一种可检测多种优生优育病原体IgG抗体的检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种可检测多种优生优育病原体IgG抗体的检测试剂盒，该试剂盒包括：(1)分别装有复合微珠悬浮液、荧光标记物、样本稀释液、洗涤液的多个密封试剂瓶，(2)分隔并集中包装这些试剂瓶的试剂盒；微珠是经不同的荧光染料染色并编码的聚苯乙烯微球；复合微珠悬浮液中包含多种检测微珠、标准微珠、参考微珠和空白微珠，检测微珠是在不同编码的微珠表面分别包被不同的优生优育病原体抗原；标准微珠包含至少三种结合了不同浓度梯度人IgG的微珠；参考微珠是结合了抗人IgG的微珠；空白微珠是未加入任何抗原的微珠。本发明专利技术可同时对一份人血清样本做多个优生优育病原体IgG抗体的检测，大大提高了相关病原体抗体的检测效率，对诊断以及进一步治疗具有重要意义。

A test kit for detecting IgG antibodies against multiple eugenic and eugenic pathogens

The invention discloses a test kit for detecting IgG antibodies of various eugenic and eugenic pathogens. The kit comprises: (1) multiple sealed reagent bottles containing composite microsphere suspension, fluorescent markers, sample diluent and detergent, (2) separate and centralize the reagent kits of these reagent bottles; microspheres are polystyrene microspheres dyed and coded by different fluorescent dyes; The composite microsphere suspension contains a variety of detection microspheres, standard microspheres, reference microspheres and blank microspheres. The detection microspheres are coated with different eugenic and eugenic pathogen antigens on the surface of different coded microspheres. The standard microspheres contain at least three kinds of microspheres that bind human IgG with different concentration gradients; the reference microspheres are microspheres that bind anti-human IgG; the blank microspheres are microspheres without any antigen added. Beads. The invention can simultaneously detect IgG antibodies of multiple eugenic and eugenic pathogens in a human serum sample, greatly improving the detection efficiency of the related pathogen antibodies, and is of great significance for diagnosis and further treatment.

【技术实现步骤摘要】
一种可检测多种优生优育病原体IgG抗体的检测试剂盒
本专利技术涉及病原体IgG抗体的检测领域，具体涉及可一次性检测多种优生优育病原体IgG抗体的试剂盒。
技术介绍
巨细胞病毒(CMV)感染是广泛的，通常无明显症状；然而，巨细胞病毒可以长时间潜伏或者慢性传染。由于相关地频繁的发病率、感染的新生儿有严重的疾病和个体抑制免疫，因此可确定它为一个重要的人类病原体。95％的先天感染巨细胞病毒的新生婴儿出生时没有明显的临床疾病。剩下的5％的新生婴儿临床表现出严重疾病，如黄疸、肝脾肿大、血小板减少性紫癜、颅骨钙化、生长迟缓、肺炎、脑水肿、头小畸型和眼缺陷。先天感染巨细胞病毒出现严重症状的婴儿由于二次的并发症在出生后就会死亡；然而，大部分幸存的随后会出现神经损伤。巨细胞病毒可以从唾液、尿、乳液、子宫颈分泌物和精液中分离到。因此，病毒可以通过多种途径转播，性传播病毒似乎促成年轻人的病毒感染。免疫抑制的病人经常发生巨细胞病毒感染，一般是潜伏感染的复原作用，并可能威胁生命。这些患者包括同种移植接受者、癌症病人和获得性免疫缺损综合症(AIDS)。巨细胞病毒感染的免疫抑制病人临床表现为肺炎、巨细胞病毒单核细胞增多症、肝炎、心包炎和脑炎。单纯疱疹病毒感染是由2种明显不同的抗原类型HSV-1和HSV-2引起的。两种HSV类型都是人类的病原体。HSV-1通常引起口咽和眼部的感染。HSV-2引起大部分的生殖的和初生的感染。然而，组织特征不是绝对的，HSV-2偶而能从口咽分离到，而5-10％的生殖感染是HSV-1引起的。单纯疱疹病毒感染分为初次感染和二次感染。初次感染以后，感官神经细胞被潜伏感染，潜伏感染的活化导致二次感染。二次感染没有初次感染严重，感染期也短一些。单纯疱疹病毒感染通常发生在最初感染的部位。然而，严重的局部感染或分散感染可能出现在免疫减弱的人身上。这些人包括新生婴儿、免抑制疫力治疗患者，如移植接受者和癌症病人。风疹是一种温和的、传染性的、滤过性毒菌的感染，主要出现在小孩和年轻人身上。风疹具有出现两、三天的红斑斑丘疹皮疹的特征。然而，超过50％的风疹感染者的临床症状不明显。其他风疹的症状包括低热、轻微的上呼吸症状和枕下淋巴结病。在年轻人中短暂的关节痛和关节炎是普通的症状，但非常严重的并发症如脑炎或血小板减少性紫癜非常罕见。尽管风疹在小孩或成人的感染通常是良性的和受自身制约的，但在胎儿的最开始三个月可能引起自然流产，死婴或婴儿先天的缺陷。婴儿在子宫被感染可能在出生时带有明显缺陷，也可能正常，还有可能在以后出现并发症。先天的风疹症状经过了长时间才被认识到，典型症状为先天性心脏病、白内障、感音神经性聋、弱智和子宫内发育延迟。自1964年的风疹流行以后，先天风疹其他临床表现被认识，包括新生血小板减少性紫癜、肝炎、骨骼机能障碍和脑膜脑炎。同时，糖尿病和进行性风疹病毒全脑炎这些先天风疹感染的后期表现的症状最近也被发现。风疹在世界各地存在。在没有接种疫苗的国家，10-25％的生育年龄的妇女是血清反应阴性的，容易被感染。弓形虫是一种在世界上广泛分布原虫性寄生虫。尽管猫是决定性的宿主，但是它能感染几乎所有的哺乳动物和鸟类。血清学的的数据表明大部分的工业国家30％的人口被慢慢感染，尽管不同地区人口的流行程度不一样。大部分病例(80-90％)感染弓形虫后没有症状。一般成人的急性弓形虫病的临床表现为无症状的单淋巴结或多淋巴结病。淋巴结病可能伴随发热、身体不适和类似传染性单核细胞增多症的非典型的淋巴球增多症状。在普通的宿主中很少会出现严重的并发症，如脑炎、心肌炎或肺炎。尽管普通的宿主通常不会因感染弓形虫而产生病状，但是对有免疫缺陷或免疫功能低下的宿主经常是致命的。免疫缺陷或免疫功能低下的病人可以发展为严重的播散性弓形虫病或弓形虫脑炎或两者都出现。大约75％的先天感染的新生儿都会出现症状。然而，几乎所有临床症状不显的新生婴儿在以后会出现视力障碍或神经性后遗症。大约80-85％的出现脉络视网膜炎，有一些也会出现视力障碍或精神、运动的障碍。目前还没有一种方法可以同时检测一份样本中巨细胞病毒、单纯疱疹病毒(1型、2型)、风疹病毒、弓形虫的IgG抗体。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种可检测多种优生优育病原体IgG抗体的检测试剂盒，以解决
技术介绍
存在的上述缺陷。本专利技术是通过如下的技术方案实现的：一种可检测多种优生优育病原体IgG抗体的检测试剂盒，该试剂盒包括：(1)分别装有复合微珠悬浮液、荧光标记物、样本稀释液、洗涤液的多个密封试剂瓶，(2)分隔并集中包装这些试剂瓶的试剂盒；微珠是大小均匀的聚苯乙烯微球，用不同的荧光染料对聚苯乙烯微球进行染色，从而获得不同编码(如1-100号)的微珠；所述复合微珠悬浮液中包含多种检测微珠、标准微珠、参考微珠和空白微珠，具体为：所述检测微珠是在不同编码的微珠表面分别包被不同的优生优育病原体抗原；所述标准微珠包含至少三种结合了不同浓度梯度人IgG的微珠；所述参考微珠是结合了抗人IgG的微珠；所述空白微珠是未加入任何抗原的微珠。优选的，所述微珠的直径为5-7微米，最好是5.6微米。所述优生优育病原体抗原包括：巨细胞抗原、单纯疱疹-1抗原和单纯疱疹-2抗原、风疹抗原和弓形虫抗原。作为优选的技术方案，所述荧光标记物是藻红蛋白标记的羊抗-人IgG(特异性γ链)。所述样本稀释液是含磷酸盐的缓冲液。优选的，样本稀释液中各组分的组成及含量如下：所述洗涤液的组分与所述样本稀释液相同，浓度是它的8-10倍。作为优选的技术方案，本专利技术可检测多种优生优育病原体IgG抗体的检测试剂盒中还包括装有质控品的试剂瓶，所述质控品包括阳性质控品和阴性质控品，所述阳性质控品是含有与所述检测微珠中包含的优生优育病原体抗原相对应的抗体的人混合血清，所述阴性质控品是对优生优育病原体抗原相对应抗体阴性的人阴性血清。所述阳性质控品的浓度范围具有批间特异性，即每一批试剂有其自己的浓度范围。所述复合微珠悬浮液的制备方法，包括如下步骤：使用不同编码的微珠分别包被不同的优生优育病原体抗原，混合制成检测微珠，然后和标准微珠、参考微珠、空白微珠一起转移至样本稀释液并混合，得到所述复合微珠悬浮液。所述检测微珠采用如下方法制备：制备微珠活化液，然后按照每毫升微珠中包含10-100ug病原体抗原的比例加入任意一种优生优育病病原体抗原，充分混合，包被不同优生优育病原体抗原，需要使用不同编码的微珠。所述微珠活化液，是将1000单位体积微珠加入反应管，加入5-50单位体积EDC(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐)和5-50单位体积Sulfo-NHS(N-羟基硫代琥珀酰亚胺)活化而成。所述标准微珠采用如下方法制备：制备微珠活化液，然后按照每毫升微珠中包含2-18ug人IgG(免疫球蛋白G)的比例加入人IgG，充分混合。三种或三种以上标准微珠中人IgG的含量在2-18ug的范围内均匀的依次递增。例如，当采用3种标准微珠时，人IgG的浓度分别为2-5ug/ml、6-10ug/ml、12-18ug/ml。所述参考微珠采用如下方法制备：制备微珠活化液，然后按照每毫升微珠中包含8-15ug抗人IgG的比例加入抗人IgG，充分混合。所述空白微珠即没有加入任何抗原的微珠活化液。本专利技术可检本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种可检测多种优生优育病原体IgG抗体的检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：(1)分别装有复合微珠悬浮液、荧光标记物、样本稀释液、洗涤液的多个密封试剂瓶，(2)分隔并集中包装这些试剂瓶的试剂盒；微珠是大小均匀的聚苯乙烯微球，用不同的荧光染料对聚苯乙烯微球进行染色并编号，从而获得不同编码的微珠；所述复合微珠悬浮液中包含多种检测微珠、标准微珠、参考微珠和空白微珠，具体为：所述检测微珠是在不同编码的微珠表面分别包被不同的优生优育病原体抗原；所述标准微珠包含至少三种结合了不同浓度梯度人IgG的微珠；所述参考微珠是结合了抗人IgG的微珠；所述空白微珠是未加入任何抗原的微珠。

【技术特征摘要】
1.一种可检测多种优生优育病原体IgG抗体的检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：(1)分别装有复合微珠悬浮液、荧光标记物、样本稀释液、洗涤液的多个密封试剂瓶，(2)分隔并集中包装这些试剂瓶的试剂盒；微珠是大小均匀的聚苯乙烯微球，用不同的荧光染料对聚苯乙烯微球进行染色并编号，从而获得不同编码的微珠；所述复合微珠悬浮液中包含多种检测微珠、标准微珠、参考微珠和空白微珠，具体为：所述检测微珠是在不同编码的微珠表面分别包被不同的优生优育病原体抗原；所述标准微珠包含至少三种结合了不同浓度梯度人IgG的微珠；所述参考微珠是结合了抗人IgG的微珠；所述空白微珠是未加入任何抗原的微珠。2.如权利要求1所述的可检测多种优生优育病原体IgG抗体的检测试剂盒，其特征在于，所述微珠的直径为5-7微米。3.如权利要求1所述的可检测多种优生优育病原体IgG抗体的检测试剂盒，其特征在于，所述优生优育病原体抗原包括：巨细胞抗原、单纯疱疹-1抗原和单纯疱疹-2抗原、风疹抗原、弓形虫抗原。4.如权利要求1所述的可检测多种优生优育病原体IgG抗体的检测试剂盒，其特征在于，所述荧光标记物是藻红蛋白标记的羊抗-人IgG。5.如权利要求1所述的可检测多种优生优育病原体IgG抗体的检测试剂盒，其特征在于，所述样本稀释液中各组分的组成及含量如下：6.如权利要求1所述的可检测多种优生优育病原体IgG抗体的检测试剂盒，其特征在于，试剂盒中所述洗涤液的组分与所述样本稀释液相同，浓度是它的8-10倍。7.如权利要求1所述的可检测多种优生优育病原体IgG抗体的检测试剂盒，其特征在于，还包括装有质控品的试剂瓶，所述质控品包括阳性质控品和阴性质控品，所述阳性...

【专利技术属性】
技术研发人员：宣生良，
申请(专利权)人：一滴准生物科技常州有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32