【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及南药岗梅组织培养，具体涉及一种南药岗梅优树组培苗培育的方法。
技术介绍
1、岗梅(ilex asprella(hook.etarn.)champ.ex benth.)为冬青科冬青属植物，又名秤星树、梅叶冬青。主要分布于广东、广西、江西、福建等地。以根、叶入药，有清热解毒、生津止渴、消肿散瘀的功效，用于感冒发热、口渴、咽喉肿痛等症，是不可替代的配方药材。
2、岗梅原始生境为海拔400～1000m的山地疏林中或路旁灌丛中，应用岗梅作为橡胶树林下栽培树种，可在保证橡胶树正常生长采胶前提下，迅速有效提升橡胶林地经济效益，利于生态橡胶园建设，具备良好的推广应用前景。
3、岗梅现行繁殖方法主要为种子播种实生苗，但是岗梅种子细小、采种制种困难、且种子发芽率极低，导致岗梅繁殖率低；其次，异花授粉植物实生苗性状分离，苗木定植后生长参差不齐，影响产量和品质的稳定性。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于避免现有技术中的不足之处而提供一种岗梅优树组培苗培育的方法，该方法能够稳定地繁殖出品质优异的岗梅，具有可操作性强和成本低的优点，实现岗梅优势单株无性系化、苗木快速繁殖、苗木均一稳定、适合集约化经营。
2、为实现上述目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、提供一种岗梅优树组培苗培育的方法，包括以下步骤：
4、s1、优树获得与甄别：选择岗梅优势单株，以原始采穗树作为外植体母树；
5、s2、外植体采集及消毒：在母树主干离地
6、s3、外植体培养及丛生芽诱导：将所述外植体枝段转移至启动培养基，直至外植体枝段侧芽萌发，将外植体枝段切割为带一个侧芽或顶芽的节段，将所述节段接种至启动培养基进行重新培养，使所述节段侧芽或顶芽长高，得到节段的腋芽萌发形成带3～5个芽的丛生芽；
7、s4、丛生芽继代增殖：将所述丛生芽接种至改良继代培养基进行继代增殖培养，随后将丛生芽切割为带若干个芽的第一小丛，将所述第一小丛转接至相同培养基，重复继代培养若干次，获得增殖丛生芽；
8、s5、壮苗培养：将所述增殖丛生芽切分成带若干个芽的第二小丛，随后将所述第二小丛接种于改良壮苗培养基进行培养，直至第二小丛的小芽长高，获得高3～4cm的粗壮单芽，其中，部分单芽的基部腋芽萌发；
9、s6、生根培养：将所述单芽端部2～2.5cm处切下，接种生根培养基，其中，部分基部带有小芽的单芽接种至壮苗培养基，待小芽形成高3～4cm的粗壮单芽再接种生根，第二次接种生根后剩余部分淘汰；当单芽基部切口附近区域形成突起的白色根原基，根源基发育为完整根系，获得生根苗；
10、s7、生根苗炼苗：将所述生根苗置于炼苗棚进行炼苗，炼苗完成，获得植株高度4～5cm，主根5～8条，主根长度至0.5～1.0cm的苗木；
11、s8、穴盘苗培育：洗净所述苗木根部的培养基，使用浸泡液浸泡苗木，移栽至穴盘培养，获得健壮的穴盘苗；
12、s9、杯苗培育及侧芽促萌：将所述穴盘苗控水至叶片轻度失水，即移栽至育苗杯进行育苗，杯苗定植完成后加强水肥管理，促进壮苗培育，直至达到现行出圃标准。
13、在一些实施方式中，所述s1中，所述优树为引进种子苗起源的岗梅优势单株，所述岗梅优势单株置于种质资源圃，通过扦插方式扩繁，开展品比试验，选择无性繁殖一代稳定表现采穗树性状、粗生速生、成枝力强、一致性好的品系。
14、在一些实施方式中，所述s2中，在8月中旬，对母树主干离地0.4m高度截断，获得所述截枝；
15、所述外植体消毒的步骤包括：在超净工作台内消毒外植体并切分为带芽段，所述带芽段为带2～4个芽，将所述带芽段置于消毒液饱和漂白粉溶液中浸泡15～25min，无菌水漂洗2～3次，漂洗完成转移至0.1％升汞溶液中浸泡8～12min，使用无菌水漂洗4～5次；
16、消毒完成的带芽段重新切割，将所述带芽段中直接接触升汞溶液的叶柄和枝条切口切短0.3～0.5cm，切割完成的带侧芽或顶芽的带芽段接种于不含激素的所述改良ms培养基，所述改良ms培养基的kh2po4浓度为340mg/l，kno3浓度改良为1400mg/l，ca(no3)2·4h2o浓度708mg/l，省去氯化钙，其余与非ms培养基相同；培养时，所述改良ms培养基加入蔗糖30g/l，卡拉胶6.5g/l，培养前，所述改良ms培养基以121℃消毒20min，培养时间为10～15天，培养温度25～28℃，光照时间每天10～12h，光照强度1200～1500lx，保留未污染的外植体枝段。
17、在一些实施方式中，述s3中，所述改良启动培养基的配方包括改良ms、6-ba1.0mg/l和naa0.1 mg/l，其中改良ms中的kh2po4浓度为340mg/l，kno3浓度改良为1400mg/l，ca(no3)2·4h2o浓度708mg/l，去除氯化钙；培养温度25～28℃，光照时间每天10～12小时，光照强度1200～1500lx，培养时间为15～20天直至所述外植体枝段侧芽萌发；重新培养的时间为28～35天。
18、在一些实施方式中，所述s4中，所述改良继代培养基的配方包括改良ms培养基、6-ba2.0mg/l和naa0.1 mg/l，其中改良ms中的kh2po4浓度为340mg/l，kno3浓度改良为1400mg/l，ca(no3)2·4h2o浓度708mg/l，去除氯化钙；其中，每25～30天重复1次继代培养，将丛生芽切割为带3～5个芽的小丛，转接至相同培养基，重复继代培养6～8次。
19、在一些实施方式中，所述s5中，所述改良壮苗培养基的配方包括改良ms、6-ba0.1mg/l、ad 0.2mg/l和naa0.1 mg/l，其中改良ms中的kh2po4浓度为340mg/l，kno3浓度改良为1400mg/l，ca(no3)2·4h2o浓度708mg/l，去除氯化钙。
20、在一些实施方式中，所述s6中，所述生根培养基的配方包括1/2改良ms、naa0.5mg/l、abt1.0 mg/l、ccc 0.1mg/l和蔗糖20g/l，其中改良ms中的kh2po4浓度为340mg/l，kno3浓度改良为1400mg/l，ca(no3)2·4h2o浓度708mg/l，去除氯化钙；当单芽端部接种至生根培养基8～10天后，基部切口附近区域形成突起的白色根原基；当接种20～25后，根源发育为完整根系。
21、在一些实施方式中，所述s7中，生根苗移炼苗棚温度为22℃～28℃，炼苗时间12～15天，晴天上午9点到下午4点半，炼苗棚棚顶遮阳，其余时间遮本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种南药岗梅优树组培苗培育的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的南药岗梅优树组培苗培育的方法，其特征在于，所述S1中，所述优树为引进种苗起源的岗梅优势单株，所述岗梅优势单株置于种质资源圃，通过扦插方式扩繁，开展品比试验，选择无性繁殖一代稳定表现采穗树性状、粗生速生、成枝力强、一致性好的品系。
3.根据权利要求1所述的南药岗梅优树组培苗培育的方法，其特征在于，所述S2中，在8月中旬，对母树主干离地0.4m高度截断，获得所述截枝；
4.根据权利要求1所述的南药岗梅优树组培苗培育的方法，其特征在于，述S3中，所述改良启动培养基的配方包括改良MS、6-BA1.0 mg/L和NAA 0.1mg/L，其中改良MS中的KH2PO4浓度为340mg/L，KNO3浓度改良为1400mg/L，Ca(NO3)2·4H2O浓度708mg/L，去除氯化钙；培养温度25～28℃，光照时间每天10～12h，光照强度1200～1500lx，培养时间为15～20天直至所述外植体枝段侧芽萌发；重新培养的时间为28～35天。
5.根据权利要求1
6.根据权利要求1所述的南药岗梅优树组培苗培育的方法，其特征在于，所述S5中，所述改良壮苗培养基的配方包括改良MS、6-BA0.1 mg/L、AD 0.2mg/L和NAA0.1 mg/L，其中改良MS中的KH2PO4浓度为340mg/L，KNO3浓度改良为1400mg/L，Ca(NO3)2·4H2O浓度708mg/L，去除氯化钙。
7.根据权利要求1所述的南药岗梅优树组培苗培育的方法，其特征在于，所述S6中，所述生根培养基的配方包括1/2改良MS、NAA 0.5mg/L、ABT1.0 mg/L、CCC 0.1mg/L和蔗糖20g/L，其中改良MS中的KH2PO4浓度为340mg/L，KNO3浓度改良为1400mg/L，Ca(NO3)2·4H2O浓度708mg/L，去除氯化钙；当单芽端部接种至生根培养基8～10天后，基部切口附近区域形成突起的白色根原基；当接种20～25天后，根源发育为完整根系。
8.根据权利要求1所述的南药岗梅优树组培苗培育的方法，其特征在于，所述S7中，生根苗移炼苗棚温度为22℃～28℃，炼苗时间12～15天，晴天上午9点到下午4点半，炼苗棚棚顶遮阳，其余时间遮阳网全开透光；阴雨天，炼苗棚全天遮阳网全开透光；
9.根据权利要求1所述的南药岗梅优树组培苗培育的方法，其特征在于，所述S8中，所述浸泡液的配方包括10％多抗霉素800～1000倍液和0.25％s-诱抗素1500～2000倍液；浸泡时间为10～15min，不经漂洗即移栽；
10.根据权利要求1所述的南药岗梅优树组培苗培育的方法，其特征在于，所述S9中，所述育苗杯装有基质，所述基质的配方包括80％表土、15％泥炭土和5％生物有机肥定植肥；
...【技术特征摘要】
1.一种南药岗梅优树组培苗培育的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的南药岗梅优树组培苗培育的方法，其特征在于，所述s1中，所述优树为引进种苗起源的岗梅优势单株，所述岗梅优势单株置于种质资源圃，通过扦插方式扩繁，开展品比试验，选择无性繁殖一代稳定表现采穗树性状、粗生速生、成枝力强、一致性好的品系。
3.根据权利要求1所述的南药岗梅优树组培苗培育的方法，其特征在于，所述s2中，在8月中旬，对母树主干离地0.4m高度截断，获得所述截枝；
4.根据权利要求1所述的南药岗梅优树组培苗培育的方法，其特征在于，述s3中，所述改良启动培养基的配方包括改良ms、6-ba1.0 mg/l和naa 0.1mg/l，其中改良ms中的kh2po4浓度为340mg/l，kno3浓度改良为1400mg/l，ca(no3)2·4h2o浓度708mg/l，去除氯化钙；培养温度25～28℃，光照时间每天10～12h，光照强度1200～1500lx，培养时间为15～20天直至所述外植体枝段侧芽萌发；重新培养的时间为28～35天。
5.根据权利要求1所述的岗梅优树组培苗培育的方法，其特征在于，所述s4中，所述改良继代培养基的配方包括改良ms培养基、6-ba2.0 mg/l和naa0.1 mg/l，其中改良ms中的kh2po4浓度为340mg/l，kno3浓度改良为1400mg/l，ca(no3)2·4h2o浓度708mg/l，去除氯化钙；其中，每25～30天重复1次继代培养，将丛生芽切割为带3～5个芽的小丛，转接至相同培养基，重复继代培养6～8次。
6.根据权利要求1所述的南药岗梅优...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁秋玲，陈叶海，谢黎黎，陈海坚，徐杨玉，黄梅花，许志文，胡达权，阮兵，班恒英，穆香，黄影华，陈士伟，
申请(专利权)人：广东农垦热带作物科学研究所，
类型：发明
国别省市：
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