源自乳酸菌的蛋白质及其制备方法技术

本发明专利技术涉及源自乳酸菌的蛋白质及其制备方法。本发明专利技术的源自乳酸菌的蛋白质是从治疗大肠癌的效果优异的乳酸菌(鼠李糖乳杆菌)中分离的精制蛋白质，其对大肠疾病的显著的效果得到验证，因此，期待在医学领域中其作为天然蛋白质大肠疾病治疗剂的广泛的应用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】源自乳酸菌的蛋白质及其制备方法
本专利技术涉及源自乳酸菌的蛋白质及其制备方法。
技术介绍
大肠疾病是指包括大肠癌、大肠炎、肠易激综合症、克罗恩病等在内的大肠中发生的多种疾病的总称。在当代，由于频繁的压力和西方化的饮食习惯、饮酒等影响，大肠疾病患者的数量正在大幅增加。根据韩国国民健康保险公团的2012年大肠癌诊疗费用的报告书，大肠癌患者的数量由2007年的7万7,193名增加至2011年的11万3,504名，大肠癌的诊疗费用由2007年的3,360亿韩元增加至2011年的5,148亿韩元。为了治疗大肠癌，已经开发并正在使用合成化合物5-氟尿嘧啶(5-FU，fluorouracil)、优福定(UFT，喃氟啶-尿嘧啶(tegafur-uracil))、卡培他滨(capecitabine)等氟嘧啶(fluoropyrimidine)类药物和伊立替康(irinotecan)、奥沙利铂(oxaliplatin)等，并且正在开发靶向治疗剂贝伐珠单抗(bevacizumab，商品名为阿瓦斯汀(Avastin))及西妥昔单抗(cetuximab，商品名为爱必妥(Erbitux))等。但是，高浓度施用及长期使用所带来的副作用的危险高，因此迫切需要开发天然物治疗剂。另外，益生菌是指摄入后到达肠时对肠道的环境起到有益作用的菌株。目前为止已知的大部分益生菌是乳酸菌，乳酸菌是指使糖类发酵来获取能量并生成大量的乳酸的细菌的总称。向包括大肠癌及大肠炎在内的大肠疾病患者施用乳酸菌而能够期待治疗效果是公知的，因此正在开发“抑制肠道有害酶的活性的新韩国型乳酸菌及其用途(KR10-0232639B1)”及“具有改善肠道环境效果的纳米型泡菜乳酸菌组合物(KR10-2016-0084822A)”等将乳酸菌用作大肠疾病治疗剂的技术，但是，对于在乳酸菌中确认并利用有效成分蛋白质的技术的开发还是不完善的情况。因此，本专利技术涉及源自乳酸菌的蛋白质及其制备方法，本专利技术的源自乳酸菌的蛋白质是从治疗大肠癌的效果优异的乳酸菌(鼠李糖乳杆菌)中分离的精制蛋白质，其对大肠疾病的显著的效果得到验证，因此，期待在医学领域中其作为天然蛋白质大肠疾病治疗剂的广泛的应用。
技术实现思路
要解决的技术问题本专利技术是为了解决如上所述的现有技术中的问题而提出的，涉及源自乳酸菌的蛋白质及其制备方法。但是本专利技术所要解决的技术问题并不限于以上提及的问题，本领域具有通常知识的技术人员可以由下述记载明确地理解未提及的其他问题。技术方案下面，本申请中记载的多种具体实施方式是参照附图而记载。下述说明中，为了完全理解本专利技术而记载了多种特异性详细事项，例如，特异性形态、组合物及工艺等。但是，特定的具体实施方式可以以没有这些特异性详细事项中的一种以上的方式实施，或者可以与其他公知的方法及形态一同实施。在其他实施方式中，为了避免使本专利技术不必要地模棱两可，公知的工艺及制备技术没有记载为特定的详细事项。通过本说明书整体的对“一个具体实施方式”或“具体实施方式”的参考表示本专利技术的一个以上的具体实施方式中包含与具体实施方式结合进行记载的特别的特征、形态、组成或特性。因此，本说明书整体的多个部分中记载的“一个具体实施方式中”或“具体实施方式”的情况并不一定表示本专利技术的相同的具体实施方式。此外，进一步地，在一个以上的具体实施方式中，特别的特征、形态、组成或特性可以通过任何适当的方法进行组合。若说明书中没有特别的定义，则本说明书中使用的所有科学性术语及技术性术语具有与本专利技术所属
中的技术人员通常理解的意义相同的意义。本专利技术的一个具体实施方式中，“益生菌(probiotics)”是指摄入后到达肠时对肠道的环境起到有益作用的菌株。目前为止已知的大部分益生菌为乳酸菌，并且包括一部分杆菌(Bacillus)等。俄罗斯科学家伊利亚梅契尼柯夫(ElieMechinikoff)查明了保加利亚人长寿的理由是摄入了由乳杆菌属(Lactobacillus)发酵的发酵乳，并以此获得了诺贝尔奖，自此以来，对乳酸菌、益生菌的功能性的研究持续了很长时间。为了被认证为益生菌，包括乳酸菌在内的细菌需要在胃酸和胆汁酸中存活并到达小肠而在肠道中增殖并滞留，并且需要在肠道中显示出有益的效果，应为无毒性且为非病原性。人的肠道中栖息有约1kg的菌，所存在的食物的量和菌的量几乎相同，每天排泄的粪便内容物中除了水分以外，菌约占40％。用显微镜观察人的粪便可知其几乎由菌团组成，这些菌的99％左右是厌氧性菌。吃母乳的健康婴儿的粪便菌中90％以上由双歧杆菌组成，但随着年龄的增长，双歧杆菌逐渐减少，而肠道的有害菌会增加(BifidoMicrofl7:35-43,1998)。在这种正常的老化过程中，帮助肠道菌群的分布保持健康的状态即为益生菌的功能。本专利技术的一个具体实施方式中，“乳酸菌(lacticacidbacteria)”也被命名为乳杆菌，其是指使糖类发酵来获取能量并生成大量的乳酸的细菌的总称。“乳酸菌”的名称是俗称，而并非表示分类学中的位置。与乳酸菌的定义相符的是乳杆菌属(Lactobacillus)、乳球菌属(Lactococcus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、片球菌属(Pediococcus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)等菌属。形态上分为球菌(乳球菌属、片球菌属、明串珠菌属)和杆菌(乳杆菌属、双歧杆菌属)，革兰(Gram)染色性为阳性。任何一种都可以在缺少氧气的环境下很好地发育，从而由各种糖生成乳酸。很多乳酸菌都显示出耐酸性，并且也有如下的乳酸菌，即，营养需求性非常复杂而除了糖类之外还需要很多种类的氨基酸或维生素，并且根据菌种、菌株，若未添加微量营养素，则无法生殖的乳酸菌。从农作物或食品到人或动物的身体，乳酸菌广泛地分布于自然界中，也有无法获知确切的生殖地点的乳酸菌。乳球菌属是在10℃下发育，但在45℃下不会发育，在30℃左右的最适温度下同型发酵的球菌。有多种菌株作为乳制品的起子(starter)而用于食品加工。片球菌属为同型发酵的球菌，成四联的细胞排列状。根据生殖温度、乳酸的旋光性等分类为8种菌种。片球菌属和明串珠菌属一同为与发酵相关的主要菌，与动物的生物体的关联少。明串珠菌属为异型发酵的链球菌，根据糖的分解、生长、生殖的pH等分类为4种菌种。乳杆菌属大致分为同型发酵和异型发酵的2种，根据生殖温度、糖的分解、生长、生成的乳酸的旋光性等分类为55种菌种11种亚菌种。乳杆菌属为代表性的乳酸菌，用于各种发酵食品中，并且乳杆菌属为肠道的常居菌群，与人或动物的健康有重要的关系。双歧杆菌属是异型发酵的专性厌氧性革兰阳性杆菌，所生成的最终产物主要为乳酸和醋酸。本专利技术的一个具体实施方式中，“P8蛋白质(ProteinNo.8)”是指通过本专利技术的实施例中记载的制备方法，从乳酸菌(鼠李糖乳杆菌)中提取的8KDa尺寸的蛋白质片段。本专利技术的P8蛋白质可以定义为由SEQIDNO：1表示的碱基序列或由SEQIDNO：2表示的氨基酸序列，具有有效地治疗大肠疾病的效果。本专利技术的一个具体实施方式中，“载体(vector)”是指在重组DNA实验中以将基因导入宿主中进行增殖为目的而使用的具有自主增殖能力的小型DNA。通常使用质粒和噬菌体。载体的条件为需要有效地本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.蛋白质，其包含选自由SEQ ID NO：8、9及10表示的氨基酸序列中的任意一种以上的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.11.28 KR 10-2016-01594791.蛋白质，其包含选自由SEQIDNO：8、9及10表示的氨基酸序列中的任意一种以上的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的蛋白质，其中，所述蛋白质由SEQIDNO：2表示。3.根据权利要求1所述的蛋白质，其特征在于，所述蛋白质源自乳酸菌。4.根据权利要求3所述的蛋白质，其中，所述乳酸菌为选自鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)、副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)、植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)、戊糖片球菌(Pediococcuspentosaceus)及短乳杆菌(Lactobacillusbrevis)中的任意一种以上。5.根据权利要求4所述的蛋白质，其中，所述乳酸菌为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)。6.用于预防或治疗大肠疾病的药学组合物，其包含权利要求1所述的蛋白质作为有效成分。7.根据权利要求6所述的用于预防或治疗大肠疾病的药学组合物，其中，所述大肠疾病为选自大肠癌、大肠息肉、大肠炎、缺血性肠病、痢疾、肠道血管发育不良、憩室病、肠易激综合症及克罗恩病中的任意一种以上。8.根据权利要求7所述的用于预防或治疗大肠疾病的药学组合物，其中，所述大肠疾病为大肠癌。9.用于预防或改善大肠疾病的食品组合物，其包含权利要求1所述的蛋白质作为有效成分。10.根据权利要求9所述的用于预防或改善大肠疾病的食品组合物，其中，所述大肠疾病为选自大肠癌、大肠息肉、大肠炎、缺血性肠病、痢疾、肠道血管发育不良、憩室病、肠易激综合症及克罗恩病中的任意一种以上。11.根据权利要求10所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑明俊，
申请(专利权)人：细胞生物技术公司，
类型：发明
国别省市：韩国,KR