The invention provides a method for isolation and identification of human pre-patellar fat pad stem cells, which belongs to the technical field of stem cells. The method for isolation and identification of human pre-patellar adipose pad stem cells provided by the invention obtains adipose pad cells by enzymatic treatment, identifies their phenotype, identifies their dryness through induction culture, obtains human pre-patellar adipose pad stem cells, satisfies the relevant characteristics of stem cells, and can be used in various experiments as cell models in the future.
【技术实现步骤摘要】
人髌前脂肪垫干细胞的分离鉴定方法
本专利技术涉及干细胞
，具体而言，涉及人髌前脂肪垫干细胞的分离鉴定方法。
技术介绍
间充质干细胞(MesenchymalStemCells)因具有强大的自我更新、多向分化及跨胚层发育的可塑性，在组织工程的构建及基因治疗方面具有巨大的发展潜力。目前对髌前脂肪垫干细胞的研究好较少，对脂肪垫干细胞的分离、培养和鉴定方法还不够完善，因此脂肪垫干细胞不能作为细胞模型进行科学研究，所以需要尽快的发展脂肪垫干细胞的分离、培养和鉴定方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供人髌前脂肪垫干细胞的分离鉴定方法，提供一种稳定可靠的人髌前脂肪垫干细胞的分离鉴定方法，验证脂肪垫干细胞的可靠性。为了实现本专利技术的上述目的，采用以下技术方案：人髌前脂肪垫干细胞的分离鉴定方法，分离鉴定方法包括以下步骤：将人髌前脂肪垫组织用酶液消化、过滤和离心得到脂肪垫细胞；将脂肪垫细胞接种于培养皿进行培养，脂肪垫细胞覆盖培养皿达到76％-82％时，用酶消化并计数，得到酶消化细胞；将酶消化细胞接种于培养基，培养并计数，得到脂肪垫干细胞并流式进行表型鉴定和诱导培养鉴定分析。...
【技术保护点】
1.人髌前脂肪垫干细胞的分离鉴定方法，其特征在于，所述分离鉴定方法包括以下步骤：将人髌前脂肪垫组织用酶液消化、过滤和离心得到脂肪垫细胞；将所述脂肪垫细胞接种于培养皿进行培养，所述脂肪垫细胞覆盖所述培养皿达到76％‑82％时，用酶消化并计数，得到酶消化细胞；将所述酶消化细胞接种于培养基，培养并计数，得到脂肪垫干细胞并进行流式表型鉴定；用诱导培养基诱导培养所述脂肪垫干细胞，并进行鉴定分析。
【技术特征摘要】
1.人髌前脂肪垫干细胞的分离鉴定方法，其特征在于，所述分离鉴定方法包括以下步骤：将人髌前脂肪垫组织用酶液消化、过滤和离心得到脂肪垫细胞；将所述脂肪垫细胞接种于培养皿进行培养，所述脂肪垫细胞覆盖所述培养皿达到76％-82％时，用酶消化并计数，得到酶消化细胞；将所述酶消化细胞接种于培养基，培养并计数，得到脂肪垫干细胞并进行流式表型鉴定；用诱导培养基诱导培养所述脂肪垫干细胞，并进行鉴定分析。2.根据权利要求1所述的人髌前脂肪垫干细胞的分离鉴定方法，其特征在于，所述酶液为0.1％的I型胶原酶液。3.根据权利要求1所述的人髌前脂肪垫干细胞的分离鉴定方法，其特征在于，所述过滤选用80-140目筛进行。4.根据权利要求1所述的人髌前脂肪垫干细胞的分离鉴定方法，其特征在于，所述离心的转速为1300rpm，时间为5-8min。5.根据权利要求1所述的人髌前脂肪垫干细胞的分离鉴定方法，其特征在于，所述脂肪垫细胞覆盖所述培养皿达到76％-82％前，包括更换培养基，在接种所述脂肪垫细胞后22-27h更换培养基，然后每三天更换一次培养基。6.根据权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员：王斌，朱园园，向川，赵斌，
申请(专利权)人：山西医科大学第二医院，
类型：发明
国别省市：山西,14
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