一种槐角制剂的特征图谱检测方法技术

本发明专利技术提供了一种槐角制剂的检测方法，包括如下操作步骤：1)对照品溶液的制备：2)供试品溶液的制备：3)检测。本发明专利技术能用于质量鉴别的种类更广，适用于槐角不同制剂类的中药检测，为槐角制剂的质量判定提供了新方法。

【技术实现步骤摘要】
一种槐角制剂的特征图谱检测方法
本专利技术具体涉及一种槐角制剂的特征图谱检测方法。
技术介绍
槐(国槐)，落叶乔木，高15‐25米，胸径可达1米。树冠圆球形或阔卵形，树皮粗糙，有不规则的纵裂，暗灰色，内皮鲜黄色，有嗅味。奇数羽状复叶互生，叶柄基部膨大，叶轴有毛，小叶片7‐17，小叶柄有毛；托叶镰刀状，小叶片卵状披针形或卵状长圆形，先端具细突尖，全缘，基部圆形或宽楔形，上面深绿色，平滑，下面白绿色，伏生白毛，主脉显著，侧脉不明显。顶生大型圆锥花序，花梗及小花梗均有毛；萼钟形；花冠蝶形，黄白色；雄蕊10，离生或基部稍连合，花丝不等长；子房上位，筒状，有细长毛，花柱弯曲。荚果圆柱形，无毛，绿色，肉质不开裂，下垂，果先端有细尖喙状物，种子间明显缢缩呈念珠状，有1‐6个种子。种子棕黑色，肾形。多生于温带，土层深厚、湿润、肥沃、排水良好，一般为中性及微酸性的砂质壤土中，常栽于街道两旁及庭院。在我国分布较广，南北各地普遍栽培，尤以黄土高原及华北平原最为常见。中药槐角系豆科植物槐(SophorajaponicaL.)的干燥成熟果实，系我国重要的传中药之一，始载于《神农本草经》，列为上品。性寒、味苦、归肝、大肠经。传统医学认为槐角具有清热泻火、凉血止血的功效，用于肠热便血、痣肿出血，肝热头疼、眩晕目赤，为《中华人民共和国药典》历版收载品种。近年来国内外医药工作者对其进行多方面的研究。槐角现代炮制方法多样，制剂种类多，但《中国药典》2015年版一部项下槐角质量标准中的鉴别方法只以槐角苷为对照品，通过高液相色谱法鉴别，方法单一，准确度不高，也不能用于槐角制剂类中药检测。专利技术内容为解决上述问题，本专利技术提供了一种新的槐角制剂的检测方法。本专利技术槐角制剂的检测方法，它包括如下操作步骤：1)对照品溶液的制备：取芦丁、槐角苷、染料木素对照品，加甲醇溶解，作为对照品溶液；2)供试品溶液的制备：槐角饮片、槐角配方颗粒供试品：取供试品，乙醇提取，过滤，吸取滤液用甲醇稀释，作为供试品溶液；槐角标准汤液供试品：取槐角饮片加水浸泡，煎煮，滤过，得水煎液，用水定容，作为供试品溶液；3)检测：分别吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪进行检测；色谱条件如下：检测波长：260nm；色谱柱：C18色谱柱；流动相:流动相A为乙腈，流动相B为0.1％磷酸溶液，梯度洗脱，梯度洗脱的程序为：0～20min，87％～76％A；20～30min，76％～50％A；30～50min，50％～50％A。步骤1)所述芦丁、槐角苷、染料木素对照品加甲醇配置的对照品溶液浓度为50μg/ml。步骤2)中所述乙醇为70％的乙醇，所述提取为超声提取；步骤2)所述槐角配方颗粒待测样品与乙醇的质量体积比为1g:125mL，所述槐角饮片待测样品与乙醇的质量体积比为1g:12.5mL，所述槐角配方颗粒、槐角饮片供试品滤液与甲醇稀释比例为1:5；步骤2)中制备槐角标准汤液供试品时，加水煎煮2次，第一次加的水为槐角标准汤液供试品的12倍ml/g，加的水为槐角标准汤液供试品的12倍ml/g。步骤3)所述C18色谱柱为Agilent5TC‐C18(2)250*4.6mm。步骤3)所述的色谱条件的柱温为25℃。步骤3)所述的色谱条件的流速为1.00ml·min‐1。步骤3)所述的色谱条件的进样量为10μL；步骤3)所述的色谱条件的理论板数按槐角苷峰计算应不低于3000。步骤3)检测得到的图谱，以与槐角苷对照品峰相应的峰为S峰，在如下5个保留时间具有峰：0.695、0.759、0.976、1.000、1.347。所述方法是检测槐角制剂的芦丁、槐角苷、染料木素含量的方法。本专利技术的一种槐角制剂的特征图谱检测方法，适用于槐角配方颗粒、槐角药材，槐角饮片，槐角标准汤液的正伪品鉴别，结果可靠，且能够检测的槐角制剂种类多，还可以检测槐角制剂中芦丁、槐角苷、染料木素的含量，具有良好的应用前景。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图110批槐角配方颗粒特征图谱图2槐角配方颗粒对照图谱，峰2：芦丁，峰4(S)：槐角苷，峰5：染料木素图3槐角配方颗粒3D色谱图图4槐角配方颗粒柱温考察色谱图图5槐角配方颗粒流动相考察色谱图图6槐角配方颗粒色谱峰指认图图7槐角配方颗粒色谱柱耐用性考察色谱图柱1.DiamonilC18(2)5μ250*4.6mm，柱2.KromasilC185μ250*4.6mm，柱3.Agilent5TC‐C18(2)250*4.6mm图8饮片1特征图谱峰2.芦丁，峰4(S).槐角苷，峰5.染料木素图9饮片2特征图谱峰2.芦丁，峰4(S).槐角苷，峰5.染料木素图10标准煎1特征图谱峰2.芦丁，峰4(S).槐角苷，峰5.染料木素图11标准煎2特征图谱峰2.芦丁，峰4(S).槐角苷，峰5.染料木素图12标准煎3特征图谱峰2.芦丁，峰4(S).槐角苷，峰5.染料木素图13标准煎3特征图谱峰2.芦丁，峰4(S).槐角苷，峰5.染料木素具体实施方式实施例1槐角配方颗粒特征图谱1)、对照品溶液的制备：分别取芦丁、槐角苷、染料木素对照品，加甲醇制成各含50μg/ml的溶液,作为对照品溶液；2)、供试品溶液的制备：分别取10个批次槐角配方颗粒，研细，各取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇25ml，称定重量，超声处理(功率300W，频率25kHz)45分钟，取出，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。3)、特征图谱的测定分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；色谱条件如下：检测波长：260nm；色谱柱：C18色谱柱；流动相:乙腈(A)和0.1％磷酸溶液(B)，梯度洗脱(0～20min，87％～76％A；20～30min，76％～50％A；30～50min，50％～50％A)；采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)对10批样品进行合成，建立了槐角配方颗粒特征图谱的对照图谱，见图1，图2。槐角配方颗粒特征图谱中呈现5个特征峰，其中3个峰应分别与相应的对照品峰保留时间相同，与槐角苷对照品峰相应的峰为S峰，计算特征峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±5％之内。规定值为：0.695(峰1)、0.759(峰2)、0.976(峰3)、1.000(峰S)、1.347(峰5)。见表1：表110批槐角配方颗粒相对保留时间以下通过试验例具体说明本专利技术的有益效果：试验例1液相特征图谱法1、材料、试剂与仪器1.1实验仪器安捷伦1200型高效液相色谱仪(G1312B型二元泵，G1315C型DAD检测器)；电子天平：BP‐211D(Sautoris，德国)d＝0.1mg/0.01mg,max＝210g/80g；KQ5200DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种槐角制剂的检测方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：1)对照品溶液的制备：取芦丁、槐角苷、染料木素对照品，加甲醇溶解，作为对照品溶液；2)供试品溶液的制备：槐角饮片、槐角配方颗粒供试品：取供试品，乙醇提取，过滤，吸取滤液用甲醇稀释，作为供试品溶液；槐角标准汤液供试品：取槐角饮片加水浸泡，煎煮，滤过，得水煎液，用水定容，作为供试品溶液；3)检测：分别吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪进行检测；色谱条件如下：检测波长：260nm；色谱柱：C18色谱柱；流动相:流动相A为乙腈，流动相B为0.1％磷酸溶液，梯度洗脱，梯度洗脱的程序为：0～20min，87％～76％A；20～30min，76％～50％A；30～50min，50％～50％A。

【技术特征摘要】
1.一种槐角制剂的检测方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：1)对照品溶液的制备：取芦丁、槐角苷、染料木素对照品，加甲醇溶解，作为对照品溶液；2)供试品溶液的制备：槐角饮片、槐角配方颗粒供试品：取供试品，乙醇提取，过滤，吸取滤液用甲醇稀释，作为供试品溶液；槐角标准汤液供试品：取槐角饮片加水浸泡，煎煮，滤过，得水煎液，用水定容，作为供试品溶液；3)检测：分别吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪进行检测；色谱条件如下：检测波长：260nm；色谱柱：C18色谱柱；流动相:流动相A为乙腈，流动相B为0.1％磷酸溶液，梯度洗脱，梯度洗脱的程序为：0～20min，87％～76％A；20～30min，76％～50％A；30～50min，50％～50％A。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤1)所述芦丁、槐角苷、染料木素对照品加甲醇配置的对照品溶液浓度为50μg/ml。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2)中所述乙醇为70％的乙醇，所述提取为超声提取；步骤2)所述槐角配方颗粒待测样品与乙醇的质量体积比为1g:125mL，所述槐角饮片待测样品与乙醇的质量体积比为1g:12.5mL，...

【专利技术属性】
技术研发人员：周厚成，胡昌江，钟磊，冯健，李文兵，
申请(专利权)人：四川新绿色药业科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51