猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株实时荧光鉴别及定量测定方法技术

技术编号:2621064 阅读:238 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株实时荧光鉴别及定量测定方法,通过处理待检样品,制取样品的RNA,反转录得到样品的cDNA、分别设计引物对样品cDNA进行PCR反应,扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒的非缺失变异株与缺失变异株、将PCR扩增体系放入到荧光PCR检测仪中,设置循环条件,在每次循环的延伸时收集荧光信号,循环结束后根据收集的扩增曲线和Ct值判断结果等步骤实现所述病毒鉴别及定量测定。本发明专利技术确定了猪繁殖与呼吸综合症病毒缺失变异株与非缺失变异株的荧光定量鉴别诊断方法并能准确定量病毒在机体组织内的感染量。本发明专利技术操作简单,检测结果准确。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于检测
,具体涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病 毒变异株实时荧光鉴别及定量测定方法。
技术介绍
猪繁殖与呼吸综合征又称猪蓝耳病,是由动脉炎病毒科中的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的,由国外传入我国,是一种严 重影响养猪业的传染病,以繁殖障碍、呼吸困难、耳朵蓝紫、并发其 他传染病为主要特征,猪蓝耳病常继发猪瘟、附红细胞体等病,如果 治疗不及时,猪只死亡率较高,加之目前尚无特效治疗药物,因此, 做好猪繁殖与呼吸综合征的预防十分必要,而猪繁殖与呼吸综合征病 毒变异株的实时鉴别及测定对猪繁殖与呼吸综合征的预防和治疗十 分重要。目前对猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株的研究主要集中于诊断监 测,例如公开号为CN101063173的专利申请公开了一种猪繁殖与呼吸 综合征病毒超强变异株RT-PCR试剂盒,对猪繁殖与呼吸综合征病毒 超强变异株进行诊断监测,但未见猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株实 时荧光鉴别及定量测定方法的相关技术报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足,提供一种猪繁殖与呼吸综 合征病毒变异株实时荧光鉴别及定量测定方法。本专利技术的目的通过以下技术方本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株实时荧光鉴别及定量测定方法,包括以下步骤: (1)处理待检样品,制取样品的RNA,反转录得到样品的cDNA; (2)分别设计引物对样品cDNA进行PCR反应,扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒的非缺失变异株与缺失变异株; (3)将PCR扩增体系放入到荧光PCR检测仪中,设置循环条件,在每次循环的延伸时收集荧光信号,循环结束后根据收集的扩增曲线和Ct值判断结果。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张桂红孔留五罗玉均何逸民
申请(专利权)人:华南农业大学
类型:发明
国别省市:81[中国|广州]

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