美洛西林钠杂质C、D和F的分离制备方法技术

本发明专利技术属于医药技术领域，涉及一种抗生素类药物化合物杂质的精制方法，具体涉及美洛西林钠杂质C、D和F的分离制备方法，本发明专利技术公开的美洛西林钠杂质C、D和F的制备分离方法，包括以下步骤：以美洛西林钠为原料，高温处理制得美洛西林钠杂质C、D和F，经分离纯化分别获得美洛西林钠杂质C、D和F。该技术方案可同步制得三种美洛西林钠的杂质化合物分子，极大地提高产物的合成效率。本发明专利技术的技术方案通过半制备型液相色谱系统，三种杂质的分离度好，获得产品纯度高，分离时间短。

【技术实现步骤摘要】
美洛西林钠杂质C、D和F的分离制备方法
本专利技术涉及一种抗生素类药物化合物杂质的精制方法，具体涉及美洛西林钠杂质C、D和F的分离制备方法，属于医药

技术介绍
美洛西林钠的化学名称为：(2R,5R,6R)-3，3-二甲基-6-[(R)-2[3-(甲黄酰)-2-氧代-1-咪唑烷甲酰氨基]-2-苯乙酰氨基]-7-氧代-4-硫杂-1-氮杂双环[3.2.0]-庚烷-2-甲酸钠盐，其具有下述结构：美洛西林钠是一种半合成青霉素类抗生素，为白色或类白色粉末或结晶；无臭或稍带特异臭，味苦。在临床上对铜假绿单胞菌、大肠埃希菌、肺炎杆菌、变形杆菌、肠杆菌属、枸橼酸杆菌、沙雷菌属、不动杆菌属以及对青霉素敏感的革兰阳性球菌均有抑制作用。美洛西林钠属于β-内酰胺青霉素类抗生素，由于β-内酰胺的不稳定性，导致在合成美洛西林钠的过程中不可避免地生成了多种杂质。药物杂质与药品质量、安全性及效能密切相关，因此，杂质控制在药物合成、开发、检测中的重要性受到越来越多的重视。美洛西林钠杂质C、D和F的化学结构式分别如下所示：在生产美洛西林钠的过程中，需要采用对照品进行杂质C、D和F的对照检测。目前国内尚未有研究机构能够提供高效的美洛西林钠杂质C、D和F的标准物及制备方法，而进口国外市售产品存在费用高昂、手续繁琐、到货周期长等问题。更重要的是，常规的化学合成方法对三种杂质进行分别合成，不仅产率低，过程繁琐，而且在合成过程中极易产生大量副产物，导致市售产品纯度不高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术存在的上述缺陷，提供了一种优化的美洛西林钠杂质C、D和F的制备方法，为美洛西林钠的质量控制和检测提供高纯度对照标准品。本专利技术是采用以下的技术方案实现的：本专利技术提供美洛西林钠杂质C、D和F的分离制备方法，包括以下步骤：以美洛西林钠为原料，高温处理一步制得美洛西林钠杂质C、D和F的混合物，经分离纯化分别获得美洛西林钠杂质C、D和F；所述美洛西林钠的结构如式Ⅰ所示：所述美洛西林钠杂质C的结构如式Ⅱ所示：所述美洛西林钠杂质D的结构如式Ⅲ所示：所述美洛西林钠杂质F的结构如式Ⅳ所示：具体的，上述高温处理温度为50℃-100℃。更进一步，上述高温处理时间0.5h-2.0h。具体步骤为，将式Ⅰ所示化合物溶解于水溶液中，充分溶解后，于50℃-100℃中反应0.5h-2.0h，降至室温，干燥获得美洛西林钠杂质C、D和F的混合物。上述式Ⅰ所示化合物水溶液的浓度为100mg/mL-500mg/mL。本专利技术利用液相色谱纯化上述美洛西林钠杂质C、D和F，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：将高温处理得到的美洛西林钠杂质混合物用水充分溶解，过滤得到供试品溶液；(2)液相色谱纯化：将上述供试品溶液经过半制备型液相色谱进行制备纯化，其中色谱条件为：色谱柱：Shim-packGISTC18；流动相：A为体积百分比0.01％-0.5％有机酸水溶液，B为乙腈；流动相A：流动相B＝70:30-80:20；流速：15-20mL/min；洗脱方式：等度洗脱，流动相A与流动相B保持体积浓度不变，匀速洗脱；检测波长：210nm以及254nm；分别收集3个色谱峰对应的化合物流份，将所得制备溶液干燥，即得到美洛西林钠杂质C、D和F。优选的色谱条件，步骤(2)中等度洗脱流动相体积比例为流动相A：流动相B＝75:25。进一步的，步骤(2)中流动相A为甲酸水溶液、乙酸水溶液、三氟乙酸水溶液。与现有技术相比，本专利技术取得的有益效果是：(1)本专利技术的技术方案为一种操作简单的制备美洛西林钠杂质C、D和F的同步制备方法，摒弃了传统利用小分子原料合成终产物的化学合成路线，极大地提高产物的合成效率。该技术方案不需要添加其他试剂，通过控制温度和时间，可以简单有效的获得较高产率的三种杂质化合物，并且后处理仅需去除水分，操作处理过程安全环保。(2)本专利技术采用半制备型液相色谱，制备分离出的美洛西林钠杂质C、D和F，纯度均高于96％，远高于市售标准对照品的纯度。三种杂质化合物均在可接受的分离度范围内得到分离并表现出良好的峰形，同时单次制备时间少于20min，有效缩短了分离时间。且工艺简单，所涉及的溶剂对环境清洁友好。(3)通过本专利技术获得的高纯度美洛西林钠杂质C、D和F可用于美洛西林钠生产中的杂质定性及定量分析，从而提高美洛西林钠的质量标准，为安全用药提供重要的指导意义。附图说明图1-图3分别是实施例2制备得到的美洛西林钠杂质C、D和F利用半制备型液相色谱仪制备所得产物的HPLC图。图4-图6分别是实施例2制备得到的美洛西林钠杂质C、D和F利用半制备型液相色谱仪制备所得产物的HPLC图。图7-图9分别是实施例6制备得到的美洛西林钠杂质C、D和F利用半制备型液相色谱仪制备所得产物的HPLC图。图10-图13分别是实施例9制备得到的美洛西林钠杂质C、D和F利用半制备型液相色谱仪制备所得产物的HPLC图。图14-图15分别是实施例9制备得到的美洛西林钠杂质C、D和F利用半制备型液相色谱仪制备所得产物的HPLC图。具体实施方式下面通过具体实施例对本专利技术的方法进行说明，但本专利技术并不局限于此。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，均采用分析纯试剂，如无特殊说明，均可从商业途径获得。所得美洛西林钠杂质C、D和F混合物分离处理由岛津LC-20A半制备高效液相色谱仪完成。一、美洛西林钠杂质C、D和F的制备方法实施例1-4将1.0g美洛西林钠溶解于10mL水中，将其置于50℃的恒温水浴中分别保温0.5h、1.0h、1.5h、2.0h后取出，冷却至室温，干燥获得。依据2015年版中国药典测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为缓冲液(取磷酸二氢钾4.9g和磷酸氢二钾0.45g，用水溶解稀释至1000mL):乙腈，按80:20等度洗脱，流速1.0mL/min；柱温30℃，检测波长210nm；杂质C的保留时间15.3min，杂质D的保留时间16.0min，杂质F的保留时间11.2min。实施例1-3获得美洛西林钠杂质C、D和F产率，如表1所示：表1.实施例1-3制得美洛西林钠杂质C、D和F产率实施例1(0.5h)实施例2(1.0h)实施例3(1.5h)实施例4(2.0h)杂质C13％18％18％16％杂质D13％18％17％17％杂质F18％29％27％20％实施例5-8将1.0g美洛西林钠溶解于10mL水中，将其置于80℃的恒温水浴中分别保温0.5h、1.0h、1.5h、2.0h后取出，冷却至室温，干燥获得。实施例5-8获得美洛西林钠杂质C、D和F产率，如表2所示：表2.实施例5-8制得美洛西林钠杂质C、D和F产率实施例5(0.5h)实施例6(1.0h)实施例7(1.5h)实施例8(2.0h)杂质C18％19％18％17％杂质D17％20％18％18％杂质F25％30％28％22％实施例9-12将5.0g美洛西林钠溶解于10mL水中，将其置于100℃的恒温水浴中分别保温0.5h、1.0h、1.5h后取出，冷却至室温，干燥获得。实施例9-12获得美洛西林钠杂质C、D和F产率，如表3所示：表3.实施例9-12制得美洛西林钠杂质C、D和F产率实施例9(0.5h)实施例10(1.0h)实施例11(1.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种美洛西林钠杂质C、D和F的分离制备方法，其特征在于：包括以下步骤：以美洛西林钠为原料，高温处理一步制得美洛西林钠杂质C、D和F的混合物，经分离纯化分别获得美洛西林钠杂质C、D和F；所述美洛西林钠的结构如式Ⅰ所示：

【技术特征摘要】
1.一种美洛西林钠杂质C、D和F的分离制备方法，其特征在于：包括以下步骤：以美洛西林钠为原料，高温处理一步制得美洛西林钠杂质C、D和F的混合物，经分离纯化分别获得美洛西林钠杂质C、D和F；所述美洛西林钠的结构如式Ⅰ所示：所述美洛西林钠杂质C的结构如式Ⅱ所示：所述美洛西林钠杂质D的结构如式Ⅲ所示：所述美洛西林钠杂质F的结构如式Ⅳ所示：2.根据权利要求1所述的分离制备方法，其特征在于：所述高温处理温度为50℃-100℃。3.根据权利要求2所述的分离制备方法，其特征在于：所述高温处理时间0.5h-2.0h。4.根据权利要求3所述的分离制备方法，其特征在于：具体为，将式Ⅰ所示化合物溶解于水溶液中，充分溶解后，于50℃-100℃中反应0.5h-2.0h，降至室温，干燥获得美洛西林钠杂质C、D和F的混合物。5.根据权利要求4所述的分离制备方法，其特征在于：所述式Ⅰ所示化合物水溶液的浓度为100mg/mL-500mg/mL。6.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：苗得足，胡清文，赵征，王志，尹诗，曾丽丽，
申请(专利权)人：瑞阳制药有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37