一种样本核酸检测试剂盒、试剂及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种检测样本核酸的试剂、方法和试剂盒，采用强碱性的核酸提取液(pH值为10.5～12.5)提取样本中的核酸，然后直接将提取出的核酸加入到PCR反应液(pH值为8.0～9.0)中进行中和，同时进行核酸扩增和检测。本发明专利技术可以检测血液、血浆、全血、生殖道分泌物、痰液或尿液等不同类型样本中的核酸。本发明专利技术通过在PCR反应液中对提取出的样本核酸进行中和，而不是在核酸提取时进行中和，可有效提高核酸提取效率和PCR扩增效率，显著提高样本核酸检测的准确性和灵敏度。

【技术实现步骤摘要】
一种样本核酸检测试剂盒、试剂及其应用
本专利技术属于生物科学和生物
，特别涉及一种检测样本核酸的试剂、方法和试剂盒。
技术介绍
随着分子生物学技术的快速发展，它已经渗透到生物学、医学、植物学、遗传学和动物学等各个方面。作为分子生物学技术的一项重大突破，聚合酶链式反应(PCR)技术具有高灵敏度、高特异性和省时快速等特点，已广泛地运用于人类和动物的疾病诊断(如产前诊断、新生儿筛查以及遗传代谢疾病检测)、法医侦检、亲缘关系分析、种子纯度鉴定、分子标记辅助育种、基因定位和转基因生物检测等等。运用PCR技术进行检测主要涉及到三个方面：核酸提取、核酸扩增和扩增产物检测。核酸提取的质量与数量通常直接决定着PCR反应的成败。因此，大量基于PCR技术的检验方法(如荧光PCR、DNA测序和RNA测序等)需要在扩增前提取与纯化生物样本(如血清、血浆、全血、尿液、阴道分泌物、唾液、粪便、棉拭子、上皮脱落细胞、新鲜组织和石蜡组织切片等)中的DNA和/或RNA核酸分子。长期以来，生物样本中核酸的提取和纯化一直是耗时、繁琐的过程，严重减慢了检测速度。尤其是对极其微量的生物样本而言，常规的核酸提取方法对样本中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种样本核酸检测试剂，所述样本核酸检测试剂包括核酸提取液和PCR反应液，其特征在于，所述核酸提取液包括碱金属氢氧化物10mM～100mM，Tris‑HCl 1mM～25mM，Chelex‑100 2％～5％(w/v)，EDTA 0.1％～0.4％(w/v)，所述核酸提取液的pH值为10.5～12.5；所述PCR反应液包括Tris‑HCl 5mM～75mM，所述PCR反应液的pH值为8.0～9.0。

【技术特征摘要】
1.一种样本核酸检测试剂，所述样本核酸检测试剂包括核酸提取液和PCR反应液，其特征在于，所述核酸提取液包括碱金属氢氧化物10mM～100mM，Tris-HCl1mM～25mM，Chelex-1002％～5％(w/v)，EDTA0.1％～0.4％(w/v)，所述核酸提取液的pH值为10.5～12.5；所述PCR反应液包括Tris-HCl5mM～75mM，所述PCR反应液的pH值为8.0～9.0。2.如权利要求1所述的样本核酸检测试剂，其特征在于，所述碱金属氢氧化物为NaOH或KOH。3.如权利要求1所述的样本核酸检测试剂，其特征在于，所述样本核酸检测试剂还包括浓缩液，所述浓缩液包括NaCl2.5％～4.5％(w/w)，PEG600010％～13％(w/v)。4.如权利要求1所述的样本核酸检测试剂，其特征在于，所述PCR反应液的pH值为8.1～8.7。5.如权利要求4所述的样本核酸检测试剂，其特征在于，所述PCR反应液的pH值为8.1～8.5。6.如权利要求5所述的样本核酸检测试剂，其特征在于，所述PCR反应液的pH值为8.1。7...

【专利技术属性】
技术研发人员：张太松，陈斐斐，张盼，王善辰，
申请(专利权)人：利多香港有限公司，
类型：发明
国别省市：中国香港,81