一种弧菌DNA电化学传感器及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种弧菌DNA电化学传感器及其制备方法和应用。先将氧化石墨烯在含有氨基离子液体的N,N‑二甲基甲酰胺溶液中进行剥离，制备离子液体功能化石墨烯；然后在上述分散液中制备类水滑石纳米片，制得离子液体功能化石墨烯‑类水滑石纳米片复合物，采用滴涂法制备该复合物修饰的玻碳电极，再将弧菌探针ssDNA通过生物连接剂固定在修饰电极表面，制备所述的弧菌DNA传感器。该DNA传感器具有良好的灵敏性和选择性、较低的检测限和较宽的线性范围。该制备方法包括：修饰电极材料的制备；电化学副溶血性弧菌DNA传感器的制备；电化学副溶血性弧菌DNA传感器与目标DNA的杂交；传感器电化学信号检测。

【技术实现步骤摘要】
一种弧菌DNA电化学传感器及其制备方法和应用
：本专利技术属于生物电化学传感器
，具体涉及一种弧菌DNA电化学传感器及其制备方法，以及用于高灵敏检测致病性副溶血性弧菌的特异性DNA。
技术介绍
：海洋弧菌是一类活动力极强的棒状或弧状革兰氏阴性菌，广泛分布于半咸水、沿岸、河口、海洋水体、沉积物和海洋生物体内，分布在全球河口环境中的一种革兰氏阴性菌，当食用生的、未煮熟的或处理不当的海鲜时，会引起人类急性胃肠炎。其中以副溶血性弧菌的危害最大，研究发现副溶血性弧菌株中都发现了tlh基因，因此它被认为是检测总副溶血性弧菌的一个有用的指标。近年来，DNA电化学生物传感器以其成本低、灵敏度高、响应速度快、选择性好以及仪器小型化等优点引起了人们的广泛关注。迄今为止，各种类型的DNA电化学生物传感器以其广泛的纳米材料如类水滑石(LDH)、碳纳米管(CNTs)和石墨烯(GR)等，被用于提高DNA生物传感器的灵敏度和稳定性，但用于检测弧菌的DNA传感器在灵敏度和检测限方面仍然有很大提升空间。石墨烯(GR)是一种sp2杂化碳原子组成的具有一个碳原子厚度的二维材料，于2004年由Geim首次成功制备，因本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种弧菌DNA电化学传感器，其特征在于所述弧菌DNA电化学传感器以玻碳电极为基底电极，离子液体功能化石墨烯‑类水滑石纳米片复合膜作为电极修饰材料，探针ssDNA通过生物连接剂1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨丙基)碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺共价键合的方式固定在修饰电极表面；所述离子液体功能化石墨烯‑类水滑石纳米片复合膜是先将氧化石墨烯在含有氨基离子液体的N,N‑二甲基甲酰胺溶液中进行剥离，制备离子液体功能化石墨烯，然后在上述分散液中制备类水滑石纳米片，制得离子液体功能化石墨烯‑类水滑石纳米片复合物；所述玻碳电极记为GCE；所述N,N‑二甲基甲酰胺记为DMF；所述氧化石墨烯记为GO，石墨烯记为G...

【技术特征摘要】
1.一种弧菌DNA电化学传感器，其特征在于所述弧菌DNA电化学传感器以玻碳电极为基底电极，离子液体功能化石墨烯-类水滑石纳米片复合膜作为电极修饰材料，探针ssDNA通过生物连接剂1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺共价键合的方式固定在修饰电极表面；所述离子液体功能化石墨烯-类水滑石纳米片复合膜是先将氧化石墨烯在含有氨基离子液体的N,N-二甲基甲酰胺溶液中进行剥离，制备离子液体功能化石墨烯，然后在上述分散液中制备类水滑石纳米片，制得离子液体功能化石墨烯-类水滑石纳米片复合物；所述玻碳电极记为GCE；所述N,N-二甲基甲酰胺记为DMF；所述氧化石墨烯记为GO，石墨烯记为GR；所述类水滑石纳米片记为LDHNS；所述离子液体为1-甲基-3-氨丁基咪唑四氟硼酸盐，记为IL，其结构式如下：所述弧菌DNA电化学传感器的制备方法，其特征在于包括以下具体步骤：(1)IL-GR-LDHNS复合物的制备将一定量的GO加入到100mL含有200mgIL的甲酰胺中，超声分散2h，得到GO浓度为0.5～1.5mg/mL的IL-GO分散液；按一定摩尔比向其中加入MgCl2·6H2O和AlCl3·9H2O，使总金属离子浓度为0.03mol/L，搅拌1h使金属盐完全溶解，在搅拌条件下，用浓度为0.5mol/L的氢氧化钠的甲酰胺溶液缓慢滴定至反应液的pH约为9.0～10.0，室温搅拌反应12h，之后在30～70℃条件下老化12h，反应液在8000rpm转速下离心10min，分别用乙醇和去离子水洗涤3次，室温自然干燥后即得离子液体功能化石墨烯-类水滑石纳米片复合物，记为IL-GR-LDHNS；(2)IL-GR-LDHNS修饰玻碳电极的制备将玻碳...

【专利技术属性】
技术研发人员：詹天荣，李凯利，田夏，
申请(专利权)人：青岛科技大学，
类型：发明
国别省市：山东,37