抑制StAR基因表达的shRNA重组载体构建与应用制造技术

本发明专利技术涉及一种抑制StAR基因表达的干扰性shRNA、重组载体及其制备方法和应用。该抑制StAR基因表达的干扰性shRNA包括依次连接的靶序列、茎环结构、靶序列的互补序列以及终止位点，靶序列如SEQ.ID.NO.1所示，或者，靶序列如SEQ.ID.NO.2所示，或者，靶序列如SEQ.ID.NO.3所示。上述干扰性shRNA能够持续、稳定、高效且特异性地抑制StAR基因表达。

【技术实现步骤摘要】
抑制StAR基因表达的shRNA重组载体构建与应用
本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种抑制StAR基因表达的shRNA重组载体构建与应用。
技术介绍
类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR，SteroidogenicAcuteRegulatoryprotein)，又称类固醇激素灵敏调节蛋白，能够促进胆固醇由线粒体外膜转入到线粒体内膜。StAR在胆固醇的代谢以及类固醇激素的合成中起关键的限速作用。研究表明，StAR在调节睾酮的合成过程中起重要的作用，是维持正常生理功能所必须的一种重要蛋白。传统的StAR基因表达调控技术中，主要间接手段调控StAR基因表达，例如通过加入莱克多巴胺或盐酸克伦特罗来调控大鼠睾丸中StAR的表达，对StAR基因表达调控的特异性较差，且不能稳定且长效地调控StAR基因的表达。一些研究通过RNA干扰(RNAi)在转录水平调控基因表达，以特异抑制基因的表达。RNA干扰(RNAi)是以质粒为载体将siRNA导入细胞内，所形成的siRNA专一作用于靶向基因的细胞系。虽然siRNA表达载体可以在短时间内沉默基因的表达，但其存在干扰效果不够明显，无法实现长效稳定地干扰本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抑制StAR基因表达的干扰性shRNA，其特征在于，包括依次连接的靶序列、茎环结构、所述靶序列的互补序列以及终止位点，其中，所述靶序列如SEQ.ID.NO.1所示，或者，所述靶序列如SEQ.ID.NO.2所示，或者，所述靶序列如SEQ.ID.NO.3所示。

【技术特征摘要】
2018.06.08 CN 201810589769X1.一种抑制StAR基因表达的干扰性shRNA，其特征在于，包括依次连接的靶序列、茎环结构、所述靶序列的互补序列以及终止位点，其中，所述靶序列如SEQ.ID.NO.1所示，或者，所述靶序列如SEQ.ID.NO.2所示，或者，所述靶序列如SEQ.ID.NO.3所示。2.根据权利要求1所述的抑制StAR基因表达的干扰性shRNA，其特征在于，所述干扰性shRNA的正义链如SEQIDNo.4所示，所述干扰性shRNA的反义链如SEQIDNo.5所示；或者，所述干扰性shRNA的正义链如SEQIDNo.6所示，所述干扰性shRNA的反义链如SEQIDNo.7所示；或者，所述干扰性shRNA的正义链如SEQIDNo.8所示，所述干扰性shRNA的反义链如SEQIDNo.9所示。3.一种抑制StAR基因表达的重组载体，其特征在于，包括慢病毒载体及插入在所述慢病毒载体中的干扰性shRNA，所述干扰性shRNA包括依次连接的靶序列、茎环结构、所述靶序列的互补序列以及终止位点，其中，所述靶序列如SEQ.ID.NO.1所示，或者，所述靶序列如SEQ.ID.NO.2所示，或者，所述靶序列如SEQ.ID.NO.3所示。4.根据权利要求3所述的抑制StAR基因表达的重组载体，其特征在于，所述慢病毒载体包括基本序列、抗性基因序列、多克隆位点序列以及启动子序列，所述多克隆位点序列包括BamHI酶切位点和EcoRI酶切位点，所述干扰性shRNA还包括BamHI酶切位点粘性末端和EcoRI酶切位点粘性末端，所述干扰性shRNA正向插入所述多克隆位点的所述BamHI酶切位点和所...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐新云，毛吉炎，毛侃琅，袁建辉，黄海燕，彭鹏，
申请(专利权)人：深圳市疾病预防控制中心深圳市卫生检验中心，深圳市预防医学研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44