烟叶提取物及其治疗烟瘾的用途制造技术

本发明专利技术涉及一种烟叶提取物，其相对于提取物的总重量含有至少5重量％的蛋白质，且基本上不含分子量小于10kDa的分子。本发明专利技术还涉及含有这种提取物的药物组合物及其在治疗烟瘾中的用途。

Tobacco leaf extract and its application in the treatment of tobacco addiction

The present invention relates to a tobacco leaf extract, which contains at least 5% protein by weight relative to the total weight of the extract, and basically does not contain molecules with molecular weight less than 10 kDa. The invention also relates to a pharmaceutical composition containing the extract and its use in the treatment of smoking addiction.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】烟叶提取物及其治疗烟瘾的用途
本专利技术涉及烟叶提取物，以及含有该烟叶提取物的药物组合物及其在烟草成瘾治疗中的用途。现有技术一般而言，世界卫生组织将依赖或成瘾定义为“一种物质的使用比其他曾经具有更大价值的行为具有更高优先级的综合征”。在其极端形式中，依赖状态的特征是对物质的不可抗拒的需求迫使遭受这种依赖的个人冲动地寻求这种物质。烟草依赖导致严重的公共卫生问题，大量与吸烟有关的疾病，如癌症(肺癌、咽喉癌、口腔癌、唇癌等)、心血管疾病、慢性支气管炎等。除了疾病本身，吸烟有很多副作用(生育能力下降、表皮改变、口腔和鼻粘膜改变、脑动脉改变、食道和胃损伤、维生素B和C缺乏等)。有三种类型的烟草依赖同时起作用：身体依赖，主要是由于烟草中存在尼古丁，表现为渴望的感觉(强烈的吸烟欲望，兴奋，紧张，不安，焦虑，睡眠障碍等)；与尼古丁的精神作用有关的心理依赖，该作用提供快乐、放松、智力刺激、抗焦虑、抗抑郁和抑制食欲的作用；环境或行为的依赖性，其取决于社会和友好的压力。身体依赖平均在几周内消失。戒断症状在戒烟后三至四天达到高峰，可持续数周。心理依赖需要更长时间才能减少，并且可持续数月。通过积极和消极的强化来维持对烟草的依赖。尼古丁负责释放多巴胺，即奖励回路中的神经递质。吸烟者吸烟以重现由多巴胺释放引起的愉悦感(这是香烟的正强化)并且当他的多巴胺水平太低时避免戒断症状(这是香烟的负强化)。烟草依赖的药理学治疗有三种主要方法。第一个目标是在最初设定的目标戒烟日期立即停止，在尼古丁替代品的情况下在此目标戒烟日期之后进行药物治疗，且在安非他酮或伐尼克兰的情况下在一周之前进行药物治疗(为了在目标戒烟日期时达到足够的血浆浓度)。第二种方法在于在尝试停止之前减少其消耗，其中减少阶段对应于施用药理学治疗的预处理。第三种方法是成功停止后预防复发。这三种方法可以减少加入(cuttingdown)而不试图停止。对于吸烟者，准备阶段加强了这些方法各自的功效，他们必须说服自己戒烟的必要性，并强化他这样做的动机。因此，针对烟草依赖性的药理学治疗的处方信息表明，戒烟治疗更有可能在有动力戒烟的患者中成功。目前有四种主要类型的烟草依赖治疗方法(更不用说行为心理治疗、针灸和催眠)，即尼古丁替代品、安非他酮、伐尼克兰和顺势疗法。这四种方法中的每一种的作用原理都是基于尼古丁是负责烟草依赖机制的分子这一事实。尼古丁替代品可以多种方式给药：以贴剂的形式透皮，以口香糖、锭剂或舌下片剂的形式口服，或以吸入器形式通过肺部途径。尼古丁替代物的施用主要通过尽可能地防止吸烟者感觉到与戒断相关的戒断症状来减少香烟的负强化，其中由替代物提供尼古丁以补偿香烟的尼古丁。尼古丁替代品的功效根据使用的方法而变化，戒烟率通常为15％至20％。尼古丁替代品在尝试立即戒烟期间使用，并且也在戒烟尝试之前作为预处理以帮助吸烟者减少他们的香烟消耗，作为逐渐戒烟的一部分(减少至戒除)。它们还可以用于减少烟草消费的唯一目的。它们在预防复发方面的功效尚未得到证实。由GlaxoSmithKlineLaboratories销售的安非他酮(商标名为)可作用于某些脑神经递质，如儿茶酚胺、去甲肾上腺素和多巴胺。安非他酮是一种选择性儿茶酚胺再摄取抑制剂，具有抗抑郁作用。其功效与使用尼古丁贴片后的效果相当(戒烟率约为20％)。它的处方量低于尼古丁替代品，因为它对相当的功效具有较低的效益/风险比。实际上，它可导致自杀企图。伐尼克兰(Varenicline)由辉瑞实验室(商品名或)销售，是烟碱乙酰胆碱受体的部分激动剂。伐尼克兰以双重作用靶向这些受体：α4β2受体部分激动剂，它产生类似于尼古丁诱导的反应，其强度较低(从而减少戒断期间的渴望效应)；并且在治疗开始时，当吸烟者偶尔吸烟时进行治疗时，它会在尼古丁(α4β2受体部分拮抗剂)存在下减弱神经化学刺激。因此，伐尼克兰减少了香烟的负强化(戒断效应)和正强化(迫切吸烟)。在实践中，伐尼克兰降低了吸烟的乐趣，这将成为未来戒烟成功的标准。其疗效大于尼古丁替代品(戒烟率约为28％)。伐尼克兰用于立即戒烟尝试，也可作为戒烟尝试前持续几周的预处理，以帮助吸烟者减少他们的香烟消费，作为逐渐戒烟的一部分(减少至戒烟)。在第一项研究(NCT00789074)中，根据伐尼克兰预处理3周后的观点，35％的吸烟者能够将他们的香烟消耗量减少至少50％。在第二项研究(NCT00835900)中，根据伐尼克兰预处理4周时的观点，吸烟的数量减少百分比为42％。在第三项研究(NCT01370356)中，根据伐尼克兰预处理4周后的观点，47％的吸烟者能够将吸烟量减少至少50％。其在预防复发方面的功效尚未得到证实。然而，伐尼克兰引起频繁的副作用(恶心)，并且可能是心脏问题或自杀企图的原因。这些副作用意味着尽管效力优于尼古丁替代品，但伐尼克兰通常仅在尼古丁替代品失败后才作为二线治疗开具。第四种戒烟途径是顺势疗法，其基于使用无限小剂量的引起人们希望控制的症状的物质。“烟草”的提取物通常被用于戒烟。爱尔兰专利申请IE960511特别描述了使用顺势疗法的烟草提取物的稀释物来制造用于恢复神经元功能和缓解尼古丁戒断症状的药物产品。像其他非常规戒烟技术一样，其在重度吸烟者中的疗效不足。尽管在该领域进行了大量研究，但仍需要寻找新的治疗方法或改进现有的烟草依赖治疗方法。在申请PCT/FR2007/000786中，申请人发现，给吸烟者注射烟草叶提取物的水溶液使得可以治疗所述吸烟者的烟草依赖性。这一发现确实出乎意料，因为申请人能够确定所述水性烟叶提取物含有少量尼古丁。因此，使用这种水性烟叶提取物治疗烟草依赖性所涉及的作用机制并不是向吸烟者提供尼古丁。然而，所述水性烟叶提取物含有少量尼古丁的事实并未提供关于其组成及其制备方法的信息。水性烟草叶提取物的尼古丁含量确实可以根据许多因素而显著变化。对于主要类型的烟草种植，烟草叶中的尼古丁含量可以为0.5％至8％(Davis等，“Production,Chemistry,andTechnology”，ISBN-13：978-0632047918，第8章，第275页)。白肋烟草含有大约两倍于马里兰烟草的尼古丁和三倍于东方烟草的尼古丁(Leffingwell，“Chemicalconstituentsoftobaccoleafanddifferencesamongtobaccotypes”，LeffingwellReports，Vol.1(No.2)，2001年2月)。氮肥的使用影响烟叶的尼古丁含量，且上部叶片的尼古丁含量高于中部叶片，而中部叶片的尼古丁含量则高于下部叶片(Xiao-Tang等，“Yieldandnicotinecontentofflue–curedtobaccoasaffectedbysoilnitrogenmineralization”，Pedosphere18(2)：227–235，2008，ISSN1002–0160/CN32–1315/P)。作物轮作影响烟叶的尼古丁含量(Butorac等，“TheEffectofTobaccoMonocultureandCropRotationsonTobaccoLeafComposition”，AgriculturaeCo本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.烟叶提取物，其基于干燥提取物的总重量包含至少5重量％的分子量大于10kDa的蛋白质，且基本上不含分子量小于10kDa的分子，所述蛋白质优选选自以下蛋白质家族：形成木质素的阴离子过氧化物酶、葡聚糖内切‑1,3–β–葡萄糖苷酶、内切几丁质酶、发病机理相关的蛋白质、渗调蛋白和蛋白酶抑制剂及其混合物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.04.07 FR 16530791.烟叶提取物，其基于干燥提取物的总重量包含至少5重量％的分子量大于10kDa的蛋白质，且基本上不含分子量小于10kDa的分子，所述蛋白质优选选自以下蛋白质家族：形成木质素的阴离子过氧化物酶、葡聚糖内切-1,3–β–葡萄糖苷酶、内切几丁质酶、发病机理相关的蛋白质、渗调蛋白和蛋白酶抑制剂及其混合物。2.根据权利要求1的烟叶提取物，其特征在于其基本上不含高分子量蛋白质。3.根据权利要求1或2的烟叶提取物，其特征在于其基本上不含：分子量大于500kDa的蛋白质，优选分子量大于400kDa的蛋白质，更优选分子量大于300kDa的蛋白质，优选分子量大于200kDa的蛋白质，更优选分子量大于150kDa的蛋白质，还更优选分子量大于100kDa的蛋白质且还更优选分子量大于50kDa的蛋白质。4.根据上述权利要求任一项的烟叶提取物，其特征在于，基于提取物的总重量，分子量小于10kDa的分子的含量小于5重量％，优选小于2.5重量％，且还更优选小于1重量％。5.根据上述权利要求任一项的烟叶提取物，其特征在于它可以通过以下获得：使研磨的干燥烟叶经受溶剂提取方法，例如水性溶剂，然后从研磨的干燥烟叶提取物溶液中分离固体残余物，然后用水性溶剂对不含固体残余物的研磨的干燥烟叶提取物溶液进行恒定体积渗滤，水性溶剂的量为2至12倍体积，优选3至10倍体积，优选4至8倍体积，优选6倍体积，所述体积是基于提取物的体积，且使用10kDa截留膜。6.根据上述权利要求任一项的烟叶提取物，其特征在于其包含至少一种属于葡聚糖内切-1,3–β–葡萄糖苷酶家族的蛋白质，且优选选自β–1,3–内切葡聚糖酶酸性亚型PR–Q′(根据UniProt数据库的PR36401)、β–1,3–内切葡聚糖酶碱性空泡亚型GLB(根据UniProt数据库的P27666)，及其混合物。7.根据上述权利要求任一项的烟叶提取物，其特征在于其包含至少一种属于内切几丁质酶家族的蛋白质，且优选选自酸性内切几丁质酶P(根据UniProt数据库的P17513)、酸性内切几丁质酶Q(根据UniProt数据库的P17514)、内切几丁质酶B(根据UniProt数据库的P24091)，及其混合物。8.根据上述权利要求任一项的烟叶提取物，其特征在于其至少包含渗调蛋白(根据UniProt数据库的P14170)。9.根据上述权利要求任一项的烟叶提取物，其特征在于其包含至少一种形成木质素的阴离子过氧化物酶(根据UniProt数...

【专利技术属性】
技术研发人员：B拉方特，
申请(专利权)人：NFL生物科学，
类型：发明
国别省市：法国,FR