一种FLNB基因突变的ATDC5细胞模型的差异蛋白体系、筛选方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种FLNB基因突变的ATDC5细胞模型的差异蛋白，所述蛋白为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶‑1α亚基13；所述FLNB基因突变的位点为c.512T>G(p.Leu171Arg)突变位点；所述FLNB基因的c.512T>G(p.Leu171Arg)突变位点与BD疾病相关。本发明专利技术通过构建与BD疾病相关FLNB基因突变(c.512T>G(p.Leu171Arg)的ATDC5细胞模型，运用SWATH技术筛选分析FLNB基因突变(与BD疾病相关的)的ATDC5细胞和野生型FLNB基因的ATDC5细胞之间的差异表达蛋白，寻找早期诊断BD疾病的生物标记物及可能治疗的靶点，进一步为BD等骨骼畸形疾病的机制研究、药物筛选、转化与防治研究奠定了基础，提供的依据。

Differential Protein System, Screening Method and Application of a FLNB Mutant ATDC5 Cell Model

The present invention provides a differential protein of ATDC5 cell model with FLNB gene mutation, the protein is nicotinamide adenine dinucleotide dehydrogenase 1A subunit 13, the site of FLNB gene mutation is c.512T > G (p.Leu171Arg) mutation site, and the c.512T > G (p.Leu171Arg) mutation site of FLNB gene is related to BD disease. The invention constructs ATDC5 cell model of FLNB gene mutation (c.512T>G (p.Leu171Arg) related to BD disease, uses SWATH technology to screen and analyze differential expression proteins between ATDC5 cells of FLNB gene mutation (related to BD disease) and ATDC5 cells of wild-type FLNB gene, searches for biomarkers for early diagnosis of BD disease and possible therapeutic targets, and further for skeletal malformations such as BD. The research of disease mechanism, drug screening, transformation and prevention laid the foundation and provided the basis.

【技术实现步骤摘要】
一种FLNB基因突变的ATDC5细胞模型的差异蛋白体系、筛选方法及应用
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种FLNB基因突变的ATDC5细胞模型的差异蛋白体系、筛选方法及应用。
技术介绍
细丝蛋白B(FilaminB，FLNB)是一个大分子量二聚体的肌动蛋白(actin)结合蛋白，在细胞内起到骨架并和多种分子作用起到信号传导作用。非随机性分布的细丝蛋白B基因(FilaminB，FLNB)错义突变位点可导致一组常染色体显性遗传、继发于骨发育不良(bonehypoplasia)的骨骼畸形疾病，包括Larsen综合征(Larsensyndrome，LS,OMIM150250)、骨发育不全症(atelosteogenesis，AO，AO-I,OMIM108720；AO-III,OMIM108721)、回飞镖样骨发育不全症(boomerangdysplasia，BD,OMIM112310)。LS最主要的特征是腕骨或跗骨骨化中心增多，远端指骨变窄，大关节的脱位，脊柱畸形，以及诸如前额突起、眼距增宽和鼻梁塌陷等面部特征性畸形。BD是一种致死性骨发育不良疾病，其特征为肢体长骨、椎体及髋臼的发育不本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种FLNB基因突变的ATDC5细胞模型的差异蛋白，其特征在于，所述蛋白为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶‑1α亚基13；所述FLNB基因突变的位点为c.512T>G(p.Leu171Arg)突变位点；所述FLNB基因的c.512T>G(p.Leu171Arg)突变位点与BD疾病相关；所述蛋白与BD疾病相关。

【技术特征摘要】
1.一种FLNB基因突变的ATDC5细胞模型的差异蛋白，其特征在于，所述蛋白为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶-1α亚基13；所述FLNB基因突变的位点为c.512T>G(p.Leu171Arg)突变位点；所述FLNB基因的c.512T>G(p.Leu171Arg)突变位点与BD疾病相关；所述蛋白与BD疾病相关。2.如权利要求1所述的差异蛋白，其特征在于，所述烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶在与BD疾病相关的FLNB基因突变的ATDC5细胞中表达下调。3.烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶-1α亚基13及表达该蛋白的基因在制备检测BD疾病试剂或试剂盒中的应用。4.一种FLNB基因突变的ATDC5细胞模型的差异蛋白筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将野生型FLNB、含有突变位点c.512T>G(p.Leu171Arg)的FLNB质粒分别转染至ATDC5细胞中；建立FLNBWT组和FLNBL171组；(2)提取细胞样本蛋白，测定蛋白浓度；(3)接着对纯化蛋白进行还原打开蛋白二硫键，并使用胰蛋白酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐启明，吴志宏，邱贵兴，吴南，
申请(专利权)人：中国医学科学院北京协和医院，
类型：发明
国别省市：北京,11