一种基于肌红蛋白突变体的染料靛蓝的生物制备方法技术

本发明专利技术涉及生物催化领域，特别涉及一种肌红蛋白突变体及其在生物制备靛蓝中的应用。本发明专利技术利用突变体蛋白F43Y Mb做催化剂，催化吲哚与过氧化氢的反应。实验结果表明，F43Y Mb具有单加氧酶活性，能在过氧化氢存在的条件下，不需要其他辅基，在37℃水浴环境下催化吲哚合成靛蓝，产率高达54％。

A biological preparation method of dye indigo based on myoglobin mutant

The invention relates to the field of biocatalysis, in particular to a myoglobin mutant and its application in the biological preparation of indigo. The invention uses the mutant protein F43Y Mb as catalyst to catalyze the reaction between indole and hydrogen peroxide. The results show that F43Y Mb has the activity of monooxygenase and can catalyze the synthesis of indigo from indole in 37 ~C water bath without any other auxiliary groups in the presence of hydrogen peroxide. The yield is up to 54%.

【技术实现步骤摘要】
一种基于肌红蛋白突变体的染料靛蓝的生物制备方法
本专利技术涉及生物催化领域，特别涉及一种肌红蛋白突变体及其在生物制备染料靛蓝中的应用。
技术介绍
靛蓝，又名食品蓝1号、食用青色2号、食用蓝、酸性靛蓝、硬化靛蓝，为水溶性非偶氮类着色剂。化学名称3,3′-二氧-2,2′-联吲哚基-5,5′-二磺酸二钠盐，分子式C16H8N2Na2O8S2，相对分子质量466.36。靛蓝类色素是人类所知最古老的色素之一，广泛用于食品、医药和印染工业。靛蓝作为织物染料的应用至少可追溯到公元前2500年。古埃及木乃伊穿着的一些服装和我国马王堆出土的蓝色麻织物等都是由靛蓝所染成的,我国瑶族的一支因其生产和使用靛蓝染布的技术独特而得名"蓝靛瑶"。在食品工业中,靛蓝以其磺酸钠盐或其铝化的形式等用作食用色素,我国称之为"亮蓝"和亮蓝铝淀，在美国等以其磺酸钠盐形式为主，被称之为"靛蓝素"。靛蓝是一种古老的染料，最初是从植物中提取，后来发展为化学合成制备。植物提取的方法为：将靛叶堆积，经常浇水，使其发酵2～3个月，成为黑色土块状。用臼捣实后称为球靛，含靛蓝色素2％～10％。球靛中拌入木灰、石灰及麸皮，再加水拌和，加热至3本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.肌红蛋白突变体，其特征在于，其具有(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ)或(V)所示的氨基酸序列中任意一个：(Ⅰ)、将肌红蛋白的血红素活性中心第43位的苯丙氨酸用酪氨酸取代后的序列；(Ⅱ)、与如(Ⅰ)所述的氨基酸序列具有至少80％同源性的序列；(Ⅲ)、如(Ⅰ)所述的氨基酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸获得的氨基酸序列；(IV)、由编码如(Ⅰ)所述的氨基酸序列的核苷酸序列或其互补序列或因遗传密码的简并性而与如(Ⅰ)所述的氨基酸序列的核苷酸序列或其互补序列的核苷酸序列不同的序列编码的氨基酸序列；(V)、与(Ⅰ)～(IV)任一项所述序列具有相同功能性片段或功能性变体的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.肌红蛋白突变体，其特征在于，其具有(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ)或(V)所示的氨基酸序列中任意一个：(Ⅰ)、将肌红蛋白的血红素活性中心第43位的苯丙氨酸用酪氨酸取代后的序列；(Ⅱ)、与如(Ⅰ)所述的氨基酸序列具有至少80％同源性的序列；(Ⅲ)、如(Ⅰ)所述的氨基酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸获得的氨基酸序列；(IV)、由编码如(Ⅰ)所述的氨基酸序列的核苷酸序列或其互补序列或因遗传密码的简并性而与如(Ⅰ)所述的氨基酸序列的核苷酸序列或其互补序列的核苷酸序列不同的序列编码的氨基酸序列；(V)、与(Ⅰ)～(IV)任一项所述序列具有相同功能性片段或功能性变体的氨基酸序列。2.如权利要求1所述的肌红蛋白突变体，其特征在于，如(Ⅰ)所述的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示；编码如(Ⅰ...

【专利技术属性】
技术研发人员：林英武，刘海啸，高淑琴，成慧敏，
申请(专利权)人：南华大学，
类型：发明
国别省市：湖南,43