PDLIM4用作胃癌标志物的应用制造技术

本发明专利技术提供了PDLIM4作为胃癌诊断标志物的应用。本发明专利技术提供的PDLIM4的应用为PDLIM4作为检测胃癌的蛋白质分子标记。PDLIM4在胃癌细胞和癌旁细胞中存在明显的差异表达，因此，可根据其在胃细胞中的表达量检测患者是否患有胃癌。

Application of PDLIM4 as a marker of gastric cancer

The invention provides the application of PDLIM4 as a diagnostic marker of gastric cancer. The application of PDLIM4 provided by the invention is PDLIM4 as a protein molecular marker for detecting gastric cancer. PDLIM4 is differentially expressed in gastric cancer cells and adjacent cells. Therefore, the expression of PDLIM4 in gastric cancer cells can be used to detect whether patients have gastric cancer.

【技术实现步骤摘要】
PDLIM4用作胃癌标志物的应用
本专利技术涉及胃癌的筛查/检测
，更具体地，涉及一种PDLIM4作为胃癌标志物的应用。
技术介绍
胃癌是起源于胃黏膜上皮的恶性肿瘤，在我国各种恶性肿瘤中发病率居首位，胃癌发病有明显的地域性差别，在我国的西北与东部沿海地区胃癌发病率比南方地区明显为高。好发年龄在50岁以上，男女发病率之比为2：1。由于饮食结构的改变、工作压力增大以及幽门螺杆菌的感染等原因，使得胃癌呈现年轻化倾向。胃癌可发生于胃的任何部位，其中半数以上发生于胃窦部，胃大弯、胃小弯及前后壁均可受累。绝大多数胃癌属于腺癌，早期无明显症状，或出现上腹不适、嗳气等非特异性症状，常与胃炎、胃溃疡等胃慢性疾病症状相似，易被忽略，因此，目前我国胃癌的早期诊断率仍较低。胃癌的预后与胃癌的病理分期、部位、组织类型、生物学行为以及治疗措施有关。到目前为止，已有不下10种的基因异常表达被确定与胃癌的发生发展有关，但已确定的胃癌相关基因在胃癌中的异常表达率并不高，胃癌的发病机制至今仍未阐明，胃癌的早期诊断率仍有待提高。此外，在我国传统的胃癌手术加化疗以及近年来配合使用的多种基因治疗方法仍没有明显提高胃癌患者的生存率，因而寻找新的胃癌相关基因尤其是胃癌高表达基因对于探讨胃癌的发病机制和早期诊断具有重要意义。PDLIM4(HGNC登录号16501；EntrezGene登录号为8572；Ensembl登录号为ENSG00000131435；OMIM登录号为603422；UniProtKB登录号为P50479)属于FOZ/LIM蛋白家族，在发育过程中发挥重要作用。
技术实现思路
通过筛选在人类胃癌组织及相应的癌旁组织中差异表达的蛋白质，本申请的专利技术人找到了一种在胃癌组织及相应的癌旁组织中存在差异表达的蛋白质(在癌组织中上调表达)，经质谱鉴定为PDLIM4。免疫印迹实验证实，PDLIM4的确在胃癌组织及相应的癌旁组织中存在差异表达(在癌组织中表达上调)。通过对55对人胃癌的癌组织与癌旁组织进行的免疫组织化学实验进一步证实了PDLIM4在人类胃癌的癌组织与癌旁组织中存在差异表达(在癌组织中表达上调)，并且血清的免疫学实验也显示了PDLIM4在人类胃癌患者中高表达。基于PDLIM4与胃癌的这种相关性，PDLIM4可以作为一种蛋白质分子标记物对它的表达量进行检测可以用于检测胃癌。因此，本专利技术的首要目的即在于提供PDLIM4用作检测胃癌的应用。本专利技术提供的PDLIM4的应用为，作为用于检测胃癌的蛋白质分子标记物。本专利技术提供的PDLIM4用于检测胃癌的蛋白质分子标记物的应用为制备定量蛋白质组技术的试剂盒。本专利技术的另一个目的在于提供PDLIM4的抗体的应用。本专利技术提供的PDLIM4的抗体的应用为，用于制备检测胃癌的制剂和/或用于制备检测胃癌的试剂盒。根据本专利技术，抗PDLIM4的抗体包括单克隆抗体和多克隆抗体。本专利技术的又一个目的在于提供一种体外检测胃组织中PDLIM4的表达是否异常的方法。本专利技术提供的方法.为：检测待测胃组织/血清中PDLIM4的量，并与正常胃组织/血清中的PDLIM4的量进行比较。鉴于到目前为止，还没有PDLIM4与胃癌的相关性报道。因此，本专利技术的这一发现将为胃癌的诊断和/或治疗提供一条全新的途径。此外，本专利技术还涉及以下实施方案：1.诊断胃癌的方法，所述方法包括：a)获得个体的疑似癌症组织，b)测定其中的PDLIM4的表达水平，c)获得正常个体的同一组织或同一个体的正常组织，和d)测定其中的PDLIM4的表达水平作为对照表达水平，e)将b)中获得的PDLIM4的表达水平与d)中获得的PDLIM4的对照表达水平进行比较，当b)中获得的PDLIM4的表达水平与d)中获得的PDLIM4的对照表达水平相比提高时，确定所述个体患有胃癌。2.根据实施方案1所述的方法，其中所述组织为胃组织。3.根据实施方案1或2所述的方法，其中所述表达水平通过选自以下的任一方法检测：(a)检测编码PDLIM4的mRNA，和(b)检测PDLIM4的蛋白质。4.根据实施方案1-3中任一项所述的方法，其中所述PDLIM4的量通过采用抗PDLIM4的抗体进行测定。5.根据实施方案1-4中任一项所述的方法，其中所述抗PDLIM4的抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。6.诊断胃癌的方法，所述方法包括：a)获得个体的血清，b)测定其中的PDLIM4的表达水平，c)获得正常个体的血清，d)测定其中的PDLIM4的表达水平作为对照表达水平，和e)将b)中获得的PDLIM4的表达水平与d)中获得的PDLIM4的对照表达水平进行比较，当b)中获得的PDLIM4的表达水平与d)中获得的PDLIM4的对照表达水平相比提高时，确定所述个体患有胃癌。7.根据实施方案6所述的方法，其中所述PDLIM4的表达水平通过采用抗PDLIM4的抗体进行测定。8.根据实施方案6或7所述的方法，其中所述抗PDLIM4的抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。9.抗PDLIM4的抗体在制备试剂盒中的用途，所述试剂盒用于诊断个体的胃癌。10.用于诊断个体的胃癌的试剂盒，所述试剂盒包含a)用于测定PDLIM4的表达水平的试剂，和b)使用说明书。本专利技术的其它方面和优点可通过参阅以下具体实施方案的描述并结合附图来知晓。附图说明图1对PDLIM4的免疫印迹图谱进行数据分析得出的蛋白质表达量相对分布图。图2对PDLIM4免疫组织化学实验结果进行数据分析得出的蛋白质表达量相对分布图。图3对PDLIM4血清中蛋白质含量实验结果进行数据分析相对分布图。具体实施方式在一个优选的实施方案中，宜采用所述蛋白的片段。所述片段应当与样品中的蛋白或其经过酶解(如胰蛋白酶酶解)后得到的片段的序列完全一致。为方便操作，所述片段的长度宜为5-50个氨基酸，优选6-30个氨基酸，更优选为6-25个氨基酸。此外，所述片段的最佳Transition应有较好的信噪比。所述宜经过重同位素(例如13C，14N)标记，以便将其与未经标记的样品相区分。表1.PDLIM4肽段序列。对患有胃癌患者进行早期检测的步骤包括将一定量的经过重同位素标记的片段加入经酶(如胰蛋白酶)消化的患者血清样品中，用定量蛋白质组学的技术检测患者血清中所述片段的水平，从而确定血清中PDLIM4水平；将所测得的水平与根据正常人的水平确定的临界值比较，如果所测得的水平高于临界值，则表示胃癌患病几率大。所述临界值可以由本领域技术人员根据常规手段来确定。例如，本领域技术人员可以根据测得的正常人(组)的血清蛋白质含量数据来绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)，随后确定临界值(cut-off)。在更优选的实施方案中，所述定量蛋白质组学技术可以和以合成肽段为基础的绝对定量技术(absolutequantificationanalysis,AQUA)相结合，这样就可以直接对多个样品中的PDLIM4直接进行绝对含量的检测。将所测得的水平与正常对照血清的水平比较，如果所测得的水平高于正常对照血清的水平，则表示该对象患有胃癌。在另一个优选的实施方案中，所述与人PDLIM4蛋白特异性结合的物质是抗体。此处的术语“抗体”具有最广义地含义，其具体地包括:单克隆抗体(包括全长的单克隆抗体)、多克隆抗体、多特异性抗体(例如双本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.诊断胃癌的方法，所述方法包括：a)获得个体的疑似癌症组织，b)测定其中的PDLIM4的表达水平，c)获得正常个体的同一组织或同一个体的正常组织，和d)测定其中的PDLIM4的表达水平作为对照表达水平，e)将b)中获得的PDLIM4的表达水平与d)中获得的PDLIM4的对照表达水平进行比较，当b)中获得的PDLIM4的表达水平与d)中获得的PDLIM4的对照表达水平相比提高时，确定所述个体患有胃癌。

【技术特征摘要】
1.诊断胃癌的方法，所述方法包括：a)获得个体的疑似癌症组织，b)测定其中的PDLIM4的表达水平，c)获得正常个体的同一组织或同一个体的正常组织，和d)测定其中的PDLIM4的表达水平作为对照表达水平，e)将b)中获得的PDLIM4的表达水平与d)中获得的PDLIM4的对照表达水平进行比较，当b)中获得的PDLIM4的表达水平与d)中获得的PDLIM4的对照表达水平相比提高时，确定所述个体患有胃癌。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述组织为胃组织。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述表达水平通过选自以下的任一方法检测：(a)检测编码PDLIM4的mRNA，和(b)检测PDLIM4的蛋白质。4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述PDLIM4的量通过采用抗PDLIM4的抗体进行测定。5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述抗PDLIM4...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕文堂，陈慕熙，尤姝，
申请(专利权)人：清紫生物科技深圳有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44