冻干态糖化血红蛋白质控品的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种冻干态糖化血红蛋白质控品的制备方法，以正常人红细胞为原料直接制备低水平糖化血红蛋白质控品；再以正常人或糖尿病患者红细胞为原料，通过离子亲和层析法制备高浓度、高纯度的HbA1c，取一定量纯化的HbA1c添加到低水平质控品中，得到高水平糖化血红蛋白质控品；最后将低水平和高水平质控品按比例混合，调配得到中水平糖化血红蛋白质控品，然后分别加入一定量防腐剂和冻干保护剂，通过真空冷冻干燥即得到性质稳定的低、中、高冻干态糖化血红蛋白质控品。本发明专利技术方法简单，三水平梯度明显，涵盖正常值和医学决定水平处；低水平原料方便易获取，高水平原料采用离子交换层析法制得，纯度高；制备的高、中、低三个水平质控品性质稳定。

Preparation of lyophilized glycosylated hemoglobin quality control product

The invention discloses a preparation method of freeze-dried glycosylated hemoglobin quality control product, which uses normal human erythrocyte as raw material to directly prepare low-level glycosylated hemoglobin quality control product, and then uses normal human or diabetic erythrocyte as raw material to prepare high-concentration and high-purity HbA1c by ion affinity chromatography, and adds a certain amount of purified HbA1c to low-level quality control product to obtain high water. At last, the low-level and high-level quality control products are mixed proportionally to obtain the medium-level quality control products of glycated hemoglobin, and then a certain amount of preservatives and freeze-drying protectants are added respectively. Through vacuum freeze-drying, the stable quality control products of low, medium and high-freeze-drying state of glycated hemoglobin are obtained. The method of the invention is simple, the three levels gradient is obvious, and covers the normal value and medical decision level; the low level raw materials are easy to obtain, the high level raw materials are prepared by ion exchange chromatography with high purity; and the high, medium and low level quality control products prepared are stable in nature.

【技术实现步骤摘要】
冻干态糖化血红蛋白质控品的制备方法
本专利技术涉及血红蛋白质控品，尤其是涉及一种冻干态糖化血红蛋白质控品的制备方法。
技术介绍
糖化血红蛋白（GHb）是红细胞中的血红蛋白与葡萄糖通过缓慢、持续及不可逆地非酶促蛋白糖化反应的产物。糖化血红蛋白（GHb）由HbA1a、HbA1b、HbA1c组成，其中HbA1c约占70%，且结构稳定，因此被用作糖尿病控制的监测指标。HbAlc水平能够稳定可靠地反映出患者检测前120天内的平均血糖水平，且受抽血时间，是否空腹，是否使用胰岛素等因素干扰小。目前对第三方糖化血红蛋白质控品（第三方质控品，指既不是仪器厂商的控制品，也不是试剂厂商的控制品，属于独立于任何检测系统产品厂商之外的质控品。该质控品不专为某特定方法或仪器设定或使其最佳化，其性能与试剂或试剂盒批号完全无关，可以对检测系统提供无偏倚的评估）的制备研究主要有国外伯乐、朗道厂家，国内糖化血红蛋白质控品大多需要有配套试剂或配套仪器方可进行糖化血红蛋白项目的质量控制。而糖化血红蛋白质控品常用的制备方法大致可归为以下四种：1、采集混合新鲜健康人全血，灭活，加入叠氮钠防腐，分装，低温-70℃保存。连续5个月本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种冻干态糖化血红蛋白质控品的制备方法，其特征在于：包括低水平冻干态糖化血红蛋白质控品、高水平冻干态糖化血红蛋白质控品和中水平冻干态糖化血红蛋白质控品的制备，其中低水平冻干态糖化血红蛋白质控品的制备方法如下：第一步，取正常人全血5ml，先采用2000‑4000 rpm/min转速在离心机上离心5‑20min，然后弃上清，得下层红细胞；第二步，按体积比1:10加入磷酸盐缓冲液洗涤，并按照与第一步相同的转速离心，反复洗涤2‑5次，弃上清，得下层洗涤后的红细胞；第三步，下层红细胞按体积比10:1~1:10加入磷酸盐缓冲液进行保存，采用D‑10血红蛋白测试系统测定HbA1c结果为5.3%，峰面积为...

【技术特征摘要】
1.一种冻干态糖化血红蛋白质控品的制备方法，其特征在于：包括低水平冻干态糖化血红蛋白质控品、高水平冻干态糖化血红蛋白质控品和中水平冻干态糖化血红蛋白质控品的制备，其中低水平冻干态糖化血红蛋白质控品的制备方法如下：第一步，取正常人全血5ml，先采用2000-4000rpm/min转速在离心机上离心5-20min，然后弃上清，得下层红细胞；第二步，按体积比1:10加入磷酸盐缓冲液洗涤，并按照与第一步相同的转速离心，反复洗涤2-5次，弃上清，得下层洗涤后的红细胞；第三步，下层红细胞按体积比10:1~1:10加入磷酸盐缓冲液进行保存，采用D-10血红蛋白测试系统测定HbA1c结果为5.3%，峰面积为206万µvolt•秒，得到低水平糖化血红蛋白质控品，然后加入1‰庆大霉素和5%海藻糖，分装后采用真空冷冻干燥技术进行冻干，得到低水平冻干态糖化血红蛋白质控品，贮存于2-8℃...

【专利技术属性】
技术研发人员：李兆学，邱孜博，王新明，刘功成，
申请(专利权)人：郑州标源生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41