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一种产纤维素酶的芽孢杆菌及其应用制造技术

技术编号:20471833 阅读:18 留言:0更新日期:2019-03-02 14:27
本发明专利技术公开了一种产纤维素酶的芽孢杆菌及其应用,属环境生物技术领域。本发明专利技术菌株Bacillus thermolactis strain B209具有良好的天然纤维素降解能力,与其他各菌株可良好共生,复配比例科学合理,使用该菌剂堆制堆肥,堆体达到高温所需时间短,高温持续时间长,纤维素降解率高,不仅可有效加快堆肥反应的速度,还可改善堆肥的无害化效果,具有极为广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种产纤维素酶的芽孢杆菌及其应用
本专利技术涉及一种产纤维素酶的芽孢杆菌及其应用,属环境生物

技术介绍
据统计,我国农作物秸秆近20种,年产量约7.0×108t,约占世界秸秆总量的25%,其中,稻草2.0×108t,玉米秸秆2.0×108t,小麦秸秆1.0×108t,豆类和杂粮作物秸秆1.0×108t,花生、薯类和甜菜等秸秆藤蔓1.0×108t。随着社会经济迅速发展和人口的增加,农作物秸秆总量将以年5%~10%的速度递增。植物细胞壁中最主要的成分就是纤维素,它决定了细胞壁的结构。纤维素是由葡萄糖残基组成,以纤维二糖为基本连接单位的天然高分子化合物,是自然界中最丰富的可再生资源,而纤维素代谢则是生物圈碳源循环的重要组成部分。农作物秸秆富含纤维素等有机物,同时含有作物生长所需的氮、磷、钾、钙、镁等营养元素,碳氮比较高,与碳氮比较低的有机废弃物混合堆肥,是其重要的资源化利用途径之一。然而,天然纤维素分子排列规则、聚集成束,较难生物降解。针对秸秆与其他堆肥原料的性质和组成,筛选高效降解天然纤维素的菌株、与其他微生物菌种复配获得复合微生物菌剂,对加快秸秆类原料的堆肥化进程、提高堆肥化效率和成品品质意义重大。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供一株产纤维素酶的BacillusthermolactisstrainB209,已于2018年7月13日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNo:M2018474,保藏地址为中国,武汉,武汉大学。该菌株的发酵培养条件为:温度40℃-60℃,通气量0.5-1.0vvm,搅拌转速200-600r/min,溶解氧大于10%,pH值7.0-7.5。本专利技术的第二个目的是提供含有所述BacillusthermolactisstrainB209的微生物菌剂。在本专利技术的一种实施方式中,所述微生物菌剂还含有热噬淀粉芽孢杆菌B202、嗜热短芽芽孢杆菌B205、耐硼赖氨酸芽孢杆菌与库德里阿兹威氏毕赤酵母。在本专利技术的一种实施方式中,所述热噬淀粉芽孢杆菌B202已于2018年7月13日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNo:M2018471,保藏地址为中国,武汉,武汉大学。在本专利技术的一种实施方式中,所述嗜热短芽芽孢杆菌(Bacillusthermoruberstrain)B205,已于2018年7月13日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNo:M2018472,保藏地址为中国,武汉,武汉大学。在本专利技术的一种实施方式中,所述耐硼赖氨酸芽孢杆菌和库德里阿兹威氏毕赤酵母可选用商业化菌株,例如LysinibacillusboronitoleransATCCBAA-1146、PichiakudriavzeviiATCC24210。本专利技术的第三个目的是提供所述BacillusthermolactisstrainB209的应用。在本专利技术的一种实施方式中,所述应用是在食品厂污水处理剩余污泥与秸秆混合堆肥。在本专利技术的一种实施方式中,所述应用是制备用于食品厂污水处理剩余污泥与秸秆混合堆肥的微生物菌剂。在本专利技术的一种实施方式中,所述微生物菌剂是将BacillusthermolactisstrainB209、热噬淀粉芽孢杆菌B202CCTCCNo.M2018471、嗜热短芽芽孢杆菌B205CCTCCNo.M2018472、耐硼赖氨酸芽孢杆菌与库德里阿兹威氏毕赤酵母的发酵液按比例混合,使各菌种的活菌数之比为48-80:60-120:30-50:12-22:0.5-1.5。在本专利技术的一种实施方式中,所述微生物菌剂的活菌总数为1.0×109-1.0×1010CFU/mL或者CFU/g。本专利技术的第四个目的是提供所述微生物菌剂的制备方法,所述方法为将BacillusthermolactisstrainB209、热噬淀粉芽孢杆菌B202、嗜热短芽芽孢杆菌B205、耐硼赖氨酸芽孢杆菌与库德里阿兹威氏毕赤酵母分别接种至培养基中,获得BacillusthermolactisstrainB209、热噬淀粉芽孢杆菌B202、嗜热短芽芽孢杆菌B205、耐硼赖氨酸芽孢杆菌与库德里阿兹威氏毕赤酵母的发酵液;将获得的发酵液按比例混合,添加载体辅料,得到包含BacillusthermolactisstrainB209的液态复合微生物菌剂。在本专利技术的一种实施方式中,所述载体辅料包括但不限于褐煤、沸石、石粉中的一种或几种。在本专利技术的一种实施方式中,所述复合微生物菌剂的制备方法为将获得的BacillusthermolactisstrainB209、热噬淀粉芽孢杆菌B202、嗜热短芽芽孢杆菌B205、耐硼赖氨酸芽孢杆菌与库德里阿兹威氏毕赤酵母的发酵液按比例混合,添加粉碎秸秆、炭化秸秆、麸皮中的一种或几种,热风干燥后,得到包含BacillusthermolactisstrainB209的固态复合微生物菌剂。在本专利技术的一种实施方式中,所述获得BacillusthermolactisstrainB209、热噬淀粉芽孢杆菌B202、嗜热短芽芽孢杆菌B205、耐硼赖氨酸芽孢杆菌的发酵液为将其分别接种至高温灭菌后的营养肉汤培养基中,接种量为发酵培养基体积的3%-10%(v/v),静置培养20-30h;所述耐硼赖氨酸芽孢杆菌的培养温度为28-37℃;所述BacillusthermolactisstrainB209、热噬淀粉芽孢杆菌B202与嗜热短芽芽孢杆菌B205的培养温度为30-60℃;当活菌数大于或等于1×108CFU/mL时,获得所述BacillusthermolactisstrainB209、热噬淀粉芽孢杆菌B202、嗜热短芽芽孢杆菌B205、耐硼赖氨酸芽孢杆菌的发酵液。在本专利技术的一种实施方式中,所述营养肉汤培养基为高温灭菌后的营养肉汤培养基。在本专利技术的一种实施方式中,所述营养肉汤培养基的成分包含葡萄糖15.0g,酵母膏5.0g,氯化钙(带两个结晶水)0.2g,水1000mL。在本专利技术的一种实施方式中,所述获得库德里阿兹威氏毕赤酵母的发酵液为将库德里阿兹威氏毕赤酵母分别接种至高温灭菌后的马铃薯葡萄糖培养基中,接种量为发酵培养基体积的3%-10%(v/v),静置培养20-30h,培养温度为20-30℃;当活菌数大于或等于1×108CFU/mL时,获得所述深库德里阿兹威氏毕赤酵母的发酵液。在本专利技术的一种实施方式中,所述马铃薯葡萄糖培养基为高温灭菌后的马铃薯葡萄糖培养基。在本专利技术的一种实施方式中,所述马铃薯葡萄糖培养基的成分包含马铃薯浸粉6.0g,葡萄糖20.0g,水1000mL。本专利技术第五个目的是提供上述一种复合微生物菌剂的应用方法,包含如下步骤:(1)将所述复合微生物菌剂和堆肥原料按照0.1-0.5:100的比例进行混合;(2)将混合物堆制堆肥,测量堆体温度,按照温度变化进行翻堆。在本专利技术的一种实施方式中,所述(2)是将所述混合物堆制堆肥,每天早上8:00和下午6:00测量堆体温度,当温度高于55℃时,每天翻堆一次,随着堆制时间的延长,堆体温度开始下降,当温度低于40℃时,停止翻堆,堆制结束。本专利技术的有益效果:(1)本专利技术公开了一株产纤维素酶的热噬淀粉芽孢杆菌B202CCTCCNo.M2018474。该菌株本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株产纤维素酶的Bacillus thermolactis strain B209,已于2018年7月13日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC No:M 2018474,保藏地址为中国,武汉,武汉大学。

【技术特征摘要】
1.一株产纤维素酶的BacillusthermolactisstrainB209,已于2018年7月13日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNo:M2018474,保藏地址为中国,武汉,武汉大学。2.含有权利要求1所述BacillusthermolactisstrainB209的微生物菌剂。3.根据权利要求2所述的微生物菌剂,其特征在于,含有热噬淀粉芽孢杆菌B202、嗜热短芽芽孢杆菌B205、耐硼赖氨酸芽孢杆菌与库德里阿兹威氏毕赤酵母。4.根据权利要求3所述的微生物菌剂,其特征在于,BacillusthermolactisstrainB209、热噬淀粉芽孢杆菌B202、嗜热短芽芽孢杆菌B205、耐硼赖氨酸芽孢杆菌与库德里阿兹威氏毕赤酵母的活菌数之比为48-80:60-120:30-50:12-22:0.5-1.5;所述微生物菌剂的活菌总数为1.0×109-1.0×1010CFU/mL或者CFU/g。5.根据权利要求4所述的微生物菌剂,其特征在于,制备方法为:将BacillusthermolactisstrainB209、热噬淀粉芽孢杆菌B202、嗜热短芽芽孢杆菌B205、耐硼赖氨酸芽孢杆菌与库德里阿兹威氏毕赤酵母的发酵液按比例混合,添加载体辅料,得到包含BacillusthermolactisstrainB209的液态复合微生物菌...

【专利技术属性】
技术研发人员:李秀芬李月月齐希光王新华任月萍
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:江苏,32

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