一种可诱导凋亡的携带检测标签的CD20嵌合抗原受体T淋巴细胞及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种编码表达于人淋巴细胞表面的CD20嵌合抗原受体和标签融合蛋白的核酸，所述嵌合抗原受体蛋白包含顺序连接的胞外结合区，跨膜区和胞内信号区以及可用于跟踪检测CAR‑T细胞的标签蛋白，其中所述胞外结合区包含特异性识别CD20胞外区的单链抗体scFv(CD20)；该核酸同时编码表达于人淋巴细胞胞内的可诱导细胞凋亡的蛋白的核酸，可随时诱导嵌合抗原受体修饰的T淋巴细胞凋亡，消除免疫治疗后的副作用。本发明专利技术还提供一种采用上述核酸表达的蛋白修饰的T淋巴细胞，其表面表达一种可直接检测的嵌合抗原受体，胞内表达可诱导细胞凋亡的蛋白。

A CD20 chimeric antigen receptor T lymphocyte with detection tag that can induce apoptosis and its application

The present invention provides a nucleic acid encoding CD20 chimeric antigen receptor and label fusion protein expressed on human lymphocyte surface. The chimeric antigen receptor protein includes sequentially connected extracellular binding region, transmembrane region and intracellular signal region, and label protein for tracking and detecting CAR T cells. The extracellular binding region contains scFv, a single chain antibody specifically recognizing CD20 extracellular region. (CD20); The nucleic acid encodes the nucleic acid of apoptotic protein expressed in human lymphocyte cells, which can induce apoptosis of T lymphocyte modified by chimeric antigen receptor at any time and eliminate the side effects of immunotherapy. The invention also provides a T lymphocyte modified with the protein expressed by the nucleic acid, which expresses a chimeric antigen receptor directly detectable on its surface and a protein expressed in the cell that can induce apoptosis.

【技术实现步骤摘要】
一种可诱导凋亡的携带检测标签的CD20嵌合抗原受体T淋巴细胞及其应用
本专利技术涉及肿瘤的细胞免疫治疗领域，尤其涉及一种基于CD20的可诱导凋亡并简便检测的嵌合抗原受体及其应用，具体地涉及对特异性表达CD20的B细胞来源的肿瘤的可诱导凋亡并可检测嵌合抗原受体表达的转基因淋巴细胞的制备及治疗应用。
技术介绍
嵌合抗原受体是由抗原识别结构域(配体或单链抗体)和胞内的一系列信号结构域依次连接而成，具体包括抗原特异性的受体(如单链抗体scFv)，间隔序列(spacer)，跨膜序列(TMDomain)和胞内共刺激信号分子。在体内CAR修饰的T淋巴细胞能够通过其单链抗体特异的识别相关肿瘤表面抗原，然后通过胞内共刺激信号分子将识别的信号传递到细胞内，激活细胞的杀伤性，靶向杀伤肿瘤细胞。由于CAR-T细胞在血液肿瘤的免疫治疗中起到了重要作用，以CD19-CAR-T细胞治疗淋巴细胞肿瘤最为突出，2017年美国FDA已经批准上市。淋巴细胞在肿瘤免疫应答中的作用日益受到重视。基于T淋巴细胞的过继免疫治疗在部分肿瘤中取得了一定的效果，并且该种免疫治疗方法可以克服抗体治疗的缺陷，但在大多数肿瘤的疗效仍不能令人本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种编码表达于T淋巴细胞表面的CD20特异性嵌合抗原受体、标签融合蛋白和可诱导凋亡的基因的核酸，其特征在于：该核酸序列如Seq ID No.8所示。

【技术特征摘要】
1.一种编码表达于T淋巴细胞表面的CD20特异性嵌合抗原受体、标签融合蛋白和可诱导凋亡的基因的核酸，其特征在于：该核酸序列如SeqIDNo.8所示。2.如权利要求1所述的编码表达于T淋巴细胞表面的CD20特异性嵌合抗原受体、标签融合蛋白和可诱导凋亡的基因的核酸，其特征在于：该核酸编码表达的CD20特异性嵌合抗原受体包含顺序连接的胞外结合区，CD8α铰链区、跨膜区和CD28、CD137、CD3ζ胞内信号区以及可用于检测的V5-Tag，其中所述胞外结合区包含特异性识别CD20的单链抗体scFv(CD20)。3.如权利要求2所述的编码表达于T淋巴细胞表面的CD20特异性嵌合抗原受体、标签融合蛋白和可诱导凋亡的基因的核酸，其特征在于：该核酸编码表达的CD20特异性嵌合抗原受体包含scFv(CD20)-CD8α-CD28-CD137-CD3ζ及其组合，该组合优选为scFv(CD20)-CD8α-CD137-CD3ζ或scFv(CD20)-CD8α-CD28-CD3ζ。4.如权利要求1所述的编码表达于T淋巴细胞表面的CD20特异性嵌合抗原受体、标签融合蛋白和可诱导凋亡的基因的核酸，其特征在于：该标签融合蛋白选自V5-Tag、6Xhis-Tag、S-Tag、Flag-Tag、...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩庆旺，
申请(专利权)人：河北璋达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：河北,13