一种犬松弛素免疫荧光微球快速检测试剂卡制造技术

本实用新型专利技术公开了一种犬松弛素免疫荧光微球快速检测试剂卡，包括一个位于底层的底板，所述底板上表面的右端设置有吸水纸，所述底板上表面中间位置设置有硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜上从左往右分别包被有测试线和控制线；所述吸水纸的左端与硝酸纤维素膜的右端相连，所述底板上表面还设置有荧光微球结合垫；所述荧光微球结合垫位于硝酸纤维素膜的左侧，所述硝酸纤维素膜的左端与荧光微球结合垫的右端相连；所述底板上表面的左端设置有样品垫，样品垫的右端与荧光微球结合垫的左端相连。本实用新型专利技术犬松弛素免疫荧光微球快速检测试剂卡操作快速简便，成本低且不需要使用大型检测仪器，具有灵敏度高，假阳率低的优点。

A Kit for Rapid Detection of Canine Relaxant by Immunofluorescent Microspheres

The utility model discloses a canine relaxin immunofluorescent microsphere rapid detection reagent card, which comprises a bottom plate, a water absorbent paper is arranged at the right end of the bottom plate, a nitrocellulose membrane is arranged at the middle position of the bottom plate surface, and a test line and control are respectively coated on the nitrocellulose membrane from left to right. The left end of the absorbent paper is connected with the right end of the nitrocellulose membrane, and a fluorescent microsphere binding pad is arranged on the surface of the bottom plate; the fluorescent microsphere binding pad is located on the left side of the nitrocellulose membrane, and the left end of the nitrocellulose membrane is connected with the right end of the fluorescent microsphere binding pad; and the left end of the surface of the bottom plate is connected with the right end of the fluorescent A sample pad is arranged, and the right end of the sample pad is connected with the left end of the fluorescent microsphere bonding pad. The canine relaxin immunofluorescent microsphere rapid detection reagent card of the utility model has the advantages of fast and simple operation, low cost and no need to use large-scale detection instruments, high sensitivity and low false positive rate.

【技术实现步骤摘要】
一种犬松弛素免疫荧光微球快速检测试剂卡
本技术涉及一种试剂卡，具体是一种犬松弛素免疫荧光微球快速检测试剂卡。
技术介绍
Hisaw及其合作者在1926年首次发现，来自母猪黄体的一种因子在雌激素联合作用下可引起豚鼠耻骨松弛，并证明它是一种低分子量的多肽激素。松弛素在多种雌性哺乳动物（如猪、豚鼠、大鼠、小鼠、兔、羊、牛、马）和妇女体内都有存在。目前，研究发现松弛素对妊娠期长短、产仔存活率都有影响。随着对松弛素研究的不断深入，人们更多的注意到它的临床价值，这对医学和兽医学的发展无疑是有意义的。目前，动物体内的松弛素检测一般采用采用ELISA、金标等方法。ELISA具有灵敏度高，特异性强且能定量的优点，但是ELISA需要复杂的设备及操作，耗时较长，不适用于快速诊断；金标免疫层析法具有快速简便的特点，但其灵敏度偏低，假阳率高的缺点在实际检测过程中会出发生漏检。
技术实现思路
本技术的目的在于提供一种犬松弛素免疫荧光微球快速检测试剂卡，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的，本技术提供如下技术方案：一种犬松弛素免疫荧光微球快速检测试剂卡，包括一个位于底层的底板，所述底板上表面的右端设置有吸水纸，所述底板上表面中间位置设置有硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜上从左往右分别包被有测试线和控制线；所述吸水纸的左端与硝酸纤维素膜的右端相连，所述底板上表面还设置有荧光微球结合垫；所述荧光微球结合垫位于硝酸纤维素膜的左侧，所述硝酸纤维素膜的左端与荧光微球结合垫的右端相连；所述底板上表面的左端设置有样品垫，样品垫的右端与荧光微球结合垫的左端相连。作为本技术进一步的方案：所述底板采用PVC板。作为本技术再进一步的方案：所述控制线包被有羊抗鼠二抗。作为本技术再进一步的方案：所述测试线包被有松弛素鼠源单抗。作为本技术再进一步的方案：所述荧光微球结合垫采用玻璃纤维制成。作为本技术再进一步的方案：所述荧光微球结合垫结合有荧光微球-松弛素鼠源单抗标记物。作为本技术再进一步的方案：所述样品垫材质采用玻璃纤维。与现有技术相比，本技术的有益效果是：本技术犬松弛素免疫荧光微球快速检测试剂卡与常用的ELISA法相比，具有操作快速简便，成本低且不需要使用大型检测仪器的优点；与金标免疫层析法相比，具有灵敏度高，假阳率低的优点且在使用相应的荧光读数仪时能实现定量检测的效果。附图说明图1为犬松弛素免疫荧光微球快速检测试剂卡的结构示意图。图2为犬松弛素免疫荧光微球快速检测试剂卡的测试原理示意图。图中：1-底板、2-吸水纸、3-硝酸纤维素膜、4-控制线、5-测试线、6-荧光微球结合垫、7-样品垫。具体实施方式下面将结合本技术实施例中的附图，对本技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本技术保护的范围。请参阅图1～2，本技术实施例中，一种犬松弛素免疫荧光微球快速检测试剂卡，包括一个位于底层的底板1，所述底板1采用PVC板，所述底板1上表面的右端设置有吸水纸2，所述底板1上表面中间位置设置有硝酸纤维素膜3，硝酸纤维素膜3上从左往右分别包被有测试线5和控制线4，所述控制线4包被有羊抗鼠二抗，所述测试线5包被有松弛素鼠源单抗；所述吸水纸2的左端与硝酸纤维素膜3的右端相连，吸水纸2的左端压住硝酸纤维素膜3的右端，所述底板1上表面还设置有荧光微球结合垫6，所述荧光微球结合垫6采用玻璃纤维制成，所述荧光微球结合垫6结合有荧光微球-松弛素鼠源单抗标记物；所述荧光微球结合垫6位于硝酸纤维素膜3的左侧，所述硝酸纤维素膜3的左端与荧光微球结合垫6的右端相连，荧光微球结合垫6的右端压住硝酸纤维素膜3的左端；所述底板1上表面的左端设置有样品垫7，所述样品垫7材质采用玻璃纤维，样品垫7的右端与荧光微球结合垫6的左端相连，样品垫7的右端压住荧光微球结合垫6的左端。本技术的工作原理是：检测使用时，将待测液使用加样器滴加于样品垫7处，通过层析原理沿层析方向层析，先后经过硝酸纤维素膜3上的测试线5和控制线4后被吸水纸2吸收。当样本中含有待测物松弛素时，与荧光微球结合垫6上的荧光微球-松弛素鼠源单抗标记物特异性结合，形成荧光微球-松弛素鼠源单抗-松弛素结合物，在经过测试线5时，与测试线5处包被的松弛素鼠源单抗结合而形成荧光微球-松弛素鼠源单抗-松弛素-松弛素鼠源单抗结合物并结合在测试线5处，剩余未结合待测物中松弛素的荧光微球-松弛素鼠源单抗标记物在经过控制线4时，与控制线4处包被的羊抗鼠二抗结合而形成荧光微球-松弛素鼠源单抗-羊抗鼠二抗结合物并结合在控制线4处，从而形成控制线4和测试线5都能激发荧光信号。反之，当样本中不含待测物松弛素时，荧光微球结合垫6上的荧光微球-松弛素鼠源单抗标记物不能与测试线5上包被的松弛素鼠源单抗结合，只与控制线4上包被的羊抗鼠二抗结合而形成荧光微球-松弛素鼠源单抗-羊抗鼠二抗结合物并结合在控制线4处，从而形成只有控制线4能激发荧光信号。本技术试剂卡的制作包括以下步骤：1）直接购买或制备200nm羧基荧光微球；2）用羧基荧光微球标记松弛素鼠源单抗，标记时先将羧基荧光微球用PH为6的2-（N-吗啡啉）乙磺酸（MES）稀释10倍，加入1-乙基-3-（3-二甲基氨丙基）碳二亚胺（EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺，活化羧基荧光微球上的羧基；然后加入待标记的松弛素鼠源单抗，搅拌反应1小时，利用抗体表面的氨基与羧基荧光微球表面的羧基发生酰胺缩合反应，完成偶联；然后将标记物离心，去除上层清液，得到的沉淀物即为羧基荧光微球-松弛素鼠源单抗标记物；用重悬液将沉淀复溶得到羧基荧光微球-松弛素鼠源单抗标记溶液；3）将上述步骤中得到的羧基荧光微球-松弛素鼠源单抗标记溶液用喷金机喷涂于荧光微球结合垫6上，烘干；4）将硝酸纤维素膜3贴于底板1上，使用划膜仪将松弛素鼠源单抗包被于测试线5处，将羊抗鼠二抗包被于控制线4处，烘干；5）将样品垫7、荧光微球结合垫6和吸水纸2组装于底板1上，切条并组装在检测卡壳中。其中，步骤3中烘干的温度为38℃，时间为8小时；步骤4中烘干的温度为38℃，时间为8小时。对于本领域技术人员而言，显然本技术不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本技术的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本技术。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本技术的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本技术内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种犬松弛素免疫荧光微球快速检测试剂卡，其特征在于，包括一个位于底层的底板（1），所述底板（1）上表面的右端设置有吸水纸（2），所述底板（1）上表面中间位置设置有硝酸纤维素膜（3），硝酸纤维素膜（3）上从左往右分别包被有测试线（5）和控制线（4）；所述吸水纸（2）的左端与硝酸纤维素膜（3）的右端相连，所述底板（1）上表面还设置有荧光微球结合垫（6）；所述荧光微球结合垫（6）位于硝酸纤维素膜（3）的左侧，所述硝酸纤维素膜（3）的左端与荧光微球结合垫（6）的右端相连；所述底板（1）上表面的左端设置有样品垫（7），样品垫（7）的右端与荧光微球结合垫（6）的左端相连。

【技术特征摘要】
1.一种犬松弛素免疫荧光微球快速检测试剂卡，其特征在于，包括一个位于底层的底板（1），所述底板（1）上表面的右端设置有吸水纸（2），所述底板（1）上表面中间位置设置有硝酸纤维素膜（3），硝酸纤维素膜（3）上从左往右分别包被有测试线（5）和控制线（4）；所述吸水纸（2）的左端与硝酸纤维素膜（3）的右端相连，所述底板（1）上表面还设置有荧光微球结合垫（6）；所述荧光微球结合垫（6）位于硝酸纤维素膜（3）的左侧，所述硝酸纤维素膜（3）的左端与荧光微球结合垫（6）的右端相连；所述底板（1）上表面的左端设置有样品垫（7），样品垫（7）的右端与荧光微球结合垫（6）的左端相连。2.根据权利要求1所述的犬松弛素免疫荧光微球快速检...

【专利技术属性】
技术研发人员：王钦，郑砚超，
申请(专利权)人：浙江安吉赛安芙生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：浙江,33