This application discloses a method for rapid screening of rice transgenic positive cells. The first step of amplification system includes: pGDR plasmid (50ng/muL) 0.5 muL; DsRed F (10 mu M) 1 muL; DsRed R (10 mu M) 1 mu L; 2x PCR buffer 10 mu L; Taq enzyme 0.25 mu L; double steaming water volume 20 mu L. The method of the present invention can be used to observe the success of the transgene in the initial stage of the plant transgene, and provides a basis for the subsequent efficient screening of positive plants.
【技术实现步骤摘要】
一种水稻转基因阳性细胞快速筛选的方法
本专利技术涉及基因工程遗传育种学和生物遗传改良
，特别涉及一种高效率从转基因水稻细胞快速筛选的方法。
技术介绍
水稻作为世界上超过一半人口的主食，是最重要的粮食作物之一.在过去的半个多世纪里，水稻育种取得了巨大的成功.水稻的单位产量实现了倍增，部分地方甚至提高至3倍，这为保障世界粮食安全作出了巨大的贡献.但近十几年来水稻的产量停滞不前，这一方面是由于在育种技术上没有新的突破以及遗传多样性在栽培品种中的逐步变窄，另一方面也是因为频繁发生的病虫害以及旱灾等自然灾害使得水稻生产损失惨重.然而，世界人口的持续增长以及社会经济的快速发展导致对粮食的需求不断增加。针对这些问题，我国学者提出了培育绿色超级稻的设想，围绕水稻抗病虫、抗旱、营养高效利用、优质、高产等五大重要性状，对水稻品种进行全面改良以实现农业的可持续发展.而转基因技术作为一种新兴的育种手段，在实现绿色超级稻目标上将发挥重要作用.水稻的转基因研究始于20世纪80年代末期，迄今已有大量的转基因水稻研究被报道。水稻转基因技术始于原生质体培养，1985年首次成功地从水稻原生质体...
【技术保护点】
1.一种水稻转基因阳性细胞快速筛选的方法，其特征在于，包括以下步骤：第一步，以含有DsRED片段的pGDR质粒为模板，利用引物进行扩增，获得DsRED片段；第二步，以pCAMBIA1300双元载体质粒为模板，扩增获得两端含有Kpn I和X ba I酶切位点的35S启动子片段；第三步，将引入X ba I和BamH I酶切位点的DsRED片段插入到pCAMBIA1300双元载体上；第四步，将引入Kpn I和X ba I酶切位点的35S启动子连接到第三步已经连接上DsRED基因的pCAMBIA1300载体上；第五步，将含有35S启动子和DsRED基因的pCAMBIA1300载体的...
【技术特征摘要】
1.一种水稻转基因阳性细胞快速筛选的方法，其特征在于，包括以下步骤：第一步，以含有DsRED片段的pGDR质粒为模板，利用引物进行扩增，获得DsRED片段；第二步，以pCAMBIA1300双元载体质粒为模板，扩增获得两端含有KpnI和XbaI酶切位点的35S启动子片段；第三步，将引入XbaI和BamHI酶切位点的DsRED片段插入到pCAMBIA1300双元载体上；第四步，将引入KpnI和XbaI酶切位点的35S启动子连接到第三步已经连接上DsRED基因的pCAMBIA1300载体上；第五步，将含有35S启动子和DsRED基因的pCAMBIA1300载体的融合质粒导入到农杆菌中，形成可以用于介导转化植物细胞的工程菌；第六步，利用上述工程菌转化水稻的愈伤组织；第七步，通过对第六步中转化的愈伤组织培养后，筛选转基因成功的细胞。2.根据权利要求1所述水稻转基因阳性细胞快速筛选的方法，其特征在于，所述方法进一步...
【专利技术属性】
技术研发人员：米铁柱，张国栋，刘佳音，邹丹丹，李继明，王晶，单贞，
申请(专利权)人：青岛袁策集团有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37
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