5、S6离心后的沉淀，真空冷冻干燥，获得罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白。2.根据权利要求1所述的制备罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白的方法，其特征在于，步骤S3中，是将均质混合物的pH4.0-6.0。3.根据权利要求1所述的制备罗非鱼-豆粕共沉淀蛋白的方法，其特征在于，步骤S6中，是将pH调整至4.0-6.0。4.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪鹏志，周春霞，齐慧红，朱东宏，刘唤明，李承勇，千忠吉，杨萍，
申请(专利权)人：广东海洋大学，
类型：发明
国别省市：广东,44