经化学修饰的鸭血SOD制剂的制备方法技术

技术编号:19953947 阅读:35 留言:0更新日期:2019-01-03 08:26
本发明专利技术公开了一种经化学修饰的鸭血SOD制剂的制备方法,经修饰后SOD制剂的活性和耐热性明显提高。该方法包括步骤:将鸭血SOD冻干粉用蒸馏水溶解,得到活力为2000‑5000U/ml的酶溶液;将聚乙二醇4000(PEG4000)、维生素E按质量比为4‑5:1混合,溶于硼酸钠缓冲溶液中,配置成总浓度为3‑8mol/L的修饰剂溶液;将修饰剂溶液与酶溶液按质量比为1:1混合,室温搅拌2‑5h,用Tris‑HCl缓冲溶液透析、浓缩,过预先平衡好的Sephadex G‑25色谱柱,收集洗脱液,加入0.05‑0.5mol/L的稳定剂溶液,所述稳定剂包括L‑组氨酸、L‑精氨酸、L‑甲硫氨酸和β‑环糊精中的至少一种;进行真空冷冻干燥,得到修饰后的SOD制剂。

Preparation of Chemical Modified Duck Blood SOD Preparations

The invention discloses a preparation method of chemically modified duck blood SOD preparation, and the activity and heat resistance of the modified SOD preparation are obviously improved. The method comprises the following steps: dissolving duck blood SOD freeze-dried powder in distilled water to obtain an enzyme solution with a activity of 2000 5000U/ml; mixing polyethylene glycol 4000 (PEG4000) and vitamin E in a mass ratio of 4 5:1, dissolving in sodium borate buffer solution, and configuring the modifier solution with a total concentration of 3 8mol/L; mixing the modifier solution with the enzyme solution in a mass ratio of 1:1, stirring at room temperature for 2 5 h, and using the modifier solution. Tris HCl buffer solution was dialyzed and concentrated through pre-balanced Sephadex G_25 chromatographic column to collect eluent and add 0.05 0.5 mol/L stabilizer solution. The stabilizer includes at least one of L histidine, L arginine, L methionine and beta cyclodextrin. The modified SOD preparation was obtained by vacuum freeze-drying.

【技术实现步骤摘要】
经化学修饰的鸭血SOD制剂的制备方法
本专利技术属于SOD制剂领域,具体涉及一种经化学修饰的鸭血SOD制剂的制备方法。
技术介绍
超氧化歧化酶(SOD)够有效清除氧自由基,提高人体的免疫力,是人体中不可缺少的具有特殊生物活性的酶。随着年龄的增长,人体SOD逐渐减少,体内超氧阴离子自由基堆积,不仅会加速细胞衰老,而且容易导致免疫性疾病、急性炎症与水肿等多种疾病,因此,以SOD为活性成分的药物、食品、保健品、化妆品等备受关注,特别是在医药领域得到了广泛应用。动物血液是国内外生产SOD的主要来源之一,我国有丰富的禽类血液资源,其中鸭血食用较少,大部分未能开发利用,具有显著的应用价值。但是现有的提取工艺成本高,工序复杂,提取的SOD稳定性差,半衰期短,长期保存容易失活。
技术实现思路
针对现有技术的上述不足,本专利技术提供一种经化学修饰的鸭血SOD制剂的制备方法。为实现上述目的,本专利技术采用以下技术方案:一种经化学修饰的鸭血SOD制剂的制备方法,包括步骤:(S11)将鸭血SOD冻干粉用蒸馏水溶解,配置成活力为2000-5000U/ml的酶溶液;(S12)将聚乙二醇4000(PEG4000)、维本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种经化学修饰的鸭血SOD制剂的制备方法,其特征在于,包括步骤:(S11)将鸭血SOD冻干粉用蒸馏水溶解,配置成活力为2000‑5000U/ml的酶溶液;(S12)将聚乙二醇4000(PEG4000)、维生素E按质量比为4‑5:1混合,溶于硼酸钠缓冲溶液中,配置成总浓度为3‑8mol/L的修饰剂溶液;(S13)将修饰剂溶液与酶溶液按质量比为1:1混合,室温搅拌2‑5h,用Tris‑HCl缓冲溶液透析、浓缩,过预先平衡好的Sephadex G‑25色谱柱,收集洗脱液,加入0.05‑0.5mol/L的稳定剂溶液,所述稳定剂包括L‑组氨酸、L‑精氨酸、L‑甲硫氨酸和β‑环糊精中的至少一种;(S1...

【技术特征摘要】
1.一种经化学修饰的鸭血SOD制剂的制备方法,其特征在于,包括步骤:(S11)将鸭血SOD冻干粉用蒸馏水溶解,配置成活力为2000-5000U/ml的酶溶液;(S12)将聚乙二醇4000(PEG4000)、维生素E按质量比为4-5:1混合,溶于硼酸钠缓冲溶液中,配置成总浓度为3-8mol/L的修饰剂溶液;(S13)将修饰剂溶液与酶溶液按质量比为1:1混合,室温搅拌2-5h,用Tris-HCl缓冲溶液透析、浓缩,过预先平衡好的SephadexG-25色谱柱,收集洗脱液,加入0.05-0.5mol/L的稳定剂溶液,所述稳定剂包括L-组氨酸、L-精氨酸、L-甲硫氨酸和β-环糊精中的至少一种;(S14)进行真空冷冻干燥,得到修饰后的SOD制剂。2.根据权利要求要求1所述的方法,其特征在于,所述硼酸钠缓冲溶液浓度为10-20mmol/L。3.根据权利要求要求1所述的方法,其特征在于,所述Tris-HCl缓冲溶液浓度为20-30mmol/L。4.根据权利要求要求1所述的方法,其特征在于,平衡液为2.5mmol/L的Tris-HCl缓...

【专利技术属性】
技术研发人员:区炳庆冼琼珍卢卫红
申请(专利权)人:佛山科学技术学院
类型:发明
国别省市:广东,44

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