一种无NH4NO3植物组织培养用培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种无NH4NO3植物组织培养用培养基,包括SK基本培养基,该SK基本培养基中大量元素的含量为：Ca(NO3)2494mg/L、Mg(NO3)2222mg/L、(NH4)2SO4198 mg/L、(NH4)3PO4372 mg/L、NH4Cl 321mg/L和KNO32153mg/L。本发明专利技术使用(NH4)2SO4、(NH4)3PO4和NH4Cl提供NH4

【技术实现步骤摘要】
一种无NH4NO3植物组织培养用培养基
本专利技术属于植物生物
，具体涉及一种无NH4NO3植物组织培养用培养基。
技术介绍
MS培养基由Murashige和Skoog于1962年发布，其普遍适用性及稳定性使其广泛用于多种植物的各类组织培养，香蕉、兰花及桉树等实现工业化组培育苗的品种，其培养基均由MS衍生改良而来。硝酸铵NH4NO3为MS主要构成成分，占大量元素质量百分比36.4%，是MS铵态氮NH4+的来源，同时维持了NH4+与NO3－摩尔浓度近似1:2的合适比例。NH4NO3是《危险化学品安全管理条例》及《民用爆炸物品安全管理条例》管制药剂，禁止纯品NH4NO3市场流通，NH4NO3的禁用对组培产业可谓釜底抽薪，寻求NH4NO3有效替代品维持正常生产成为产业生存与发展的重要课题。王媛花将MS培养基NH4NO3替换为3.4g/L(NH4)2SO4，对苹果、草莓和葡萄组培苗进行试验，报道结论为继代的植物叶片平展，叶色嫩绿，植物幼嫩组织含水量高，植株生长旺盛。大量元素的简单替换导致离子浓度大幅波动，其NH4+及SO42-水平远远超过MS、ER、B5、WPM等常用培养基，NH4+与NO3－比例亦是独树一帜达到2.74:1，而据普遍适用的规律，培养基内过高NH4+水平，持续培养会抑制培养物生长，诱发玻璃化等毒害反应，该配方应用效果和适应性有待验证。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是：在不使用NH4NO3的前提下，提供一种具备普遍适用性的植物组织培养用培养基。为了解决上述技术问题，本专利技术提供的一种无NH4NO3植物组织培养用培养基,包括SK基本培养基,该SK基本培养基中大量元素的含量为：Ca(NO3)2494mg/L、Mg(NO3)2222mg/L、(NH4)2SO4198mg/L、(NH4)3PO4372mg/L、NH4Cl321mg/L和KNO32153mg/L。上述中，该SK基本培养基中微量元素、铁盐和有机物的含量与MS培养基中的相同。上述中，该SK基本培养基中微量元素的含量为MnSO4·4H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、H3BO36.2mg/L、KI0.83mg/L、NaMoO4·2H2O0.25mg/L、CuSO4·5H2O0.025mg/L和CoCl2·6H2O0.025mg/L；铁盐含量为NaEDTA·2H2O37.3mg/L和FeSO4·7H2O27.8mg/L；有机物的含量为肌醇100mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L和甘氨酸2mg/L。本专利技术中的SK基本培养基可替换常用的MS培养基，且与MS培养基一样，在生产用培养基制作中，在SK基本培养基基础上，根据实际培养需要添加包含但不限于大量元素水溶性肥料、有机液肥、适量激素、蔗糖和卡拉胶等，而添加的量与MS培养基一样，且调节pH至5.8，即可搅拌分装。另外，其SK基本培养基全部或部分大量元素组分可按相同比例调整。本专利技术的有益效果在于：使用(NH4)2SO4、(NH4)3PO4和NH4Cl提供NH4+，Ca(NO3)2、Mg(NO3)2和KNO3提供NO3－，部分替换NH4NO3，重新设计培养基，使其大量元素离子浓度与MS、ER等常用培养基接近，能维持组培苗正常生长，应对NH4NO3短缺对组培产业带来的挑战，需求迫切，具备现实的生产意义。具体实施方式为详细说明本专利技术的
技术实现思路
、所实现目的及效果，以下结合实施方式予以说明。以下实施例中用于配制大量元素、铁盐、微量元素及有机物的药剂均为广州化学试剂厂生产的分析纯试剂，蔗糖为食用级白砂糖，卡拉胶为北京康倍斯科技有限公司生产。翠筠（18-18-18）水溶肥由佛山市顺德区翠筠园艺有限公司生产，其标识成分为：全氮18%（其中铵态氮3.6%、硝态氮5.3%）、水溶性磷18%、水溶性钾18%、水溶氧化镁2%。该培养基包括SK基本培养基，该SK基本培养基中各组分的含量为：大量元素Ca(NO3)2494mg/L、Mg(NO3)2222mg/L、(NH4)2SO4198mg/L、(NH4)3PO4372mg/L、NH4Cl321mg/L和KNO32153mg/L，微量元素MnSO4·4H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、H3BO36.2mg/L、KI0.83mg/L、NaMoO4·2H2O0.25mg/L、CuSO4·5H2O0.025mg/L及CoCl2·6H2O0.025mg/L，铁盐含量为NaEDTA·2H2O37.3mg/L和FeSO4·7H2O27.8mg/L，有机物的含量为肌醇100mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L和甘氨酸2mg/L。下面各实施例分别采用上述的SK基本培养基，添加植物生长调节剂而得各种植物组织培养基。实施例一：广林9号巨尾桉，增殖SK+6-BA0.2mg/L+NAA0.05mg/L，生根SK+NAA1.0mg/L+IBA0.5mg/L，所有培养基均加入卡拉胶6.5g/L、白砂糖30g/L，灭菌前pH调节为5.8。实施例二：黑金刚橡胶榕，增殖SK+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L，生根SK+NAA0.5mg/L+IBA0.1mg/L，所有培养基均加入卡拉胶6.5g/L、白砂糖30g/L，灭菌前pH调节为5.8。实施例三：美酒白掌，增殖SK+翠筠（18-18-18）水溶肥0.5g+6-BA1.5mg/L，生根MS+NAA0.5mg/L+IBA0.1mg/L，所有培养基均加入卡拉胶6.5g/L、白砂糖30g/L，灭菌前pH调节为5.8。应用比较例：1.参试材料组培方法原始培养基：（1）广林9号巨尾桉，增殖ER+6-BA0.2mg/L+NAA0.05mg/L，生根1/2ER+NAA1.0mg/L+IBA0.5mg/L；（2）黑金刚橡胶榕，增殖MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L，生根MS+NAA0.5mg/L+IBA0.1mg/L；（3）美酒白掌，增殖MS+6-BA1.5mg/L，生根MS+NAA0.5mg/L+IBA0.1mg/L。所有培养基均加入卡拉胶6.5g/L、白砂糖30g/L，灭菌前pH调节为5.8。培养环境：培养室光照强度1600lx、培养温度26℃±2℃；炼苗间为单层遮阳网大棚，遮光率40%，配备风机水帘。培养周期：广林9号巨尾桉继代增殖周期20d，生根培养时间为25d；黑金刚橡胶榕继代增殖周期30d，生根培养时间为25d；美酒白掌继代增殖周期30d，生根培养时间为35d。生根苗接入标准：广林9号巨尾丛生芽内高度＞1.0㎝单芽可用于生根，且取长度0.5㎝顶芽接种至生根培养基；黑㎝金刚橡胶榕高度＞2.0㎝单芽可用于生根，且取长度1.2～1.5㎝顶芽接种至生根培养基；美酒白掌高度＞2.5㎝单芽可用于生根，将单芽完整的从丛生芽分离，接种至生根培养基。达不到高度要求但形态完整的单芽保留在接种团块上用于继代，本研究将可用于生根的单芽称为生根芽、形态完整的后备单芽称为后备芽。2.SK培养基应用效果测试广林9号巨尾桉增殖、黑金刚橡胶榕、美酒白掌组培苗增殖和生根培养均设置MS、ER、SK、SK+翠筠（18-18-1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种无NH4NO3植物组织培养用培养基,包括SK基本培养基,其特征在于，该SK基本培养基中大量元素的含量为：Ca(NO3)2 494mg/L、Mg(NO3)2 222mg/L、(NH4)2SO4 198 mg/L、(NH4)3PO4 372 mg/L、NH4Cl 321mg/L和KNO3 2153mg/L。

【技术特征摘要】
1.一种无NH4NO3植物组织培养用培养基,包括SK基本培养基,其特征在于，该SK基本培养基中大量元素的含量为：Ca(NO3)2494mg/L、Mg(NO3)2222mg/L、(NH4)2SO4198mg/L、(NH4)3PO4372mg/L、NH4Cl321mg/L和KNO32153mg/L。2.根据权利要求1所述的一种无NH4NO3植物组织培养用培养基,其特征在于，该SK基本培养基中微量元素、铁盐和有机物的含量与MS培养基中的相同。3.根据权利要求1或2所述的一种无NH4NO3植物组织培养用培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁秋玲，张能，黄庆锋，郭振粤，黄春华，李彭怡，王力前，倪燕妹，谢黎黎，钟晓萍，
申请(专利权)人：广东农垦热带作物科学研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44