【技术实现步骤摘要】
人副流感I型病毒大规模培养的方法
本专利技术涉及病毒的培养方法,尤其是涉及一种人副流感I型病毒大规模培养的方法。
技术介绍
人类副流感病毒(HPIVs)是引起儿童下呼吸道感染的一种病毒,其致病性仅次于呼吸道合胞病毒(RSV)。与RSV一样,人类副流感病毒可以造成反复发作的上呼吸道感染(如感冒和喉咙痛),同时它也能造成严重的反复感染的下呼吸道疾病(如肺炎,支气管炎和细支气管炎),特别是在老年人和有免疫缺陷人群中,其发病率更高。人类副流感I型病毒是单链的RNA病毒。病毒表面含有溶合酶和红血球凝聚素—神经氨酸苷酶的醣蛋白刺。从血清学上人类副流感病毒可分为I型、Ⅱ型、Ⅲ型、IV型,其中IV型又分a和b两个亚型。这些病毒颗粒大小不一(平均直径大小在150纳米~300纳米之间),形态各异。目前为止,对于人类副流感I型病毒引起的呼吸道感染还没有特效药物,也没有制造出疫苗。而制造疫苗,就需要大规模培养人类副流感I型病毒。传统的培养方法是:细胞经逐级传代扩增,得到病毒接种后,经10~14天培养,然后再进行单批次收获。因人类副流感I型病毒病变不明显,产毒慢,培养周期长,成本高,严重影响了对人类副流感I型病毒疫苗的进一步研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种操作简单,能对人副流感I型病毒进行大规模培养的方法,以满足对人副流感I型病毒疫苗的研究和制造需求。为实现上述目的,本专利技术可采取下述技术方案:本专利技术所述的人副流感I型病毒大规模培养的方法包括下述步骤:第一步,将人副流感I型病毒按0.001~0.01MOI接种于长满单层的Vero细胞上,然后于37℃、5%CO2培 ...
【技术保护点】
1.一种人副流感I型病毒大规模培养的方法,其特征在于:包括下述步骤:第一步,将人副流感I型病毒按0.001~0.01MOI接种于长满单层的Vero细胞上,然后于37℃、5%CO2培养;第二步,接种后,每天采用ELISA法检测上清中病毒效价,绘制病毒增殖曲线;第三步,培养至第7天,收取病毒培养上清,使用胰酶消化液消化细胞,按1:4‑5进行带毒细胞的传代扩增,然后于37℃、5%CO2培养;第四步,重复第二步收取病毒液,重新添加病毒培养液,或重复第三步进行带毒细胞的传代扩增至所需规模。
【技术特征摘要】
1.一种人副流感I型病毒大规模培养的方法,其特征在于:包括下述步骤:第一步,将人副流感I型病毒按0.001~0.01MOI接种于长满单层的Vero细胞上,然后于37℃、5%CO2培养;第二步,接种后,每天采用ELISA法检测上清中病毒效价,绘...
【专利技术属性】
技术研发人员:周伟伟,周雷鸣,孙静静,赵巧辉,李桂林,付光宇,吴学炜,
申请(专利权)人:郑州伊美诺生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:河南,41
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