使用AOBGL11同源体的甜菊醇及甜菊醇糖苷的制造方法技术

在寻求甜菊醇糖苷及甜菊醇的新制造方法。本发明专利技术在于提供一种甜菊醇糖苷及/或甜菊醇的制造方法，其包括剪切甜菊醇糖苷的13位糖苷键、19位葡萄糖基酯键及/或侧链内的糖苷键(除鼠李糖苷键以外)的工序。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用AOBGL11同源体的甜菊醇及甜菊醇糖苷的制造方法
本专利技术涉及甜菊醇及甜菊醇糖苷的制造方法。
技术介绍
在菊科甜菊(Steviarebaudiana)的叶中包含二萜的一种的被称作甜菊醇(Steviol)的次级代谢产物，在甜菊醇上附加了糖的甜菊醇糖苷中呈现砂糖的约300倍的甜味，它们作为低热量的甜味剂在食品产业中被利用。肥胖作为深刻的社会问题在国际上日益严峻，从增进健康及削减医疗费的观点出发低热量甜味剂的需求也日益增大。目前，人工合成的氨基酸衍生物阿斯巴甜(Aspartame)、乙酰磺胺酸钾(AcesulfamePotassium)作为人工甜味剂被利用，而像甜菊醇糖苷这样天然存在的低热量甜味剂更为安全，从而可期待能够更容易得到消费者认可(PublicAcceptance)。甜菊醇糖苷中的甜菊苷(stevioside：stev)为在甜菊醇上附加了3个葡萄糖的化合物，一般在甜菊的叶中包含最多。甜菊苷(stv)具有蔗糖的大约300倍的甜味度但呈现些许苦味。甜菊醇糖苷的瑞鲍迪甙A(RebaudiosideA；rebA)为在甜菊醇上附加了4个葡萄糖的化合物，具有蔗糖的大约400倍的甜味度本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种甜菊醇及/或第2甜菊醇糖苷的制造方法，所述第1及第2甜菊醇糖苷相互不同，其特征在于，包括使选自以下(a)～(c)的蛋白质与第1甜菊醇糖苷反应，从而将所述第1甜菊醇糖苷的13位糖苷键、19位葡萄糖基酯键及侧链内的糖苷键中的至少一个水解的工序，(a)由序列号2的氨基酸序列构成的蛋白质；(b)由序列号2的氨基酸序列中1～83个氨基酸发生缺失、取代、插入及/或附加的氨基酸序列构成，且具有将所述第1甜菊醇糖苷的13位糖苷键、19位葡萄糖基酯键及侧链内除鼠李糖苷键以外的糖苷键中的至少一个水解的活性的蛋白质；(c)具有相对于序列号2的氨基酸序列具有90％以上的序列同一性的氨基酸序列，且具有将所述第1...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.05.25 JP 2016-1044041.一种甜菊醇及/或第2甜菊醇糖苷的制造方法，所述第1及第2甜菊醇糖苷相互不同，其特征在于，包括使选自以下(a)～(c)的蛋白质与第1甜菊醇糖苷反应，从而将所述第1甜菊醇糖苷的13位糖苷键、19位葡萄糖基酯键及侧链内的糖苷键中的至少一个水解的工序，(a)由序列号2的氨基酸序列构成的蛋白质；(b)由序列号2的氨基酸序列中1～83个氨基酸发生缺失、取代、插入及/或附加的氨基酸序列构成，且具有将所述第1甜菊醇糖苷的13位糖苷键、19位葡萄糖基酯键及侧链内除鼠李糖苷键以外的糖苷键中的至少一个水解的活性的蛋白质；(c)具有相对于序列号2的氨基酸序列具有90％以上的序列同一性的氨基酸序列，且具有将所述第1甜菊醇糖苷的13位糖苷键、19位葡萄糖基酯键及侧链内除鼠李糖苷键以外的糖苷键中的至少一个水解的活性的蛋白质。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第1甜菊醇糖苷选自甜菊醇单糖苷、甜菊醇单葡萄糖基酯、甜茶苷、甜菊醇二糖苷、甜菊苷、瑞鲍迪甙B、瑞鲍迪甙A、瑞鲍迪甙C、瑞鲍迪甙D、瑞鲍迪甙E、瑞鲍迪甙F及瑞鲍迪甙M、杜克甙A、甜菊醇糖苷B、甜菊醇糖苷C、甜菊醇糖苷D。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述第2甜菊醇糖苷选自甜菊醇单糖苷、甜菊醇二糖苷、瑞鲍迪甙B、甜菊醇糖苷A、甜菊醇糖苷B、甜菊醇糖苷C、甜菊醇糖苷D。4.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其特征在于，使所述第1甜菊醇糖苷反应的工序在有机溶剂的存在下进行。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂为乙腈。6.根据权利要求1～5中任一项所述的制造方法，其特征在于，包括与所述第1甜菊醇糖苷的13位糖苷键或13位侧链内除鼠李糖苷键以外的糖苷键相比将19位葡萄糖基酯键或19位侧链内除鼠李糖苷键以外的糖苷键优先剪切的工序。7.根据权利要求1～6中任一项所述的制造方法，其特征在于，所述第1甜菊醇糖苷为在13位上支链三糖、二糖或葡萄糖单糖进行了糖苷键合及/或在19位上支链三糖、二糖或葡萄糖单糖进行了葡萄糖基酯键合的物质，且将所述第1甜菊醇糖苷水解的工序包括选自下述(1)～(5)中的任意一个以上的工序：(1)与支链三糖相比将二糖内除鼠李糖苷键以外的糖苷键或葡萄糖单糖的糖苷键或葡萄糖基酯键优先剪切的工序；(2)在键合于糖苷配基的葡萄糖上进一步键合木糖与葡萄糖或者鼠李糖与葡萄糖时，将葡萄糖优先剪切的工序；(3)与13位支链三糖内除鼠李糖苷键以外的糖苷键相比，将19位支链三糖内除鼠李糖苷键以外的糖苷键优先剪切的工序；(4)与13位二糖内除鼠李糖苷键以外的糖苷键相比，将19位支链三糖或二糖内除鼠李糖苷键以外的糖苷键及与19位葡萄糖单糖的葡萄糖基酯键优先剪切的工序；(5)与13位葡萄糖单糖的糖苷键相比，将19位葡萄糖单糖的葡萄糖基酯键优先剪切的工序。8.一种甜菊醇及/或第2甜菊醇糖苷的制造方法，所述第1及第2甜菊醇糖苷相互不同，其特征在于，包括使来自在宿主细胞中导入了选自以下(a)～(e)中的多核苷酸的非人转化细胞的酶与所述第1甜菊醇糖苷接触，将所述第1甜菊醇糖苷的13位糖苷键、19位葡萄糖基酯键及/或侧链内除鼠李糖苷键以外的糖苷键水解的工序：(a)由序列号1的碱基序列构成的多核苷酸；(b)编码由序列号2的氨基酸序列构成的蛋白质的多核苷酸；(c)多核苷酸，其编码由序列号2的氨基酸序列中1～83个氨基酸发生缺失、取代、插入及/或附加的氨基酸序列构成且具有将所述第1甜菊醇糖苷的13位糖苷键、19位葡萄糖基酯键及侧链内除鼠李糖苷键以外的糖苷键中的至少一个水解的活性的蛋白质；(d)多核苷酸，其编码具有相对于序列号2的氨基酸序列具有90...

【专利技术属性】
技术研发人员：落合美佐，小埜栄一郎，
申请(专利权)人：三得利控股株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP