一种利用RNA干扰机制的分子传感器制造技术

本发明专利技术提供了一种利用RNA干扰机制的分子传感器，所述分子传感器包括以下几个部分：1.核酸酶缺陷型CRISPR‑Cas9蛋白；2.前体合成引导RNA(pre‑sgRNA)，所述前体合成引导RNA含有与目标miRNA或siRNA完全互补的序列以及合成引导RNA(sgRNA)的序列；3.报告基因；所述分子传感器用于检测细胞内目标miRNA或siRNA的表达活性。

【技术实现步骤摘要】
一种利用RNA干扰机制的分子传感器
本专利技术涉及分子生物学领域，具体而言涉及一种利用RNA干扰机制的分子传感器。
技术介绍
RNA干扰机制RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是指由单链或双链RNA(double-strandedRNA，dsRNA)诱发的同源mRNA高效特异性降解的现象。RNAi具有如下特征：1)RNAi是转录后水平的基因沉默机制；2)RNAi具有很高的特异性，只降解与之序列相应的单个内源基因的mRNA；3)RNAi抑制基因表达具有很高的效率，表型可以达到缺失突变体表型的程度，而且相对很少量的dsRNA分子(数量远远少于内源mRNA的数量)就能完全抑制相应基因的表达，是以催化放大的方式进行的；4)RNAi抑制基因表达的效应可以穿过细胞界限，在不同细胞间长距离传递和维持信号甚至传播至整个有机体以及可遗传等特点；5)dsRNA不得短于21个碱基，并且长链dsRNA也在细胞内被Dicer酶切割为21bp左右的siRNA，并由siRNA来介导mRNA切割。而且大于30bp的dsRNA不能在哺乳动物中诱导特异的RNA干扰，而是细胞非特异性和全面的基因表达受抑本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用RNA干扰机制的分子传感器，所述分子传感器包括以下几个部分：(1)核酸酶缺陷型CRISPR‑Cas9蛋白；(2)前体合成引导RNA，所述前体合成引导RNA含有与目标miRNA或siRNA完全互补的序列以及合成引导RNA(sgRNA)的序列；(3)报告基因；所述分子传感器用于检测细胞内目标miRNA或siRNA的表达活性。

【技术特征摘要】
1.一种利用RNA干扰机制的分子传感器，所述分子传感器包括以下几个部分：(1)核酸酶缺陷型CRISPR-Cas9蛋白；(2)前体合成引导RNA，所述前体合成引导RNA含有与目标miRNA或siRNA完全互补的序列以及合成引导RNA(sgRNA)的序列；(3)报告基因；所述分子传感器用于检测细胞内目标miRNA或siRNA的表达活性。2.根据权利要求1所述的利用RNA干扰机制的分子传感器，其中所述核酸酶缺陷型CRISPR-Cas9蛋白与转录激活因子相连接。3.根据权利要求2所述的利用RNA干扰机制的分子传感器，其中所述转录激活因子为VP64、p65和Rta中的一种或多种。4.根据权利要求1或2任一项所述的利用RNA干扰机制的分子传感器，其中所述前体合成引导RNA仅在合成引导RNA序列的一端含有与目标miRNA或siRNA完全互补的序列，或者其中所述前体合成引导RNA在合成引导RNA的序列两端均含有与目标miRNA或siRNA完全互补的序列。5.根据权利要求1或2任一项所述的利用RNA干扰机制的分子传感器，其中所述前体合成引导RNA在合成引导RNA的序列两端含有的与目标miRNA或siRNA完全互补的序列是相同或不同的序列。6.根据权利要求1或2任一项所述的利用RNA干扰机制的分子传感器，...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪阳明，王茜雯，胡鲁峰，廖乐祺，邱雅姿，石铭，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：北京,11