【技术实现步骤摘要】
尼帕病毒检测试剂盒及其专用引物
本专利技术属于生物
中病毒的分子生物学检测方法，特别是涉及尼帕病毒的逆转录-环介导的等温核酸扩增(RT-LAMP)检测专用引物、包含该引物的检测试剂盒、及该引物和检测试剂盒在尼帕病毒检测中的应用。
技术介绍
尼帕病毒(Nipahvirus，NiV)属于副黏病毒科(Paramyxoviridae)、亨尼帕病毒属(Henipavirus)，因其相对较新发现并且高致病性被列为生物安全四级(Biosafetylevel4，BSL-4)病毒，能引起人类急性严重呼吸道疾病和脑炎，致死率为40％-70％。尼帕病毒为单股负链RNA病毒，其N基因高度保守，常被用于尼帕病毒的RT-PCR诊断。尼帕病毒有2个典型的基因型：基因型M(马来西亚分离株和部分泰国分离株)和基因型B(孟加拉分离株和部分泰国分离株)，两者基因组的相似性为91.8％，各基因仅在5’和3’端的非编码区的相似性略低，且除马来西亚株的V蛋白存在3个氨基酸的缺失外，病毒其它蛋白氨基酸长度均相同。狐蝠科的果蝠是尼帕病毒的天然宿主，该病毒能感染猪、马和人，被感染者出现发热、全身症状、脑炎、...
【技术保护点】
1.一种引物，用于对尼帕病毒进行RT‑LAMP检测或对尼帕病毒基因组cDNA进行LAMP检测，其特征在于，其根据尼帕病毒特异性的保守靶序列设计，所述尼帕病毒特异性的保守靶序列如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示。
【技术特征摘要】
1.一种引物，用于对尼帕病毒进行RT-LAMP检测或对尼帕病毒基因组cDNA进行LAMP检测，其特征在于，其根据尼帕病毒特异性的保守靶序列设计，所述尼帕病毒特异性的保守靶序列如SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和SEQIDNO：3所示。2.根据权利要求1所述的引物，其特征在于：所述六条引物的核苷酸序列分别如SEQIDNO：4、SEQIDNO：5、SEQIDNO：6、SEQIDNO：7、SEQIDNO：8和SEQIDNO：9所示。3.一种检测试剂盒，用于对尼帕病毒进行RT-LAMP检测或对尼帕病毒基因组cDNA进行LAMP检测，其包含权利要求1或2所述的引物。4.根据权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包含以下用于25μl检测体系的试剂：20.0mMTris-HCl，10.0mMKCl，8.0mMMgSO4，10.0mM(NH4)2SO4，0.1％TritonX-100，0.8mM甜菜碱，dNTP每种1.4mM，8UBstDNA聚合酶，模板为RNA时添加7.5UWarmStartRTx逆转录酶，引物加入量为：SEQIDNO：4和SEQIDNO：5所示引物各4pmol，SEQIDNO：6和SEQIDNO：7所示引物各32pmol，SEQIDNO：8和SEQIDNO：9所示引物各15pmol。5.权利要求1或2所述的引物或权利要求3或4所述的检测试剂盒在制备尼帕病毒的RT-LAMP检测试剂或尼帕病毒基因组cDNA的LAMP检测试剂中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，所述试剂用于尼帕病毒的RT-LAMP检测中，检测方法包括以下步...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘翟，陈全姣，马莉萍，
申请(专利权)人：中国科学院武汉病毒研究所，
类型：发明
国别省市：湖北,42
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