The invention belongs to the field of biotechnology, in particular to an AFFT2 cell and a preparation method thereof. The transformed T cells were transformed by TCR-T technology. The transformed T cells were blocked in vitro with inhibitory signal molecule antibody drugs, thus effectively improving the anti-tumor ability of T cells. After AFFT2 modification, the proportion of specific T cells recognizing tumor antigen was more than 70%.
【技术实现步骤摘要】
一种AFFT2细胞
：本专利技术属于生物
，具体地说，涉及一种AFFT2细胞及其制备方法。
技术介绍
：目前，在肿瘤的特异性免疫治疗方面，现有的LAK、DC、CIK、DC-CIK细胞和方法基本被证明是无效的，而NK、CAR-NK、TIL、等细胞技术还有待成熟，CAR－T细胞在安全性和实体瘤治疗中还有缺陷。现有技术一般通过改造DC细胞，由DC递呈T细胞产生特异杀伤。有些实验室在尝试用病毒做为载体的方法进行转染递呈T细胞，诱导T细胞的特异性杀伤。我们也曾用突变混合多肽直接刺激PBMC，诱导T细胞。还有实验室利用TCR-T技术，靶向递呈MAGEA3抗原。以上治疗方法并不成熟，尤其是体外诱导DC细胞及DC细胞负载肿瘤抗原技术理论上研究较多，但在具体实施过程中还有许多问题，缺乏明确的、肿瘤细胞发生发展关键的信号传导通路相关分子作为诱导抗原，因为肿瘤抗原不明及肿瘤微环境免疫抑制的障碍，使实现特异性细胞靶向免疫治疗难以顺利实施。另外，有的虽然进行了抗原体外冲击，但没有进行体外共培育和体外扩增，让较为单薄的特异性细胞直接面对复杂的肿瘤微环境，因此，很难起到预期的效果。也有的...
【技术保护点】
1.一种AFFT2细胞，其特征在于，所述AFFT2细胞由以下步骤制备：1)抽取患者外周血，进行ctDNA外显子测序，或者以肿瘤组织进行全外显子测序，筛选出突变位点，进行抗原表位预测并合成突变多肽；2)使用外周血制备永生化DC，并负载所述突变多肽，与PBMC共孵育，获得AFF细胞；3)用突变多肽作为抗原刺激AFF细胞，筛选获得精准多肽；4)以所述精准多肽负载永生化DC细胞并与PBMC共孵育，制备AFF’细胞；5)以所述精准多肽作为抗原刺激所述AFF’细胞，筛选获得能够识别所述精准多肽的特异性T细胞，通过测序得到特异性细胞的高频TCR序列；6)从PBMC中分离CD8+T细胞，敲...
【技术特征摘要】
1.一种AFFT2细胞，其特征在于，所述AFFT2细胞由以下步骤制备：1)抽取患者外周血，进行ctDNA外显子测序，或者以肿瘤组织进行全外显子测序，筛选出突变位点，进行抗原表位预测并合成突变多肽；2)使用外周血制备永生化DC，并负载所述突变多肽，与PBMC共孵育，获得AFF细胞；3)用突变多肽作为抗原刺激AFF细胞，筛选获得精准多肽；4)以所述精准多肽负载永生化DC细胞并与PBMC共孵育，制备AFF’细胞；5)以所述精准多肽作为抗原刺激所述AFF’细胞，筛选获得能够识别所述精准多肽的特异性T细胞，通过测序得到特异性细胞的高频TCR序列；6)从PBMC中分离CD8+T细胞，敲除原有TCR并进行高频TCR的表达，构建T...
【专利技术属性】
技术研发人员：焦顺昌，张嵘，周子珊，解佳森，陈小彬，彭刚，陈红利，
申请(专利权)人：北京鼎成肽源生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11
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