【技术实现步骤摘要】
一种转基因抗环斑病毒番木瓜YK16-0-1及其衍生品高效定性定量鉴定方法
本专利技术属于分子生物学
，涉及一种转基因抗环斑病毒番木瓜YK16-0-1及其衍生品高效定性PCR及实时荧光PCR的鉴定方法。
技术介绍
转基因技术已成为现代农业史上采用最为迅速的生物技术，是新农业科技革命的强大动力，其蓬勃发展的趋势不可逆转。但转基因植物种植面积的日益增长一直伴随着全球公众对于转基因植物及其产品安全性的关注和忧虑，加强转基因技术管理是全球的共识，目前全球已有50多个国家和地区颁布实施了转基因生物标识制度。本方法是关于转基因番木瓜种的鉴定方法。在番木瓜种植过程中，环斑病毒病(PapayaRingspotVirus，PRSV)一直是威胁番木瓜种植业发展的最严重的毁灭性病害之一，从而限制了番木瓜产业的发展。已有科研单位研发的抗环斑病毒转基因番木瓜YK16-0-1品系抗环斑病毒病效果明显，具有广泛的应用前景；转基因番木瓜YK16-0-1及其衍生品系中白，在海南等番木瓜主产区得以广泛的种植。迄今为止，我国尚未发布专门针对转基因抗环斑病毒番木瓜YK16-0-1及其衍生品种检测的标...
【技术保护点】
1.一种转基因抗环斑病毒番木瓜YK16‑0‑1及其衍生品高效定性定量鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取样品的DNA作为扩增模板；(2)加入转基因基番木瓜YK16‑0‑1品系特异性实时荧光检测引物；同时与反应液及耐热聚合酶混合形成扩增反应体系；扩增反应体系为：定量试剂10uL，Premix ExTag，检测引物各10Um，充分混匀，置于PCR仪上进行实时PCR分析；PCR产物进行2％的凝胶电泳分析，以是否扩增出目的DNA条带为依据，以检验样品DNA中是否含有转基因目的成分；本检验用于定性分析；(3)加入转基因基番木瓜YK16‑0‑1品系特异性实时荧光检测引物和转基...
【技术特征摘要】
1.一种转基因抗环斑病毒番木瓜YK16-0-1及其衍生品高效定性定量鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取样品的DNA作为扩增模板；(2)加入转基因基番木瓜YK16-0-1品系特异性实时荧光检测引物；同时与反应液及耐热聚合酶混合形成扩增反应体系；扩增反应体系为：定量试剂10uL，PremixExTag，检测引物各10Um，充分混匀，置于PCR仪上进行实时PCR分析；PCR产物进行2％的凝胶电泳分析，以是否扩增出目的DNA条带为依据，以检验样品DNA中是否含有转基因目的成分；本检验用于定性分析；(3)加入转基因基番木瓜YK16-0-1品系特异性实时荧光检测引物和转基因基番木瓜YK16-0-1品系特异性实时荧光检测探针；同时与实时荧光定量反应液及耐热聚合酶混合形成扩增反应体系；扩增反应体系为：定量试剂10uL，PremixExTag，检测引物与探针各10Um，充分混匀，置于定量PCR仪上进行实时荧光定量PCR分析；各扩增反应体系在荧光定量PCR仪上进行实时荧光反应,反应结束后，根据扩增曲线判断样品中是否含有转基因成分，同时，根据荧光信号分析定量分析占转基因成分在所有DNA样品中的占比；(4)通过普通PCR检验方法，对转基因基番木瓜YK16-0-1品系进行基本定性PCR分析与检测；通过定量PCR方法，对转基因基番木瓜YK16-0-1品系进行定量分析与检测。2.根据权利要求1所述的转基因抗环斑病毒番木瓜YK16...
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