分离和检测氧化固醇的方法技术

提供用于测定固醇样品的纯度的分析方法。这些方法包括提供HPLC洗脱剂，其包括固醇、与所述固醇相关的其它化合物和移动挥发相；从所述HPLC洗脱剂中产生液滴的气溶胶；干燥所述液滴以获得所述固醇的残余颗粒；使所述固醇的残余颗粒与离子流接触，所述离子流将尺寸依赖性电荷施加到所述残余颗粒的每一个以产生电信号，并且测量所述电信号以测定所述样品中所述固醇的纯度。所述固醇可以是OXY133或OXY133单水合物。

Separation and Detection of Oxysterols

An analytical method for the determination of the purity of sterol samples is provided. These methods include providing an HPLC eluent comprising sterols, other compounds associated with the sterol and mobile volatile phases; generating aerosols of droplets from the HPLC eluent; drying the droplets to obtain residual particles of the sterol; and contacting the residual particles of the sterol with an ion flow, which will be ruled by the ion flow. An inch-dependent charge is applied to each of the remaining particles to generate an electrical signal, and the electrical signal is measured to determine the purity of the sterol in the sample. The sterol may be OXY133 or OXY133 monohydrate.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】分离和检测氧化固醇的方法
技术介绍
通常采用不同的生物物质来促进医学应用中的骨骼生长，包括骨折愈合和骨骼疾病(包括脊柱疾病)的手术管理。脊柱融合通常由类似于整形外科医生和神经外科医生的外科医生进行，以解决退行性椎间盘疾病和影响腰椎和颈椎的关节炎。历史上，通常从患者的髂嵴取出的自体骨骼移植已被用于增强椎骨层之间的融合。一种成骨性并且通常用于促进脊柱融合的蛋白质是重组人类骨形态生成蛋白-2(rhBMP-2)。美国食品和药物管理局(USFoodandDrugAdministration)(FDA)已经批准其用于单层前路腰椎椎体间融合。从那时起，rhBMP-2的使用已显著增加，并且其使用的适应症已经扩展到包括后路腰椎脊柱融合以及颈椎融合。氧化固醇形成存在于循环中以及人类和动物组织中的一大类胆固醇氧化衍生物。已发现氧化固醇存在于动脉粥样硬化病变中，并且在各种生理过程，例如细胞分化、炎症、细胞凋亡和类固醇产生中起作用。一些天然存在的氧化固醇具有稳定的成骨特性并且可以用于生长骨骼。天然存在的最有效的成骨性氧化固醇，即20(S)-羟基胆固醇当应用于能够分化成为成骨细胞和脂肪细胞的多能间充质细胞中时，具有成本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定OXY133样品的纯度的方法，所述方法包含：提供包含OXY133、OXY133杂质和移动挥发相的HPLC洗脱剂；从所述HPLC洗脱剂中产生液滴的气溶胶；干燥所述液滴，获得OXY133的残余颗粒；使所述OXY133残余颗粒与离子流接触，所述离子流对所述残余颗粒的每一个施加尺寸依赖性电荷，以产生电信号，所述电信号的水平与OXY133的带电残余颗粒的量成比例；并且测量所述电信号以测定所述样品的OXY133的所述纯度。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.03.28 US 15/082,6651.一种测定OXY133样品的纯度的方法，所述方法包含：提供包含OXY133、OXY133杂质和移动挥发相的HPLC洗脱剂；从所述HPLC洗脱剂中产生液滴的气溶胶；干燥所述液滴，获得OXY133的残余颗粒；使所述OXY133残余颗粒与离子流接触，所述离子流对所述残余颗粒的每一个施加尺寸依赖性电荷，以产生电信号，所述电信号的水平与OXY133的带电残余颗粒的量成比例；并且测量所述电信号以测定所述样品的OXY133的所述纯度。2.根据权利要求1所述的方法，其中OXY133包含OXY133单水合物。3.根据权利要求1所述的方法，其还包含将所述OXY133的带电残余颗粒转移到收集器中并且用静电计测量所述电信号。4.根据权利要求2所述的方法，其中OXY133单水合物杂质包含OXY133杂质1、C27H46O2二醇、OXY133单水合物的非对映异构体D1和非对映异构体D2。5.根据权利要求3所述的方法，其中从所述HPLC洗脱剂中产生所述液滴的气溶胶通过喷雾器提供。6.根据权利要求1所述的方法，其中所述移动挥发相包含乙腈、乙腈和水的混合物、水和甲醇的混合物或水、甲醇和乙腈的混合物。7.根据权利要求4所述的方法，其中检测到约0.03％到约0.05％的OXY133单水合物杂质。8.根据权利要求4所述的方法，其中所述OXY133峰和非对映异构体D1的分辨率≥0.8。9.根据权利要求2所述的方法，其中检测到约0.01％或1ng量的所述OXY133单水合物。10.根据权利要求2所述的方法，其中OXY133单水合物与非对映异构体D1、非对映异构体D2或其它OXY133单水合物杂质分离。11.根据权利要求2所述的方法，其中所述OXY133单水合物的纯度为至少96.9％。12.一种用于测定样品中OXY133单水合物的量的方法，所述方法包含：提供具有已知量的OXY13...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·E·哈林顿，J·C·雅各布斯，
申请(专利权)人：华沙整形外科股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US