美洛西林钠杂质A的分离制备方法技术

本发明专利技术属于医药技术领域，涉及一种抗生素类药物化合物杂质的精制方法，具体涉及美洛西林钠杂质A的分离制备方法，本发明专利技术公开的美洛西林钠杂质A的分离制备方法，包括以下步骤：以美洛西林钠为原料，与碱试剂反应制得美洛西林钠杂质A。本发明专利技术的技术方案通过美洛西林钠与碱溶液、酸溶液和无机盐在室温条件下，过滤洗涤干燥获得美洛西林钠杂质A。本发明专利技术还提供了分离纯化美洛西林钠杂质A的精制方法，制得杂质A纯度大于95％，可应用于对照品研究，属于医药领域。

【技术实现步骤摘要】
美洛西林钠杂质A的分离制备方法
本专利技术涉及一种抗生素类药物化合物杂质的精制方法，具体涉及美洛西林钠杂质A的分离制备方法，属于医药

技术介绍
美洛西林钠的化学名称为：(2R,5R,6R)-3，3-二甲基-6-[(R)-2[3-(甲黄酰)-2-氧代-1-咪唑烷甲酰氨基]-2-苯乙酰氨基]-7-氧代-4-硫杂-1-氮杂双环[3.2.0]-庚烷-2-甲酸钠盐，其具有下述结构：美洛西林钠是一种半合成青霉素类抗生素，为白色或类白色粉末或结晶；无臭或稍带特异臭，味苦。在临床上对铜假绿单胞菌、大肠埃希菌、肺炎杆菌、变形杆菌、肠杆菌属、枸橼酸杆菌、沙雷菌属、不动杆菌属以及对青霉素敏感的革兰阳性球菌均有抑制作用。美洛西林钠属于β-内酰胺青霉素类抗生素，由于β-内酰胺的不稳定性，导致在合成美洛西林钠的过程中不可避免地生成了多种杂质。药物杂质与药品质量、安全性及效能密切相关，因此，杂质控制在药物合成、开发、检测中的重要性受到越来越多的重视。美洛西林钠杂质A的化学结构式如下，目前还没有文献记录和公开报道其合成方法：在生产美洛西林钠的过程中，需要采用对照品进行杂质A的对照检测。目前国内尚未有研究机构能够提供高效的美洛西林钠杂质A的标准物及制备方法，而进口国外市售产品存在费用高昂、手续繁琐、到货周期长等问题。而且杂质A合成困难，合成后不稳定易降解，且在合成过程中极易产生大量副产物，收率低，导致市售产品纯度不高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术存在的上述缺陷，提供了优化的美洛西林钠杂质A的制备方法，为美洛西林钠的质量控制和检测提供高纯度对照标准品。本专利技术是采用以下的技术方案实现的：本专利技术提供美洛西林钠杂质A的分离制备方法，包括以下步骤：以美洛西林钠为原料，与碱试剂反应制得美洛西林钠杂质A；所述美洛西林钠的结构如式Ⅰ所示：所述美洛西林钠杂质A的结构如式Ⅱ所示：进一步的，反应结束后，向反应体系中加入酸溶液，调节反应体系的pH值至酸性，再加入无机盐，过滤干燥获得固体。上述碱试剂为氢氧化钾、氢氧化钠和氨中的一种或几种。上述氢氧化钾、氢氧化钠的水溶液浓度为0.1-0.5mol/mL，所述氨的水溶液质量百分浓度为25-28％。上述酸溶液为甲酸、磷酸、醋酸、盐酸及三氟乙酸溶液中的一种或其组合；调节反应体系的pH值为2-5。为促进反应产物脱水，加入盐作为脱水剂。上述盐可采用常见的无机盐，优选为氢氧化钙、氢氧化钠、氯化钙、氯化钠、氯化钾中的一种或几种。脱水结束后，洗涤处理产品，洗涤液为水、乙醇、乙醚、丙酮中的一种或几种，洗涤1-2次，获得美洛西林钠杂质A。洗涤次数过多，会造成杂质A损失，影响杂质A产率。具体的，以式Ⅰ所示化合物为原料，加入到碱试剂的水溶液中，在室温下搅拌后，加入酸溶液，调节溶液pH值为2-5，再加入无机盐，过滤洗涤1-2次，干燥后得到美洛西林钠杂质A。本专利技术中，“室温”指的是环境温度，通常为18℃至35℃，优选22℃至30℃。本专利技术还提供了利用液相色谱纯化上述美洛西林钠杂质A的精制方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：将通过上述步骤制备得到的美洛西林钠杂质A用50％乙腈充分溶解，过滤得到供试品溶液；(2)液相色谱纯化：将上述供试品溶液经过半制备型液相色谱进行制备纯化，其中色谱条件为：色谱柱：Shim-packGISTC18；流动相：A为0.01％-0.5％体积百分比有机酸水溶液，B为乙腈；流动相A：流动相B＝65:35-80:20；流速：15-20mL/min；洗脱方式：等度洗脱，流动相A与流动相B保持体积浓度不变，匀速洗脱；检测波长：210nm以及254nm；收集色谱峰对应的化合物流份，将所得制备溶液干燥，即得到美洛西林钠杂质A精制品。优选的色谱条件，步骤(2)中等度洗脱流动相体积比例为流动相A：流动相B＝75:25。进一步的，步骤(2)中流动相A为甲酸水溶液、乙酸水溶液、三氟乙酸水溶液。与现有技术相比，本专利技术取得的有益效果是：(1)本专利技术的技术方案为一种操作简单的制备美洛西林钠杂质A的精制方法，该技术方案的制备路线短、后处理容易、试剂易得且无污染。(2)本专利技术采用半制备型液相色谱，制备分离出的美洛西林钠杂质A，纯度超过95％，远高于市售标准对照品的纯度。同时单次制备时间少于15min，有效缩短了分离时间，且分离度好，工艺简单，有效避免常规方法导致杂质A降解，产品质量稳定，所涉及的溶剂对环境清洁友好。(3)通过本专利技术获得的高纯度美洛西林钠杂质A可用于美洛西林钠生产中的杂质定性及定量分析，从而提高美洛西林钠的质量标准，为安全用药提供重要的指导意义。附图说明图1是实施例1制备得到的美洛西林钠杂质A利用半制备型液相色谱仪制备所得产物的HPLC图。图2是实施例1制备得到的美洛西林钠杂质A利用半制备型液相色谱仪制备所得产物的HPLC图。图3是实施例2制备得到的美洛西林钠杂质A利用半制备型液相色谱仪制备所得产物的HPLC图。图4是实施例2制备得到的美洛西林钠杂质A利用半制备型液相色谱仪制备所得产物的HPLC图。图5是实施例3制备得到的美洛西林钠杂质A利用半制备型液相色谱仪制备所得产物的HPLC图。图6是实施例4制备得到的美洛西林钠杂质A利用半制备型液相色谱仪制备所得产物的HPLC图。图7是实施例9制备得到的美洛西林钠杂质A利用半制备型液相色谱仪制备所得产物的HPLC图。具体实施方式下面通过具体实施例对本专利技术的方法进行说明，但本专利技术并不局限于此。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，均采用分析纯试剂，如无特殊说明，均可从商业途径获得。氨水为质量百分浓度为25％-28％，购自顺程化工。所得粗提品的进一步纯化处理由岛津LC-20A半制备高效液相色谱仪进行。一、美洛西林钠杂质A的分离制备实施例1在室温下，向2.0g美洛西林钠中，加入0.1mol/mL的氢氧化钾溶液60mL，搅拌30min后，逐滴滴加0.5mol/mL的盐酸溶液，调节溶液的pH值至3，加入20g氯化钙固体搅拌5min后，过滤，用5mL水淋洗一次，再用5mL乙醇淋洗一次，室温干燥后得到1.1g固体。依据2015年版中国药典测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为缓冲液(取磷酸二氢钾4.9g和磷酸氢二钾0.45g，用水溶解稀释至1000mL):乙腈，按体积比80:20等度洗脱，流速1.0mL/min；柱温30℃，检测波长210nm；保留时间11.1min。计算得产率70％。实施例2在室温下，向2.0g美洛西林钠中，加入0.1mol/mL的氢氧化钠溶液60mL，搅拌30min后，逐滴滴加磷酸溶液，调节溶液的pH值至4，加入20g氯化钙固体搅拌5min后，过滤，用5mL水淋洗一次，再用5mL乙醇淋洗一次，室温干燥后得到1.1g固体。计算得产率67％。实施例3在室温下，向2.0g美洛西林钠中，加入氨水60mL，搅拌30min后，逐滴滴加醋酸溶液，调节溶液的pH值至5，再加入15g氯化钾固体搅拌10min后，过滤，用5mL丙酮淋洗两次，室温干燥后得到1.2g固体，产率52％。实施例4在室温下，向2.0g美洛西林钠中，加入0.1mol/mL的氢氧化钾溶液60mL，搅拌40min后，逐滴滴加甲酸溶液，调节溶液的pH值至5，再加入本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种美洛西林钠杂质A的分离制备方法，其特征在于：包括以下步骤：以美洛西林钠为原料，与碱试剂反应制得美洛西林钠杂质A；所述美洛西林钠的结构如式Ⅰ所示：

【技术特征摘要】
1.一种美洛西林钠杂质A的分离制备方法，其特征在于：包括以下步骤：以美洛西林钠为原料，与碱试剂反应制得美洛西林钠杂质A；所述美洛西林钠的结构如式Ⅰ所示：所述美洛西林钠杂质A的结构如式Ⅱ所示：2.根据权利要求1所述的美洛西林钠杂质A的分离制备方法，其特征在于：反应在水中进行，结束后，向反应体系中加入酸溶液，调节反应体系的pH值至酸性，再加入无机盐，过滤干燥获得固体。3.根据权利要求2所述的美洛西林钠杂质A的分离制备方法，其特征在于：所述碱试剂为氢氧化钾、氢氧化钠和氨中的一种或几种。4.根据权利要求3所述的美洛西林钠杂质A的分离制备方法，其特征在于：所述氢氧化钾、氢氧化钠的水溶液浓度为0.1-0.5mol/mL，所述氨的水溶液质量百分浓度为25％-28％。5.根据权利要求2所述的美洛西林钠杂质A的分离制备方法，其特征在于：所述酸溶液为甲酸、磷酸、醋酸、盐酸及三氟乙酸溶液中的一种或其组合；调节反应体系的pH值为2-5。6.根据权利要求2所述的美洛西林钠杂质A的分离制备方法，其特征在于：所述无机盐为氢氧化钙、氢氧化钠、氯化钙、氯化钠、氯化钾中的一种或几种。7.根据权利要求2所述的美洛西林钠杂质A...

【专利技术属性】
技术研发人员：苗得足，胡清文，赵征，王志，尹诗，曾丽丽，
申请(专利权)人：瑞阳制药有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37