【技术实现步骤摘要】
一种用于细菌耐药性检测的微流控芯片及其制备方法
本专利技术涉及生物芯片和细菌检测
，尤其涉及一种用于细菌耐药性检测的微流控芯片及其制备方法，以及其在生物医学中的应用。
技术介绍
细菌耐药性又称抗药性，系指细菌对于抗菌药物作用的耐受性，耐药性一旦产生，药物的治疗作用就明显下降。耐碳青霉烯类抗生素肠杆菌科细菌，是一类极易产生强耐药性的细菌，包括大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌等菌种。其菌株可产生一类β内酰胺酶——碳青霉烯酶，碳青霉烯酶可以水解碳青霉烯类抗生素分子中的β内酰胺环，进而使其失去抗菌活性。目前已证实，通过碳青霉烯酶水解药物介导菌株耐药是细菌对碳青霉烯耐药的主要机制之一。2015年CLSI药敏试验标准引入的CarbaNP试验根据这一原理，通过碳青霉烯酶可以水解亚胺培南分子中的β内酰胺环使其氢键断裂，释放质子，导致反应液pH值降低使指示剂发生颜色的改变来指示细菌是否耐药。CardaNP方法可以很好的将碳青霉烯酶介导的耐药机制同其他机制区分开，具有较高的特异性，此外还有重复性好、费用低等特点。然而，在使用过程中CarbaNP试验也暴露出了以下不足：(1)...
【技术保护点】
1.一种用于细菌耐药性检测的微流控芯片，其特征在于所述微流控芯片由实验区域、微流阀、微流阀蠕动泵和样品输入区构成，其中：所述微流控芯片包含12‑30个相互独立的实验区域，所述实验区域成矩阵式排列，每个实验区域均由集成于芯片的微流阀独立于其他区域进行单独控制；上述每个实验区域包含64个相互连通的微米尺度的试验腔体，在样品输送过程中，利用层流分流特性，一次性产生16种不同的测试样品浓度，每种测试样品浓度并行有4个同样条件的重复测试，以实现高通量样品浓度测试的目的；所述样品输入区由与所述实验区域数目相同的样品输入口构成，每个样品输入口均由集成于芯片的微流阀单独控制；在所述实验区域...
【技术特征摘要】
1.一种用于细菌耐药性检测的微流控芯片，其特征在于所述微流控芯片由实验区域、微流阀、微流阀蠕动泵和样品输入区构成，其中：所述微流控芯片包含12-30个相互独立的实验区域，所述实验区域成矩阵式排列，每个实验区域均由集成于芯片的微流阀独立于其他区域进行单独控制；上述每个实验区域包含64个相互连通的微米尺度的试验腔体，在样品输送过程中，利用层流分流特性，一次性产生16种不同的测试样品浓度，每种测试样品浓度并行有4个同样条件的重复测试，以实现高通量样品浓度测试的目的；所述样品输入区由与所述实验区域数目相同的样品输入口构成，每个样品输入口均由集成于芯片的微流阀单独控制；在所述实验区域和所述样品输入区之间由至少一个微流阀蠕动泵连接，通过程序设定顺序开关三个微流阀，以实现纳升精度样品的定点定时输送。2.如权利要求1所述的用于细菌耐药性检测的微流控芯片，其中所述微流控芯片包含20个相互独立的实验区域。3.如权利要求1所述的用于细菌耐药性检测的微流控芯片，其中所述细菌为耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌。4.如权利要求3所述的用于细菌耐药性检测的微流控芯片，其中所述耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌、变形菌、弗氏柠檬酸菌、产酸克雷伯菌、摩氏摩根菌、普罗威登菌。5.如权利要求1所述的用于细菌耐药性检测的微流控芯片的制备方法，包括下述步骤：(1)将表面带有微米结构的流动层硅基底和控制层硅基底放置于密封盒内，取500μl三甲基氯硅烷溶液在室温下对上述流动层硅基底和控制层硅基底进行表面处理10-20分钟；(2)配制聚二甲基硅烷混合溶液：将聚二甲基硅烷原溶液与固化剂按照10﹕1的质量比混合，在混合机内以2000rpm的转速混胶1分钟，然后以2200rpm的转速去气2分钟；(3)流动层的制备：取50g上述聚二甲基硅烷混合溶液浸没经表面处理的流动层硅基底，并置于真空箱内进行至少1小时的去气处理，直到所述流动...
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