【技术实现步骤摘要】
一种液相芯片技术检测微生物的方法
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种液相芯片技术检测微生物的方法。
技术介绍
液相芯片技术(xMAP)是二十一世纪初诞生的后基因组时代产品的杰出代表，液相芯片技术平台是既能保证信息质量，又能提供相对高通量的新一代分子诊断技术平台,整合了生物检测，乳胶微球荧光编码，微液体传送系统，激光实时记录，先进电脑软件和数据处理模式等多种先进技术。该技术具有高通量、集成化、试剂和样品消耗少的优势，可以同时检测大量样品的多个指标，检测效率提高了若干倍，使得检测的人力成本直接下降，具有操作简单，花费较低，重复性好，杂交动力学快，微阵列应用灵活等优点，为高通量分子诊断提供了良好平台。现已开发出肿瘤标志物、过敏源筛查、自身免疫病、细胞因子等诊断微球，并且2001年被美国FDA批准用于临床进行自身免疫病、人类白细胞抗原分型的诊断，这也是唯一被美国FDA批准用于临床诊断的生物芯片，它的开发以及应用被认为是生物芯片领域发展的一个重要进展。目前，液相芯片以其高通量、检测灵敏度高、重复性好等优点，以及检测动态范围宽等优势已被广泛应用于各研究领域。国内研究应用...
【技术保护点】
1.一种液相芯片技术检测微生物的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，根据布鲁氏菌、沙门氏菌、狂犬病毒、弓形虫、巴氏通体和弯曲杆菌的基因序列分别设计合成对应的具有5’端修饰有氨基的SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列的布鲁氏菌探针、具有5’端修饰有氨基的SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列的沙门氏菌探针、具有5’端修饰有氨基的SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列的狂犬病毒探针、具有5’端修饰有氨基的SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列的弓形虫探针、具有5’端修饰有氨基的SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列的巴氏通体探针和具有5’端修饰有氨基的SEQ ID NO.6...
【技术特征摘要】
1.一种液相芯片技术检测微生物的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，根据布鲁氏菌、沙门氏菌、狂犬病毒、弓形虫、巴氏通体和弯曲杆菌的基因序列分别设计合成对应的具有5’端修饰有氨基的SEQIDNO.1所示的核苷酸序列的布鲁氏菌探针、具有5’端修饰有氨基的SEQIDNO.2所示的核苷酸序列的沙门氏菌探针、具有5’端修饰有氨基的SEQIDNO.3所示的核苷酸序列的狂犬病毒探针、具有5’端修饰有氨基的SEQIDNO.4所示的核苷酸序列的弓形虫探针、具有5’端修饰有氨基的SEQIDNO.5所示的核苷酸序列的巴氏通体探针和具有5’端修饰有氨基的SEQIDNO.6所示的核苷酸序列的弯曲杆菌探针；S2，将布鲁氏菌探针、沙门氏菌探针、狂犬病毒探针、弓形虫探针、巴氏通体探针和弯曲杆菌探针分别与第一、第二、第三、第四、第五和第六荧光编码微球相连，分别获得第一、第二、第三、第四、第五和第六偶联微球的探针溶液；S3，将布鲁氏菌、沙门氏菌、狂犬病毒、弓形虫、巴氏通体和弯曲杆菌阴性样品，经DNA抽提和PCR扩增获得阴性PCR产物，将第一、第二、第三、第四、第五和第六偶联微球的探针溶液混合形成混合偶联微球的探针溶液，然后将阴性PCR产物加入混合偶联微球的探针溶液，在Luminex仪器中读取信号，根据该信号得阈值；S4，将待测物样品，经DNA抽提和PCR扩增获得待测PCR产物，将待测PCR产物加入混合偶联微球的探针溶液，在Luminex仪器中读取信号，与阈值比较，判断待测物样品为阴性或阳性。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述布鲁氏菌探针、沙门氏菌探针、狂犬病毒探针、弓形虫探针、巴氏通体探针和弯曲杆菌探针的Tm值保持在56℃-58℃。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，获得待测PCR产物具体方法包括如下步骤：P1，在布鲁氏菌探针、沙门氏菌探针、狂犬病毒探针、弓形虫探针、巴氏通体探针和弯曲杆菌探针的上下游分别设计上下游引物，获得布鲁氏菌引物、沙门氏...
【专利技术属性】
技术研发人员：王艳，张磊萍，蒋蔚，
申请(专利权)人：上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：上海,31
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