雷替曲塞有关物质F及其制备和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种具有二氢叶酸还原酶和蛋氨酸合成酶抑制活性的雷替曲塞的有关物质F，其制备方法及其作为杂质对照品的用途。

Retitroxel-related substance F and its preparation and Application

The invention discloses a related substance F of ratitrixel with inhibiting activity of dihydrofolate reductase and methionine synthase, a preparation method thereof and its use as an impurity reference substance.

【技术实现步骤摘要】
雷替曲塞有关物质F及其制备和应用
本专利技术属于药物化学领域，特别的涉及一种雷替曲塞新杂质的制备及其应用。
技术介绍
雷替曲塞(Raltitrexed)是由英国Zeneca公司研制的新一代水溶性喹唑啉叶酸类似物胸苷酸合酶抑制剂，适用于晚期结直肠癌，其通过对胸苷酸合酶的专一抑制而产生抗肿瘤作用。其化学名为N-[[5-[[(1,4-二氢-2-甲基-4-氧-6-喹唑啉基)甲基]甲氨基]-2-噻吩基]羰基]-L-谷氨酸。结构式如下：其主要由喹唑啉酮、噻吩和L-谷氨酸三部分组成，文献(QuinazolineAntifolateThymidylateSynthaseInhibitors：HeterocyclicBenzoylRingModifications，J.Med.Chem.1991，34，1594-1605)和美国专利(US4992550，1991)中给出了雷替曲塞的合成中主要的两种方法，一种方法是以2-噻吩甲酸为起始原料，合成路线如下所示：另一种方法是以5-硝基-2-噻吩甲酸为起始原料，合成路线如下所示：不管是以上述哪种方法，其在反应过程中均需要与关键中间体6-溴甲基-3,4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮对接，在其对接过程中会形成一个全新的杂质，目前并没有相关文献对进行报道，那么确认该杂质的结构，合理控制其在成品中的含量，对于提升雷替曲塞的药品质量显得尤为重要。根据文献(1)周受辛等，具噻吩环8-去氮杂叶酸类似物的合成及生物活性研究，有机化学，2012,32,1944～1950；文献(2)闫汝锋等，N8-去氮-N5-取代四氢叶酸类似物的设计合成及生物活性研究，有机化学，2010年第30卷，第11期；文献(3)雍建平等，新型含异噁唑环的喹唑啉衍生物的合成和抑蛋白酪氨酸酶α和ε活性研究，有机化学，2008年第28卷，第7期，等相关文献的记载目前对叶酸(THF)类化合物结构的改造主要包括蝶啶环部分、桥连接部分、苯环部分和谷氨酸部分，且与杂质F结构类似的化合物均具有一定的二氢叶酸还原酶的抑制活性，故在此基础上我们对有关物质F也进行了相关的活性研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种全新的雷替曲塞有关物质F，其制备方法以及相关应用。雷替曲塞有关物质F，其结构如下：本专利技术还提供有关物质F的制备方法，其包括如下步骤：具体而言包括如下步骤：(1)N-(5-甲氨基-2-噻吩甲酰)-L-谷氨酸二乙酯在极性非质子溶液中，在无机碱催化下，与6-溴甲基-3，4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮缩合，得中间体Ⅱ；其中所述极性非质子溶液为二甲亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、丙酮、N,N-二甲基乙酰胺等，其中优选N,N-二甲基甲酰胺；其中所述无机碱选自碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾等，其优选为碳酸铯；(2)中间体Ⅱ在碱性溶液中水解得到有关物质F；其所述碱选溶液自碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾等，其优选为氢氧化钠。优选的包括以下步骤：(1)6-溴甲基-3，4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮溶于极性非质子溶液，搅拌加热，加入无机碱，再滴加N-(5-甲氨基-2-噻吩甲酰)-L-谷氨酸二乙酯的极性非质子溶液，粗品经柱层析纯化得中间体Ⅱ；其中所述极性非质子溶液为二甲亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、丙酮、N,N-二甲基乙酰胺等，优选N,N-二甲基甲酰胺；其中所述无机碱选自碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾等，优选为碳酸铯；(2)将无机碱的水溶液，降温至0～10℃，缓慢加入中间体Ⅱ，滴加稀盐酸溶液，调节pH，低温析出晶体，过滤，滤饼真空干燥得有关物质F；其中所述无机碱选自碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾等，优选氢氧化钠。优选的包括以下步骤：(1)6-溴甲基-3，4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮溶于极性非质子溶液，搅拌加热至40-120℃，加入无机碱，再滴加N-(5-甲氨基-2-噻吩甲酰)-L-谷氨酸二乙酯的极性非质子溶液，粗品经柱层析纯化得中间体Ⅱ；其中所述极性非质子溶液为二甲亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、丙酮、N,N-二甲基乙酰胺等，优选N,N-二甲基甲酰胺；其中所述无机碱选自碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾等，优选碳酸铯；(2)将无机碱的水溶液，降温至0～10℃，缓慢加入中间体Ⅱ，滴加0～10mmol/L盐酸溶液，调节pH至3～4，低温析出晶体，过滤，滤饼真空干燥得有关物质F；其所述无机碱选自碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾等，优选氢氧化钠。优选的包括以下步骤：(1)6-溴甲基-3，4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮溶于N,N-二甲基甲酰胺，搅拌加热至85±5℃，加入碳酸铯，再滴加N-(5-甲氨基-2-噻吩甲酰)-L-谷氨酸二乙酯的N,N-二甲基甲酰胺溶液，粗品经柱层析纯化得中间体Ⅱ；(2)将氢氧化钠的水溶液，降温至0～10℃，缓慢加入中间体Ⅱ，滴加2mmol/L盐酸溶液，调节pH至3.5～3.7，低温析出晶体，过滤，滤饼真空干燥得有关物质F。本专利技术还意外的发现有关物质F具有一定的二氢叶酸还原酶的抑制活性。与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：1)公开了一种雷替曲塞的有关物质F，并对其活性进行了研究，其具有一定的二氢叶酸还原酶的抑制活性；2)公开了上述杂质的制备方法，本方法无高温、加压反应，通过本法可以得到质量稳定，收率较高的有关物质F，为雷替曲塞的质量标准的建立及临床用药安全性提供保障。附图说明图1雷替曲塞有关物质F的ESI-谱图；图2雷替曲塞有关物质F的ESI+谱图；图3雷替曲塞有关物质F的1H-NMR谱图；图4雷替曲塞有关物质F的13C-NMR图；图5雷替曲塞有关物质F的HPLC图谱。具体实施方式下面通过实施例对本专利技术作进一步说明。应该理解的是，本专利技术实施例仅是用于说明本专利技术，而不是对本专利技术的限制，在本专利技术的构思前提下对本专利技术的简单改进都属于本专利技术要求保护的范围。实施例1：N-(5-甲氨基-2-噻吩甲酰)-L-谷氨酸二乙酯的制备将5-硝基-2-噻吩甲酸10g和氯化亚砜20ml加入反应瓶中，升温回流反应3小时，将反应液转移至单口烧瓶中，浓缩至无液体流出，用30ml二氯甲烷溶解备用。将13.8gL-谷氨酸二乙酯，20.6g三乙胺，50ml二氯甲烷加入到150ml三口瓶中，搅拌降温至0～5℃，缓慢滴加浓缩物的二氯甲烷溶液。滴毕后保温反应1小时。反应结束后，依次用2mol/L盐酸100ml和饱和碳酸氢钠溶液100ml洗涤。分离有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩结束后得N-(5-硝基-2-噻吩甲酰)-L-谷氨酸二乙酯16.53g，收率79.9％。将16gN-(5-硝基-2-噻吩甲酰)-L-谷氨酸二乙酯、20g还原铁粉、16g硫酸亚铁和100ml甲醇、50ml纯化水加入到250ml三口瓶中，升温回流反应5小时。TLC跟踪检测至反应终点。反应结束后，降温至10～30℃，抽滤至无液体流出。浓缩结束，料液用300ml乙酸乙酯平均分3次萃取。萃取结束后，合并有机层，200ml饱和氯化钠溶液平均分2次洗涤。合并有机相干燥，浓缩至无液体流出，得棕色油状物，硅胶柱分离，乙酸乙酯：正己烷＝1：2洗脱得N-(5-氨基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.雷替曲塞有关物质F，其特征在于，具有如下结构：

【技术特征摘要】
1.雷替曲塞有关物质F，其特征在于，具有如下结构：2.一种雷替曲塞有关物质F的制备方法，其特征在于，反应路线如下：具体包括以下步骤：1)N-(5-甲氨基-2-噻吩甲酰)-L-谷氨酸二乙酯在极性非质子溶液中，在无机碱催化下，与6-溴甲基-3，4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮缩合，得中间体Ⅱ；2)中间体Ⅱ在碱性溶液中水解得到有关物质F。3.根据权利要求2所述的雷替曲塞结构类似物F的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：1)6-溴甲基-3，4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮溶于极性非质子溶液，搅拌加热，加入无机碱，再滴加N-(5-甲氨基-2-噻吩甲酰)-L-谷氨酸二乙酯的极性非质子溶液，粗品经柱层析纯化得中间体Ⅱ；2)将无机碱的水溶液，降温至0～10℃，缓慢加入中间体Ⅱ，滴加稀盐酸溶液，调节pH，低温析出晶体，过滤，滤饼真空干燥得有关物质F。4.根据权利要求2所述的雷替曲塞结构类似物F的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：1)6-溴甲基-3，4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮溶于极性非质子溶液，搅拌加热至40-120℃，加入无机碱，再滴加N-(5-甲氨基-2-噻吩甲酰)-L-谷氨酸二乙酯的极性非质子溶液溶液，粗品经柱层析纯化得中间体Ⅱ；2)将无机碱的水溶液，降温至0～10℃，缓慢加入中间体Ⅱ，滴加0～10mmol/L盐酸溶液，调节pH至3～4，...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐丹，杨寿海，汪传军，吴晶，柴雨柱，王华萍，朱春霞，田舟山，
申请(专利权)人：南京正大天晴制药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32