破骨细胞分化抑制用肽及其用途制造技术

本发明专利技术的肽不仅起到与天然的白细胞介素‑3的功能相同或类似的功能，并根据小的大小，皮肤渗透度非常优秀。并且，本发明专利技术的肽通过抑制核因子kb受体活化因子配体‑核因子kb受体活化因子信号路径，不仅抑制核因子κB的活性化及核转录，还抑制由核因子kb受体活化因子配体及炎性细胞因子诱导的抗酒石酸盐酸性磷酸酶、组织蛋白酶K或1型或2型肿瘤坏死因子受体的表达，从而以处理浓度‑依赖性的方式抑制破骨细胞分化。并且，本发明专利技术的肽促进骨钙素、骨保护素、骨唾液酸蛋白或骨桥蛋白等的多个造骨细胞分化标记的表达，从而有助于造骨细胞分化。因此，本发明专利技术肽的优秀的活性及稳定性可非常有用地适用于医药、医药外品或化妆品。

Peptides for Osteoclast Differentiation Inhibition and Their Use

The peptide of the invention not only has the same or similar function as natural interleukin 3, but also has excellent skin permeability according to its small size. Moreover, the peptide of the present invention not only inhibits the activation and transcription of nuclear factor kappa B, but also inhibits the expression of tartrate-resistant acid phosphatase, cathepsin K or type 1 or type 2 tumor necrosis factor receptor induced by nuclear factor kB receptor activating factor ligand and inflammatory cytokines by inhibiting the signal pathway of nuclear factor kB receptor activating factor ligand and nuclear factor kB receptor activating factor. The differentiation of osteoclasts was inhibited in a concentration-dependent manner. Moreover, the peptide of the present invention promotes the expression of multiple osteoblast differentiation markers such as osteocalcin, osteoprotegerin, osteosinoic acid protein or osteopontin, thereby contributing to the differentiation of osteoblasts. Therefore, the excellent activity and stability of the peptide of the present invention can be very useful for medicine, pharmaceutical external products or cosmetics.

【技术实现步骤摘要】
破骨细胞分化抑制用肽及其用途本申请是2013年10月25日提交的同名专利技术专利申请201380078414.X的分案申请。
本专利申请针对2013年07月23日向韩国专利厅提出的韩国特许申请第10-2013-0086939号主张优先权，上述专利申请的公开事项插入于本说明书作为参照。本专利技术涉及破骨细胞分化抑制用肽及其用途。
技术介绍
骨平衡性和骨骼的结构形状借助吸收骨的破骨细胞和形成骨的造骨细胞之间的组织化的活性来维持。作为多核细胞的破骨细胞从造血干细胞分化[T.Miyamoto,O.Ohneda,F.Arai,etal.,Blood98(2001)2544-2554.]，破骨细胞的分化通过从造骨细胞和活性化的T淋巴细胞分泌的核因子kb受体活化因子(RANK)配体来调节[Y.Y.Kong,U.Feige,1.Sarosi,etal.,Nature402(1999)304-309]。核因子kb受体活化因子配体(RANKL，receptoractivatorofnuclearfactorkappa-Bligand)与作为存在于破骨细胞前体的受体的核因子kb受体活化因子相结合，当巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF，macrophage-colonystimulatingfactor)存在时，诱导破骨细胞分化。核因子kb受体活化因子配体使调节破骨细胞的形成和骨的吸收的信号传输路径活性化[J.Li,1.Sarosi,X.Q.Yan,etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA97(2000)1566-1571.]。核因子kb受体活化因子不具有酪氨酸激酶活性(tyrosinekinaseactivity)，通过已知的作为肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAFs，TNFreceptor-associatedfactors)的接头蛋白质(adaptorprotein)诱导信号传输[L.Galibert,M.E.Tometsko,D.M.Anderson,etal.,J.Biol.,Chem.273(1998)34120-34127]。作为细胞内分子的一部分的肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TRAF6)起到破骨细胞生成的重要作用，并使多种下位信号活性化[M.A.Lomaga,W.C.30Yeh,1.Sarosi,etal.,GenesDev.13(1999)1015-1024]。肿瘤坏死因子受体相关蛋白6与核因子kb受体活化因子的细胞质的结构域相结合后，使核因子κB(NF-κB)和激活蛋白-1(AP-1，activatorprotein-1)活性化[S.L.Teitelbaum,J.Clin.Invest.114(2004)463-465]。肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor)-α作为肿瘤坏死因子配体系列蛋白质，从包含单核细胞/巨噬细胞或破骨细胞的多种细胞分泌，通过被称为肿瘤坏死因子R1、肿瘤坏死因子R2(已知为肿瘤坏死因子Rp55和肿瘤坏死因子Rp75)的2个细胞膜受体来诱导多种生物学反应，肿瘤坏死因子R1和肿瘤坏死因子R2均诱导可促进作为核因子κB的细胞质内抑制剂的IκB的蛋白质水解的细胞内信号[Verma,1.M.,Stevenson,J.K.,Schwarz,E.M.,VanAntwerp,D.,andMiyamoto,S.(1995)GenesDev.9,2723-2735J]。肿瘤坏死因子-α调节炎症反应、免疫调节、细胞增殖及分化、细胞自杀等的多种范围的反应[Ledgerwood,E.C.,Pober,J.S.,andBradley,J.R.(1999)Lab.Invest.79,1041-1050]。并且，肿瘤坏死因子-α在体外及体内促进骨的吸收[Bertolini,D.R.,Nedwin,G.E.,Bringman,T.S.,Smith,D.D.,andMundy,G.R.(1986)Nature319,516-518]，且可在造骨细胞中诱导核因子kb受体活化因子配体的分泌[Hofbauer,L.C.,Lacey,D.L.,Dunstan,C.R.,Spelsberg,T.C.,Riggs,B.L.,andKhos1a,S.(1999)Bone25,255-259]。并且，肿瘤坏死因子-α不仅对在风湿性关节炎中发生的骨和关节破坏的原因起到重要作用，已知在牙周炎、整形外科的移植后分离、慢性炎症性骨吸收的各种形态中，还起到其原因的功能。肿瘤坏死因子-α由借助脂多糖(lipopolysaccharide)来刺激的破骨细胞介导[Abu-Amer,Y.,Ross,F.P.,Edwards,J.,andTeitelbaum,S.L.(1997)1.Clin.Invest.100,1557-1565]。肿瘤坏死因子-α在闭经后出现的骨质疏松症中，对雌激素缺乏带来的骨质流失起到重要的作用[Cenci,S.,Weitzmann,M.N.,Roggia,C.,Namba,N.,Novack,D.,Woodring,J.,andPacifici,R.(2000)J.Clin.Invest.106,1229-1237]。作为主要通过活性化的T淋巴细胞分泌的细胞因子的白细胞介素(IL，interleukin)-3可用作免疫与造血干细胞系统之间的纽带[J.W.Schrader,Interleukin-3,in:A.W.Thomson,M.T.Lotze(Eds.),AcademicPress,London,UK,2003,pp.201-225]。白细胞介素-3不仅直接作用于小鼠破骨细胞前体，还向巨噬细胞一侧促进细胞分化，来抑制通过核因子kb受体活化因子配体诱导的破骨细胞分化[S.M.Khapli,L.S.Mangashetti,S.D.Yogesha,M.R.Wani,J.Immunol.171(2003)142-151]。在破骨细胞前体中，白细胞介素-3抑制IκB的磷酸化和分解，从而妨碍向由核因子kb受体活化因子配体诱导的核因子κB的核移动。并且，抑制由核因子kb受体活化因子配体诱导的c-Jun氨基端激酶(JNK，c-JunN-terminalkinase)的活性，向下调节c-Fos、小鼠激活T-细胞核因子1(NFATc1)转录因子的表达。确认到白细胞介素-3在转录后步骤中，抑制核因子kb受体活化因子的表达，不能通过利用小鼠的体内实验返回到上述过程。本说明书全文中，参照了多篇论文及专利文献，并表示了其引用。所引用的论文及专利文献的公开内容全部插入于本说明书作为参照，从而更加明确说明本专利技术所属的
的水平及本专利技术的内容。
技术实现思路
要解决的问题本专利技术人努力开发维持与白细胞介素-3(Interleukin3)相同的功能或类似的功能，并与天然的白细胞介素-3蛋白质相比，活性及稳定性优秀的物质。其结果，本专利技术人在很多肽候选物质中选择具有优秀的生理活性(例如，破骨细胞分化抑制能力、骨分化促进能力等)的来源于白细胞介素-3的肽，从而完成了本专利技术。因此，本专利技术的目的在于，提供由SEQIDNO:1或SEQIDNO:2的氨基酸序列形成的肽。本专利技术的再一目的在于，提供骨疾病改善或治疗用药剂学组合物。本专利技术的另一目的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.肽，其由SEQ ID NO:2的氨基酸序列组成。

【技术特征摘要】
2013.07.23 KR 10-2013-00869391.肽，其由SEQIDNO:2的氨基酸序列组成。2.权利要求1所述的肽，其中所述肽的N-末端或C-末端结合有选自乙酰基、芴甲氧羰基、甲酰基、棕榈酰基、肉豆蔻基、硬脂酰基及聚乙二醇的保护基。3.骨疾病改善或治疗用药剂学组合物，其包含权利要求1所述的肽作为有效成分。4.权利要求3所述的组合物，其中所述骨疾病包含骨质疏松症、成骨不全症、骨软化症、骨坏死症、佝偻病、骨髓炎、牙槽骨质丢失、佩吉特氏病、高钙血症、原发性甲状旁腺功能亢进症、转移性骨疾病、骨髓瘤、风湿性关节炎中的骨质流失、由癌症引起的骨质流失、纤维异常增殖症、无力型骨病、代谢性骨疾病或随年龄的骨量损...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑镕池，金银美，李应智，李泰勋，A·R·韩，
申请(专利权)人：凯尔格恩有限公司，
类型：发明
国别省市：韩国,KR