The present invention aims at yak RXFP2 gene, designs and synthesizes interfering shRNA, connects it to lentiviral vector, prepares recombinant lentiviral vector, and then transfects the recombinant lentiviral vector and the virus into 293T cells with the necessary auxiliary vector, obtains the recombinant lentiviral vector targeting RXFP2 gene RNA interference, lays a foundation for further research on the function of yak RXFP2. The shRNA designed by the invention can effectively reduce the expression of RXFP2 gene. Cell experiments show that the lentivirus-mediated RNA interference vector of yak RXFP2 gene constructed by the shRNA can significantly reduce the expression of RXFP2 gene in cells, and can change the cell cycle of yak Bmu S1 cells, inhibit their proliferation and promote their apoptosis.
【技术实现步骤摘要】
一种抑制牦牛RXFP2基因表达的shRNA、慢病毒及其构建方法和用途
本专利技术涉及一种抑制牦牛RXFP2基因表达的shRNA，以及利用该shRNA构建的慢病毒介导的牦牛RXFP2基因干扰载体及应用。
技术介绍
松驰素家族受体2(RXFP2)又称富含亮氨酸的G蛋白偶联受体8（LGR8），属于G蛋白偶联受体(GPCR)家族，是胰岛素样因子3(INSL-3)在体内的特异性受体。RXFP2在2005年被鉴定到，并命名为GREAT基因，哺乳动物的RXFP2基因主要在睾丸、子宫、肾、脑、肺等组织表达。研究表明，RXFP2和INSL-3基因突变和缺失与隐睾发生的密切相关，INSL-3由睾丸间质细胞产生，通过旁分泌作用到达睾丸引带与RXFP2结合，促进cAMP的产生和睾丸引带的发育。许多研究表明RXFP2对羊角性状有显著的影响，其在软质角和角的骨膜中特异性表达，表达量与羊角的性状和大小呈负相关。近年来发现RXFP2可能影响牛科动物的角的发育。Allais-Bonnet等通过对有角和无角90天胎牛角芽和额头皮肤组织的研究发现RXFP2参与了牛角芽的分化。赵娟花发现RXFP2基因在...
【技术保护点】
1.一种抑制牦牛RXFP2基因表达的shRNA，其特征在于，选自以下四对中的任意一对：第1对：上游序列是SEQ ID NO.1，下游序列是SEQ ID NO.2；第2对：上游序列是SEQ ID NO.3，下游序列是SEQ ID NO.4；第3对：上游序列是SEQ ID NO.5，下游序列是SEQ ID NO.6；第4对：上游序列是SEQ ID NO.7，下游序列是SEQ ID NO.8。
【技术特征摘要】
1.一种抑制牦牛RXFP2基因表达的shRNA，其特征在于，选自以下四对中的任意一对：第1对：上游序列是SEQIDNO.1，下游序列是SEQIDNO.2；第2对：上游序列是SEQIDNO.3，下游序列是SEQIDNO.4；第3对：上游序列是SEQIDNO.5，下游序列是SEQIDNO.6；第4对：上游序列是SEQIDNO.7，下游序列是SEQIDNO.8。2.根据权利要求1所述的抑制牦牛RXFP2基因表达的shRNA，其特征在于，所述的shRNA优选第4对。3.包含有权利要求1所述的shRNA的载体。4.根据权利要求3所述的载体，其特征在于，所述的载体是指hU6-MCS-CMV-ZsGreen1-PG...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴晓云，梁春年，阎萍，郭宪，丁学智，王宏博，褚敏，裴杰，包鹏甲，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所，
类型：发明
国别省市：甘肃,62
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