一种小鼠脊髓体外电转基因方法、小鼠脊髓电转组织切片培养模型建立方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种小鼠脊髓体外电转基因方法、小鼠脊髓电转组织切片培养模型建立方法及其应用，属于神经系统基因功能研究技术领域。本发明专利技术小鼠脊髓体外电转基因方法，包括：将胚鼠从母鼠子宫中取出，剥离出所述胚鼠的脊髓，将含有目的基因的质粒注射到所述离体脊髓的脊髓腔内，然后将电转仪的电极放到脊髓的两侧，其中正极放到需要转染一侧，进行电转，得电转脊髓。将电转后的脊髓进行组织切片培养，利用该方法可以建立小鼠脊髓电转组织切片培养模型，为外源基因在小鼠胚胎发育过程在脊髓中对神经元的影响提供了一种新的研究方法，从而寻找治疗脊髓疾病的有效手段；该方法更适合神经元的动态变化观察，是介于活体与细胞之间的一种研究技术。

【技术实现步骤摘要】
一种小鼠脊髓体外电转基因方法、小鼠脊髓电转组织切片培养模型建立方法及其应用
本专利技术涉及一种小鼠脊髓体外电转基因方法、小鼠脊髓电转组织切片培养模型建立方法及其应用，属于神经系统基因功能研究

技术介绍
哺乳动物胚胎发育是在母体内进行，因此，在胚胎发育过程进行神经节系统异常的研究较为困难。小鼠是一种常用的实验模式动物，在前期的研究过程，我们已经在小鼠模型中进行了小鼠子宫内电转基因技术，该技术实现了在小鼠胚胎早期大脑皮层外源基因的异常表达，在特定阶段进行分析其对大脑皮层的影响(杨慈清,李小英,卢习,等.小鼠子宫内电转基因方法的建立[J].解剖学杂志,2013,36(2):170-172.)。随着活体电转基因技术的出现，可以实现外源基因在活体中不同组织器官的异常表达。脊髓是中枢神经系统重要的组成部分，具有十分重要的功能，比如反射、运动、传导等。脊髓一旦出现损伤，将会给机体造成严重的后果，比如肌肉萎缩，呼吸麻痹，甚至死亡(DanesinCathy,SoulaCathy.MovingtheShhSourceoverTime:WhatImpactonNeuralCellDiversif本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种小鼠脊髓体外电转基因方法，其特征在于：包括：将含有目的基因的质粒注射到胚鼠离体脊髓的脊髓腔内，然后将电转仪的电极放到脊髓的两侧，其中正极放到需要转染一侧，进行电转，得电转脊髓。

【技术特征摘要】
1.一种小鼠脊髓体外电转基因方法，其特征在于：包括：将含有目的基因的质粒注射到胚鼠离体脊髓的脊髓腔内，然后将电转仪的电极放到脊髓的两侧，其中正极放到需要转染一侧，进行电转，得电转脊髓。2.根据权利要求1所述的小鼠脊髓体外电转基因方法，其特征在于：所述胚鼠为11-13天的胚鼠。3.根据权利要求1所述的小鼠脊髓体外电转基因方法，其特征在于：所述注射为用显微注射毛细玻璃针通过吹入的方式将所述质粒注射到脊髓腔内。4.根据权利要求1所述的小鼠脊髓体外电转基因方法，其特征在于：所述电转的条件为：电压33-37V，每次脉冲55-65ms，间隔95-105ms，电脉冲5-7次。5.一种小鼠脊髓电转组织切片培...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨慈清，林俊堂，李小英，李栓庆，管丽红，乔梁，李晗，
申请(专利权)人：新乡医学院，
类型：发明
国别省市：河南,41