新型韩国国内猪繁殖与呼吸综合征病毒制造技术

本发明专利技术涉及猪繁殖与呼吸综合征病毒、疫苗组合物、试剂盒及其应用。本发明专利技术涉及作为在韩国国内进行分离的韩国国内猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒的JW‑PRRSV(KCTC12096BP)、利用上述韩国国内猪繁殖与呼吸综合征病毒的疫苗组合物及猪繁殖与呼吸综合征的预防方法。本发明专利技术的登录号为KCTC12096BP的韩国国内猪繁殖与呼吸综合征病毒作为区别于北美及欧洲的韩国国内猪繁殖与呼吸综合征病毒，具有可针对韩国国内猪繁殖与呼吸综合征生产特殊的疫苗组合物来预防韩国国内猪繁殖与呼吸综合征或以特殊方式诊断出是否感染韩国国内猪繁殖与呼吸综合征病毒的效果。

【技术实现步骤摘要】
新型韩国国内猪繁殖与呼吸综合征病毒本申请是申请日为2014年2月3日专利技术名称为“新型韩国国内猪繁殖与呼吸综合征病毒”的申请号为201480017256.1的专利技术专利申请的分案申请。
本专利技术涉及韩国国内猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV，porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus)、利用上述韩国国内猪繁殖与呼吸综合征病毒的疫苗组合物及猪繁殖与呼吸综合征的预防方法。
技术介绍
自1987年起，以美国的养猪地区为中心，开始传播原因不明的新型的猪疾病，该疾病复合性地表现为繁殖障碍和呼吸感染，并在1988年和1989年的夏天暴增。由于出现得突然，该疾病给美国养猪业带来重大损失，初期被称为猪神秘病，此后，随着分离原因病毒，并陆续进行相关的临床症状、病原性等研究，根据与繁殖障碍和呼吸感染一同呈现出的临床症状，当前在国际上被命名为猪繁殖与呼吸综合征(PRRS，PorcineReproductiveandRespiratorySyndrome)。在韩国国内虽然没有与该疾病类似的症状的流行报告，然而从1992年开始，对该疾病进行了研究并确立了诊断方法，而且对韩国国内养猪场进行流行病学研究，确认出韩国国内也流入该疾病，并在韩国国内被感染的农场对原因病毒进行了分离。在亚洲地区，除了韩国国内之外，还有日本和台湾也有报告指出确认发生原因病毒的分离。在出现疾病发生报告之后，由于不知其准确原因，使养猪业更陷入混乱，在1991年6月，荷兰中央兽医研究所的Wensvoort博士第一次利用猪肺泡巨噬细胞分离了原因病毒。该病毒取自荷兰中央兽医研究所所在的地名，被命名为莱利斯塔德(Lelystad)病毒，紧接着包括美国在内的许多国家也分离出了原因病毒，并调查其特点和病原性，结果发现以前在美国和欧洲发生过的复合性地引起繁殖障碍和呼吸感染的新型猪疾病都是由该病毒引起的。猪繁殖与呼吸综合征病毒在欧洲经常被称为莱利斯塔德病毒，在美国则被称为SIRS病毒，猪繁殖与呼吸综合征病毒为具有外膜且直径为45～80nm的小球形病毒，在其表面突出有小突起。基因所在的部位中有直径为25～35nm的单链核糖核酸(RNA)基因。因耐外部环境的能力不太强，在5以下或7以上的酸度环境下，病毒感染效价减少90％以上，若在37℃下经过10～24小时、在20℃下经过6天左右，则感染效价减少10倍以上。当感染该病毒时，引起疾病的程度有很多种，其中有仅仅通过血清检测就可以判断感染程度且没有临床症状及经济损失的情况，也有给农场的生产带来20％左右的损失的严重程度的情况。从病名也可知，繁殖障碍和呼吸疾病复合性地出现。由猪繁殖与呼吸综合征病毒感染引起的繁殖障碍的特征在于，主要集中于妊辰107天至113天之间的妊辰末期流产、早分娩产胎儿、死产、木乃伊仔猪的发生、仔猪的断奶前死亡率激增、断奶后死亡率激增、发情周期的延迟等，这些症状主要集中于被感染的母猪和从其母猪出生的仔猪。众所周知，由猪繁殖与呼吸综合征病毒感染引起的繁殖障碍大部分从感染初期经过6个月左右恢复感染前的状态。由猪繁殖与呼吸综合征病毒感染引起的呼吸疾病可以出现在整个日龄，尤其集中出现在哺乳仔猪和断奶仔猪。在这种情况下，可以观察到急促的腹式呼吸、眼睑浮肿、结膜炎、喷嚏、腹泻等，还可出现短期间的体温上升或罕见地出现神经症状。呼吸疾病的特征在于，与猪繁殖与呼吸综合征病毒单独感染的情况相比，细菌性、病毒性病原体的二次感染及复合感染的情况为多，且这种情况的病原性更加增幅。此外，还有在耳朵、腹部、外阴部等部位出现蓝色斑点的情况，因此在英国还被称为蓝耳病(Blueeardisease)。以上的临床症状均为可在急性症状严重发展的情况下清楚地观察到的症状，准临床型感染或慢性的情况下几乎观察不到清楚且有特征的临床症状。慢性感染主要在断奶仔猪和育肥期中发生，在受到猪繁殖与呼吸综合征病毒攻击的呼吸系统中，被细菌及病毒感染后引起鼻炎和肺炎。结果，每天的平均体重增加量降低、饲料需求率进而增加，断奶后死亡率与感染猪繁殖与呼吸综合征病毒前的平均死亡率相比增加2倍。染上猪繁殖与呼吸综合征病毒呼吸疾病的肺在病理学上的所见表现为特征性的间质性肺炎。当前，猪繁殖与呼吸综合征病毒被分为在欧洲最初分离的莱利斯塔德病毒(Wensvoortetal.，1991)、在北美州分离的VR-2332[0004]病毒(Benfieldetal.，1992)，欧洲株(Europeanstrain)和北美株(NorthAmericanstrain)的原形(prototype)，它们之间的碱基序列同源性约为55～70％左右且相当低(GagnonandDea，1998；Kwangetal.，1994；Murtaughetal.，1995)。如今猪繁殖与呼吸综合征病毒与马动脉炎病毒(EAV，equinearteritisvirus)、乳酸脱氢酶升高病毒(LDV，lactatedehydrogenase-elevatingvirus)、猴出血热病毒(SHFV，simianhemorrhagicfevervirus)一同属于巢状病毒目(orderNidovirales)、动脉炎病毒科(familyArteriviridae)(Cavanagh，1997)。猪繁殖与呼吸综合征病毒为具有磷脂质的很小的包膜病毒(envelopedvirus)，正多面体形状的核衣壳内具有约15kb左右的阳性极性的单链核糖核酸基因组(Collinsetal.，1992)。复制酶(replicase)为非结构蛋白质，其包含病毒的自体复制所需的酵素，对上述复制酶进行编码的基因从基因组核糖核酸的5'-末端约占80％，并且由开放阅读框ORF1a和ORF1b组成，上述ORF1a和ORF1b具有从基因组核糖核酸发现的相互重叠的部位。有报告指出，其中的ORF1b由核糖体移码机能(ribosomalframeshift)表达(Brierleyetal.，1989)。病毒的结构蛋白质从基因组核糖核酸的3'-末端约占20％，从ORF2a、ORF2b的ORF7的7个基因中表达。ORF2、ORF3及ORF4分别形成作为GP2，GP3及GP4糖化的膜蛋白质，ORF5生成猪繁殖与呼吸综合征病毒的中和力起到最重要的作用的糖蛋白质GP5包膜蛋白，ORF6生成基质(M，matrix)，ORF7生成核壳体(N，nucleocapside)(Meulenbergetal.，1995；Bastosetal.，2004)。这些都从被感染细胞内的单顺反子基因组(monocistronicsubgenomic)m核糖核酸的5'-末端中表达(Meulenbergetal.，1993；Snyderetal.，1999)。对猪繁殖与呼吸综合征病毒的结构蛋白质及包含非结构蛋白质的大部分蛋白质的功能及分子生物学特性相关研究结果还处于渺茫的状态。若猪感染猪繁殖与呼吸综合征病毒，则表现出临床症状为严重的繁殖障碍和呼吸障碍。尽管证明不了猪繁殖与呼吸综合征病毒的北美株和欧洲株在疾病症状上的明确差异，然而它们不管从抗原性，还是从遗传性都具有显著的差异(Allendeetal.，1999；Halburetal.，1995；Woo本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种韩国国内猪繁殖与呼吸综合征病毒，其特征在于，登录号为KCTC12096BP。

【技术特征摘要】
2013.03.20 KR 10-2013-00298911.一种韩国国内猪繁殖与呼吸综合征病毒，其特征在于，登录号为KCTC12096BP。2.一种疫苗组合物，其特征在于，包含登录号为KCTC12096BP的韩国国内猪繁殖与呼吸综合征病毒为有效成分。3.根据权利要求2所述的疫苗组合物，其特征在于，上述韩国国内猪繁殖与呼吸综合征病毒为通过3次至120次的传代培养来获得的病毒。4.根据权利要求2所述的疫苗组合物，其特征在于，上述疫苗组合物还包含佐剂、赋形剂或载体。5.根据权利要求2所述的疫苗组合物，其特征在于，上述疫苗组合物还包含保护剂。6.根据权利要求5所述的疫苗组合物，其特征在于，上述保护剂为海藻糖。7.一种猪繁殖与呼吸综合征的预防方法，其特征在于，包括向猪投用权利要求2至6中任一项所述的疫苗组合物的步骤。8.根据权利要求7所述的猪繁殖与呼吸综合征的预防方法，其特征在于，上述疫苗...

【专利技术属性】
技术研发人员：金贤一，申城浩，韩范久，
申请(专利权)人：致优制药有限公司，
类型：发明
国别省市：韩国,KR