一种从苦荞叶中同时提取多种黄酮类化合物的方法技术

一种从苦荞叶中同时提取多种黄酮类化合物的方法，包括以下步骤：（1）将苦荞叶粉碎，加碱水溶液，提取，过滤，调pH值，超滤；（2）上大孔吸附树脂层析柱，水洗，先后用低度和高度醇溶液洗脱，分别收集洗脱液，浓缩，干燥，得混合物、芦丁粗品；（3）将芦丁粗品用热水溶解，过滤，冷却，结晶，抽滤，滤饼搅拌、分散，抽滤，干燥，得芦丁精品；（4）将混合物用醋酸水溶液加热溶解，冷冻搅拌析晶，过滤，水洗，得山奈酚粗品；母液浓缩，水洗，得槲皮素粗品；（5）分别用醇溶液加热溶解，过滤，冷却，结晶，抽滤，干燥，得槲皮素和山奈酚精品。本发明专利技术方法可同时提取多种高纯度、高收率的黄酮类化合物，操作简单、成本低、适于工业化生产。

A Method for Extracting Flavonoids from Tartary Buckwheat Leaves

A method for extracting flavonoids from tartary buckwheat leaves at the same time includes the following steps: (1) crushing tartary buckwheat leaves, adding alkali aqueous solution, extracting, filtering, adjusting pH value, ultrafiltration; (2) macroporous adsorption resin chromatography column, water washing, successively eluting with low and high alcohol solution, respectively collecting eluent, concentrating, drying, and obtaining mixture and rutin crude products; (3) Will Rutin crude products are dissolved in hot water, filtered, cooled, crystallized, filtered, cake stirred, dispersed, filtered and dried to obtain rutin fine products; (4) the mixture is heated and dissolved with acetic acid aqueous solution, and the mixture is frozen and stirred to crystallize, filtered and washed to obtain kaempferol crude products; mother liquor is concentrated, washed and quercetin crude products are obtained; (5) the crude products are heated and dissolved with alcohol solution, filtered, cooled and crystallized. It can be filtered and dried to obtain high quality quercetin and kaempferol. The method of the invention can simultaneously extract a variety of flavonoids with high purity and yield, and has simple operation, low cost and is suitable for industrial production.

【技术实现步骤摘要】
一种从苦荞叶中同时提取多种黄酮类化合物的方法
本专利技术涉及一种同时提取多种黄酮类化合物的方法，具体涉及一种从苦荞叶中同时提取多种黄酮类化合物的方法。
技术介绍
苦荞即苦荞麦，学名鞑靼荞麦，别名荞叶七、野兰荞、万年荞、菠麦、乌麦、花荞，是一种“药食同源”天然植物。苦荞被誉为“五谷之王”，三降食品（降血压，降血糖，降血脂）；苦荞还有通便排毒的功效，民间又称其为“净肠草”。苦荞拥有独特、全面、丰富的营养成分，而且药用特性好，有人体所必须的多种营养成份。苦荞叶中含有丰富的黄酮类化合物，芦丁、槲皮素和山奈酚是其中三种最主要的成分。芦丁有维生素P样作用和抗炎作用，具有维持血管抵抗力、降低其通透性、减少脆性等作用，可用于防治脑溢血、高血压、视网膜出血、紫癜和急性出血性肾炎等疾病，另外，还可用作食用抗氧化剂和营养增强剂等；槲皮素具有较好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用，用于治疗慢性支气管炎，此外，还有降低血压、增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉、增加冠脉血流量等作用，对冠心病及高血压患者有辅助治疗作用；山奈酚具有防癌、抗癌、抗炎、抗氧化、抗菌、抗病毒等多种功效。CN106220697A公开了一种苦荞芦丁提取方法，是以苦荞籽为原料，通过清水浸泡、烘干、碱性溶液超声加热提取、调酸等步骤，得芦丁粉。但是，该方法仅得到了一种黄酮类化合物，产品芦丁粉的含量不明，且用碱性溶液浸提后的荞麦籽难以食用或加工，无疑是对资源极大的浪费。CN1385428A公开了一种苦荞生物黄酮提取工艺，是以苦荞粉或苦荞叶为原料，用乙醇作溶剂，通过连续逆流提取、过滤、减压浓缩、真空干燥等步骤得苦荞黄酮。但是，该方法没有分离提纯工艺，所得产品为黄酮混合物。CN104069187A公开了一种从苦荞麦中提取纯化苦荞黄酮的工艺方法，是以苦荞麦为原料，通过乙醇回流提取、离心、回收乙醇、加水沉淀、沉淀分离等步骤，得总含量为86.5%的苦荞黄酮。但是，该方法同样没有分离提纯工艺，所得产品为黄酮混合物。CN1258999C公开了一种用苦荞麦做原料提取黄酮的制备工艺，是以苦荞麦为原料，通过挤压去皮、微波处理苦荞麦皮层粉、加入乙醇微波提取、减压浓缩、加酸沉淀、真空干燥等步骤，得芦丁成品。但是，该方法所得成品中芦丁的含量较低，仅30%。CN106432387A公开了一种苦荞籽中芦丁和多糖的联合提取方法，是以新收获的饱满苦荞籽粒为原料，通过蒸馏水浸提、冷冻、离心、干燥、醇沉等步骤，获得芦丁和多糖。但是，该方法缺少分离纯化步骤，所得芦丁产品纯度不到60%。CN103833808B公开了一种苦荞芦丁的提取分离方法，是以苦荞或苦荞加工副产物麸皮为原料，通过粉碎、有机溶剂渗滤、吸附柱层析、浓缩、结晶等步骤，得苦荞芦丁。但是，该方法的原料昂贵，且仅获得了一种活性成分——芦丁，原料成本过高，且芦丁的含量偏低，不适合工业化生产。CN102731593A公开了一种从苦荞麦中提取芦丁的方法，是以苦荞麦为原料，通过粉碎、乙醇回流提取、浓缩、过滤、乙醇洗涤、水溶解、结晶、过滤等步骤，得芦丁精制品。但同样，该方法的原料昂贵，仅获得了一种产品，未将资源综合利用，不适合工业化生产。CN103340938A公开了一种苦荞标准提取物FT83及高纯度槲皮素的制备方法，是以苦荞麸皮为原料，通过低级醇浸泡或超声提取、减压浓缩、喷雾干燥、柱层析纯化等步骤，得高含量的槲皮素。但是，该方法生产周期长、设备投入大，且仅得到了苦荞中的一种活性成分——槲皮素，还使用了有毒有害的化工溶剂，不适合工业化生产。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种可同时提取多种高纯度、高收率的黄酮类化合物，且操作简单、成本低廉、环境友好、适宜于工业化生产的从苦荞叶中同时提取多种黄酮类化合物的方法。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种从苦荞叶中同时提取多种黄酮类化合物的方法，包括以下步骤：（1）将干燥的苦荞叶粉碎，加入碱水溶液，室温下搅拌提取，过滤，滤液用酸溶液调节pH值至中性或弱酸性，然后用超滤膜超滤，得超滤膜滤液；（2）将步骤（1）所得超滤膜滤液上大孔吸附树脂层析柱，然后，先水洗层析柱至流出液清亮、透明，再先后用低度醇溶液和高度醇溶液对大孔吸附树脂层析柱进行洗脱，分别收集低度醇溶液洗脱液和高度醇溶液洗脱液，浓缩，干燥，分别得槲皮素和山奈酚的混合物、芦丁粗品；（3）将步骤（2）所得芦丁粗品用热水溶解，趁热过滤，自然冷却至室温，静置结晶，抽滤，滤饼用醇溶液在室温下搅拌、分散，抽滤，干燥，得芦丁精品；（4）将步骤（2）所得槲皮素和山奈酚的混合物用醋酸水溶液加热溶解，降温，冷冻搅拌析晶，过滤，水洗，得山奈酚粗品；将过滤所得母液浓缩至无醋酸，水洗，得槲皮素粗品；（5）将步骤（4）所得山奈酚粗品以及槲皮素粗品分别用醇溶液加热溶解，趁热过滤，自然冷却至室温，静置结晶，抽滤，干燥，分别得槲皮素精品和山奈酚精品。优选地，步骤（1）中，所述干燥的苦荞叶中，芦丁的质量含量为5～8%，槲皮素的质量含量为2～4%，山奈酚的质量含量为3～6%。所述干燥的苦荞叶中含水率≤5%。优选地，步骤（1）中，所述粉碎至粒径为1～2mm。若粉碎的粒径过大，则原料中的黄酮类成分难以浸出，将造成收率偏低；若粉碎的粒径过小，将加大过滤的难度。优选地，步骤（1）中，所述碱水溶液与干燥的苦荞叶的质量比为15～20:1。优选地，步骤（1）中，所述碱水溶液的质量浓度为0.1～2.0%。优选地，步骤（1）中，所述碱水溶液为氢氧化钙、氢氧化钠或氢氧化钾的水溶液。优选地，步骤（1）中，所述搅拌提取的时间为3～6h。若碱水溶液的用量过少、质量浓度过低或搅拌提取的时间过短，都将导致黄酮类化合物提取不完全，收率偏低；若碱水溶液的用量过多、质量浓度过高或搅拌提取的时间过长，都有可能破换黄酮类化合物的分子结构，并造成物料和能源的浪费。优选地，步骤（1）中，所述酸溶液的质量浓度为5～10%。优选地，步骤（1）中，所述酸溶液为盐酸溶液和/或硫酸溶液。优选地，步骤（1）中，调节pH值至6.0～7.0。用酸溶液调节pH值至中性或弱酸性的目的：一是，黄酮类化合物易与碱反应形成盐，呈离子状态，导致难以被大孔树脂吸附，只有加酸可使之转变为分子状态，才可以被树脂吸附；二是，大孔树脂在碱性的液体环境中，对黄酮类化合物的吸附能力减弱，难以发挥其最大的吸附分离效果。优选地，步骤（1）中，所述超滤膜的截留分子量为1000～2000Da，超滤的压力为0.1～0.3MPa。超滤的目的是去除物料中的蛋白质、鞣质等大分子杂质以及调酸时析出的少量固形物。优选地，步骤（2）中，上柱的流速为0.5～1.0BV/h。优选地，步骤（2）中，所述大孔吸附树脂与干燥的苦荞叶的体积质量比（L/kg）为0.2～0.5:1。优选地，步骤（2）中，所述大孔吸附树脂层析柱的高径比为2～8:1（更优选4～7:1）。优选地，步骤（2）中，所述大孔吸附树脂的型号为LSA-10型、LSA-12型、LX-38型或LX-162型等中的一种或几种。若上柱的流速过快、大孔吸附树脂的用量过少或层析柱的高径比过小，都将造成黄酮类化合物难以全部被大孔树脂吸附而部分流失，导致收率偏低；若上柱的流速过慢、大孔吸本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从苦荞叶中同时提取多种黄酮类化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将干燥的苦荞叶粉碎，加入碱水溶液，室温下搅拌提取，过滤，滤液用酸溶液调节pH值至中性或弱酸性，然后用超滤膜超滤，得超滤膜滤液；（2）将步骤（1）所得超滤膜滤液上大孔吸附树脂层析柱，然后，先水洗层析柱至流出液清亮、透明，再先后用低度醇溶液和高度醇溶液对大孔吸附树脂层析柱进行洗脱，分别收集低度醇溶液洗脱液和高度醇溶液洗脱液，浓缩，干燥，分别得槲皮素和山奈酚的混合物、芦丁粗品；（3）将步骤（2）所得芦丁粗品用热水溶解，趁热过滤，自然冷却至室温，静置结晶，抽滤，滤饼用醇溶液在室温下搅拌、分散，抽滤，干燥，得芦丁精品；（4）将步骤（2）所得槲皮素和山奈酚的混合物用醋酸水溶液加热溶解，降温，冷冻搅拌析晶，过滤，水洗，得山奈酚粗品；将过滤所得母液浓缩至无醋酸，水洗，得槲皮素粗品；（5）将步骤（4）所得山奈酚粗品以及槲皮素粗品分别用醇溶液加热溶解，趁热过滤，自然冷却至室温，静置结晶，抽滤，干燥，分别得槲皮素精品和山奈酚精品。

【技术特征摘要】
1.一种从苦荞叶中同时提取多种黄酮类化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将干燥的苦荞叶粉碎，加入碱水溶液，室温下搅拌提取，过滤，滤液用酸溶液调节pH值至中性或弱酸性，然后用超滤膜超滤，得超滤膜滤液；（2）将步骤（1）所得超滤膜滤液上大孔吸附树脂层析柱，然后，先水洗层析柱至流出液清亮、透明，再先后用低度醇溶液和高度醇溶液对大孔吸附树脂层析柱进行洗脱，分别收集低度醇溶液洗脱液和高度醇溶液洗脱液，浓缩，干燥，分别得槲皮素和山奈酚的混合物、芦丁粗品；（3）将步骤（2）所得芦丁粗品用热水溶解，趁热过滤，自然冷却至室温，静置结晶，抽滤，滤饼用醇溶液在室温下搅拌、分散，抽滤，干燥，得芦丁精品；（4）将步骤（2）所得槲皮素和山奈酚的混合物用醋酸水溶液加热溶解，降温，冷冻搅拌析晶，过滤，水洗，得山奈酚粗品；将过滤所得母液浓缩至无醋酸，水洗，得槲皮素粗品；（5）将步骤（4）所得山奈酚粗品以及槲皮素粗品分别用醇溶液加热溶解，趁热过滤，自然冷却至室温，静置结晶，抽滤，干燥，分别得槲皮素精品和山奈酚精品。2.根据权利要求1所述从苦荞叶中同时提取多种黄酮类化合物的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述干燥的苦荞叶中，芦丁的质量含量为5～8%，槲皮素的质量含量为2～4%，山奈酚的质量含量为3～6%；所述粉碎至粒径为1～2mm。3.根据权利要求1或2所述从苦荞叶中同时提取多种黄酮类化合物的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述碱水溶液与干燥的苦荞叶的质量比为15～20:1；所述碱水溶液的质量浓度为0.1～2.0%；所述碱水溶液为氢氧化钙、氢氧化钠或氢氧化钾的水溶液；所述搅拌提取的时间为3～6h。4.根据权利要求1～3之一所述从苦荞叶中同时提取多种黄酮类化合物的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述酸溶液的质量浓度为5～10%；所述酸溶液为盐酸溶液和/或硫酸溶液；调节pH值至6.0～7.0；所述超滤膜的截留分子量为1000～2000Da，超滤的压力为0.1～0.3MPa。5.根据权利要求1～4之一所述从苦荞叶中同时提取多种黄酮类化合物的方法，其特征在于：步骤（2）中，上柱的流速...

【专利技术属性】
技术研发人员：龙伟岸，黄华学，
申请(专利权)人：湖南华诚生物资源股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南,43