雪胆甲素在开发治疗莱姆关节炎药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了雪胆甲素在开发治疗莱姆关节炎药物中的应用，且雪胆甲素通过调控rBmpA相关的Toll样受体炎症信号传导通路，从而抑制rBmpA干预后相关TLRs的信号传递，减少促炎因子的产生，从而发挥抗炎作用。本发明专利技术提供了雪胆甲素在开发治疗莱姆关节炎药物中的应用，特别是对抗生素治疗不敏感的莱姆关节炎的防治提供新的思路和途径，为莱姆关节炎的防治提供理论依据和实用方法，从而进一步达到雪胆甲素在临床中应用的目的。

【技术实现步骤摘要】
雪胆甲素在开发治疗莱姆关节炎药物中的应用
本专利技术涉及药物开发
，特别是涉及雪胆甲素在开发治疗莱姆关节炎药物中的应用。
技术介绍
雪胆甲素(CuIIa)是从雪胆块茎中提取分离得到的天然产物，云南民间以大籽雪胆块根入药，治疗痢疾、肠炎等疾病，具有清热解毒，抗菌消炎的功效。在现有技术中，CuIIa常用于治疗菌痢，肠炎，支气管炎，急性扁桃体炎等，在临床上与穿龙薯蓣、槐米等合用，对治疗冠心病具有较好的疗效。莱姆病(Lymedisease，LD)是一种由蜱虫传播的伯氏疏螺旋体(Borreliaburgdorferi,B.b)感染所致的人兽共患传染病，该病能引起多个器官和多个系统的炎性反应，该病在我国分布广、传播快、致残率高，引起医学界高度重视；中期和晚期莱姆病主要表现为慢性关节炎(莱姆关节炎)，对神经系统和心脏损害也较大，其中莱姆关节炎发生率最高(60％的感染者有关节炎症状)，危害也最大。申请人研究发现了莱姆螺旋体的膜蛋白BmpA是引发莱姆关节炎的毒力因子之一，体外实验发现BmpA刺激多种免疫细胞产生趋化因子，体内实验注射了BmpA可明显引发关节炎，其中国外研究人员研究发现BmpA可以启动激活关节滑膜细胞的炎症反应，通过激活NF-κB和p38MAP激酶信号通路引起肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α，TNF-α)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)促炎因子的释放，从而启动炎症反应。莱姆关节炎的发生与螺旋体毒力因子BmpA引发炎性趋化因子风暴，Toll样受体作为连接固有免疫和适应性免疫的桥梁，与相应配体结合后，可通过一系列信号转导环节引发下游促炎信号级联反应，最终活化NF-κB，诱发致炎趋化因子风暴，启动固有免疫应答和炎症反应。Toll样受体(Toll-likereceptors/IL-1receptor)和白介素1受体(TLR/IL-1R)参与莱姆关节炎的发病机制，诱导致炎细胞因子产生是莱姆病组织炎症的重要原因；在负调控方面，Gas6/ProS-TAM系统可以通过抑制TLR信号，避免了炎症反应强烈而对机体造成损伤。因此，本专利技术提供了雪胆甲素在开发治疗莱姆关节炎药物中的应用，为莱姆关节炎的防治提供理论依据和实用方法，从而为实现雪胆甲素在临床中应用奠定基础，是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了雪胆甲素在开发治疗莱姆关节炎药物中的应用，特别是对抗生素治疗不敏感的莱姆关节炎的防治提供新的思路和途径，为莱姆关节炎的防治提供理论依据和实用方法，从而进一步达到雪胆甲素在临床中应用的目的。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：雪胆甲素在开发治疗莱姆关节炎药物中的应用。优选的，雪胆甲素在开发治疗对抗生素治疗不敏感的莱姆关节炎药物中的应用。本专利技术公开了雪胆甲素可以在开发治疗莱姆关节炎药物中应用，尤其是对抗生素治疗不敏感的莱姆关节炎，为治疗莱姆关节炎药物的开发提供理论依据，为治疗莱姆关节炎提供一种新的思路和途径。进一步的，所述雪胆甲素通过调控rBmpA相关的Toll样受体炎症信号传导通路，从而抑制rBmpA干预后相关TLRs的信号传递，减少促炎因子的产生，从而发挥抗炎作用。本专利技术公开了雪胆甲素可以发挥抑制莱姆关节炎炎症的信号通路，不仅可以为开发治疗莱姆关节炎药物提供作用靶点，而且为进一步深入地研究和探索莱姆关节炎与其他疾病的发生和发展关系，为系统地、整体地、协调地开发治疗莱姆关节炎药物提供有效的理论依据。经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术提供了雪胆甲素在开发治疗莱姆关节炎药物中的应用，具有如下技术优点：本专利技术提供了雪胆甲素在开发治疗莱姆关节炎药物中的应用，特别是对抗生素治疗不敏感的莱姆关节炎的防治提供新的思路和途径，为莱姆关节炎的防治提供理论依据和实用方法，从而进一步达到雪胆甲素在临床中应用的目的。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。图1附图为本专利技术提供的WesternBlotting检测rBmpA刺激后不同时间点THP-1细胞中TLR1、TLR2、TLR5和TLR6蛋白质表达水平；其中，“-”表示未加rBmpA刺激的正常对照Cont组；“+”表示加入rBmpA刺激的rBmpA组；图2附图为本专利技术提供的QRT-PCR检测rBmpA刺激后不同时间点THP-1细胞中TLR1、TLR2、TLR5和TLR6mRNA表达水平；其中，“Foldchange(拷贝数)”以5h正常对照Cont组的表达量为“1”；*代表P<0.05，***代表P<0.0001；图3附图为本专利技术提供的不同刺激物作用对THP-1巨噬细胞分泌抑制因子SIGIRR的影响；其中，**P<0.01；*P<0.05；图4附图为本专利技术提供的Westernblot检测不同刺激下巨噬细胞SIGIRR蛋白表达量的影响；图5附图为本专利技术提供的不同刺激下巨噬细胞SIGIRR蛋白表达量的影响；其中，**P<0.01；*P<0.05；图6附图为本专利技术提供的QRT-PCR检测不同刺激下对负调控因子Pros的作用；其中，**P<0.01；*P<0.05；图7附图为本专利技术提供的QRT-PCR检测不同刺激下对负调控因子Gas6的作用；其中，**P<0.01；*P<0.05。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1巨噬细胞的生成本专利以THP-1细胞株作为实验对象，其中THP-1细胞株由昆明动物研究所馈赠。将传代2-3次的THP-1细胞取出，充分混匀后转移至新的50ml离心管，250×g离心5min后弃上清。后加入3ml完全培养基(10％FBS-RPMI1640培养液)，轻柔吹打混匀。其中完全培养基为90mlRPMI1640培养基(11875500；ThermoFisherScientific(Gibico)公司)；与10ml胎牛血清(SV30087.02-500mL；ThermoFisherScientific(Gibico)公司)组成。吸取10μLTHP-1细胞液再加入10μL台盼蓝染液。充分混匀计数，计数3次，得出细胞活率和活细胞数(cells/ml)的平均值。当细胞活率大于90％时，证明细胞状态良好适宜后续实验。经本实验室前期工作发现，THP-1细胞最适铺板浓度为6×105cells/ml，PMA(佛波酯德国Sigma公司)的铺板浓度为600ng/mL。细胞悬液用含10％FBS-RPMI1640培养液稀释与含10％FBS-RPMI1640培养液的PMA均匀混合，进行铺板。由于本实验使用6孔板本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.雪胆甲素在开发治疗莱姆关节炎药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.雪胆甲素在开发治疗莱姆关节炎药物中的应用。2.根据权利要求1所述的雪胆甲素在开发治疗莱姆关节炎药物中的应用，其特征在于，所述雪胆甲素通...

【专利技术属性】
技术研发人员：宝福凯，柳爱华，白若兰，戴熙廷，简苗苗，计震华，丁喆，毕云凤，王峰，
申请(专利权)人：昆明医科大学，
类型：发明
国别省市：云南,53