一种肠道益生菌制剂的工业生产方法技术

本发明专利技术提供了一种肠道益生菌制剂的工业生产方法，包括(1)将干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、两歧双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种等用发酵罐分别进行大量培养，(2)通过离心和无菌水洗涤获得湿菌泥，将湿菌泥与特殊保护剂按1:1混合均匀，(3)将湿菌泥和保护剂的混合物进行制粒、滚圆、低温真空干燥、包衣，制成肠道益生菌制剂。在本发明专利技术提供的培养条件下，益生菌可高密度生长繁殖，收集得到的湿菌泥不需冷冻干燥，直接与一种特殊保护剂进行真空低温快速干燥且可保持菌体大量存活，节省能源，降低生产成本。

【技术实现步骤摘要】
一种肠道益生菌制剂的工业生产方法
本专利技术涉及微生物制剂领域，具体涉及一种肠道益生菌制剂的工业生产方法。
技术介绍
益生菌(Probiotics)是指通过定殖作用改变宿主某一部位菌群的组成、从而产生有利于宿主健康作用的单一或组成明确的混合微生物。通过调节宿主黏膜与系统免疫功能以及改善肠道营养与菌群平衡对宿主产生有益的生理作用。益生菌大致分为三类，其中包括乳杆菌(如嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、詹氏乳杆菌、拉曼乳杆菌等)，双歧杆菌(如长双歧杆菌、短双歧杆菌、卵形双歧杆菌、嗜热双歧杆菌等)，革兰式阳性球菌(如粪链球菌、乳球菌、中介链球菌等)，此外，还有一些酵母也可归入益生菌的范畴。尽管部分乳杆菌和双歧杆菌不能以活菌状态到达肠道，并在那里定殖，但其细胞壁成分仍可以发挥抗瘤变和免疫调节作用，例如热灭活的Lb.caseiLC9018仍对人体健康具有促进作用，至今为止，乳杆菌仍然是应用最广泛的益生菌。目前常用作益生菌的乳杆菌有L.delbruekiisubsp.bulgaricus、Lb.acidophilus、Lb.casei、Lb.fermentum、Lb.reuteri、Lb.rhamnosus、Lb.plantarum、Lb.lactis、Lb.gasseri、Lb.johnsonii等。具有益生作用的乳酸菌通常都是肠道细菌，它们被认为具有改善人体胃肠消化道微生态环境的功能。益生作用的范围可以分为营养、生理作用和抗菌作用等三个方面。在这些方面研究及观察到的作用直接导致了各种含有乳酸菌的食品及饲料在人和动物中的应用。乳酸菌还具有潜在免疫辅助作用，口服乳酸菌可以激发黏膜和系统性免疫反应。双歧杆菌和嗜酸乳杆菌是人体中固有的有益菌，双歧杆菌和嗜酸乳杆菌占人体肠道内益生菌的95％以上，它们主要是通过维护肠道的微生态平衡而起到促进人体健康的作用的。二者在肠道中的作用是相似的，但存在的部位不同，嗜酸乳杆菌在肠道的上半部，而双歧杆菌在肠道的下半部。因此，双歧杆菌和嗜酸乳杆菌相辅相成，共同维护着整个肠道的健康。益生菌综合起来具有以下几方面的作用：(1)提高免疫力：双歧杆菌和嗜酸乳杆菌可产生大量的免疫球蛋白。从而激活机体的免疫细胞，使得外在菌难以留存体内，达到免疫调节作用。(2)改善胃肠道功能：双歧杆菌和嗜酸乳杆菌在肠道粘膜表面形成保护屏障，抵御有害菌对肠道粘膜的侵袭破坏，能产生乳酸和醋酸等酸性物质，造成不利于有害菌生长的环境，抑制有害菌的生长、繁殖，起到调节肠道菌群的作用。(3)营养作用：双歧杆菌和嗜酸乳杆菌在人体肠道内发酵后可产生乳酸和醋酸，能提高钙、磷、铁的利用率，促进铁和维生素D的吸收，产生维生素K及维生素B，产生乳糖酶帮助消化乳糖。(4)通肠润便：双歧杆菌和嗜酸乳杆菌在肠内可产生大量的短链脂肪酸等酸性物质，能刺激肠道蠕动，增加粪便湿度，起到通便的效果。(5)恢复因使用抗生素后而被破坏的肠道正常微生物菌群：抗生素是引起肠道菌群失调的重要因素。抗生素在杀灭有害菌的同时，也杀灭了很多的有益菌，及时补充双岐杆菌和嗜酸乳杆菌，对帮助肠道恢复菌群平衡、提高营养吸收能力是非常必要的。(6)降低胆固醇、防止动脉硬化。(7)抑制内毒素的产生，延缓衰老。(8)抑制肠道中致癌因子的产生，预防肿瘤的发生。(9)抗辐射等。肠道微生态制剂产品的研究和开发会给人类的健康带来积极的促进意义，具有重要的经济价值和社会健康意义。专利申请CN107259578A公开了一种益生菌制品及其制备方法，包括植物乳杆菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、瑞士乳杆菌、保加利亚乳杆菌、副干酪乳杆菌等多种益生菌，并公开了相应的制备方法，通过将菌泥加入保护剂，乳化均匀后进行冷冻干燥或喷雾干燥，制成高浓度活菌粉，该益生菌制品功能多样，携带及饮用方便。专利申请CN107998152A公开了一种结肠释放的益生菌片，益生菌包含长双歧杆菌、两歧双歧杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种的一种或几种，并公开了相应的制备方法，制成的益生菌片可以提高益生菌到达结肠的存活率，提高服药人的适应性。然而，现有技术中在将湿菌泥进行加工处理时，往往需要冷冻干燥等对设备要求高且高耗能的步骤，而且还会造成大量菌体的死亡，降低菌体的整体活力，从而造成益生菌制剂中活菌数量少的缺点。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供一种肠道益生菌制剂的工业生产方法，在本专利技术提供的培养条件下，益生菌可高密度生长繁殖，收集得到的湿菌泥不需冷冻干燥，直接与一种特殊保护剂进行真空低温快速干燥且可保持菌体大量存活，节省能源，降低生产成本。本专利技术提供了一种肠道益生菌制剂的工业生产方法，包括以下步骤：(1)分别发酵培养干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、两歧双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种，当发酵液中益生菌总数达标时，结束发酵培养；(2)收集步骤(1)所得的各菌种的发酵液并混合，离心并洗涤后得到活性湿菌泥，将湿菌泥与保护剂混合均匀，得到菌泥保护剂混合物，其中湿菌泥与保护剂的比例为1：1；(3)将步骤(2)所得到的菌泥保护剂混合物依次经过制粒机、滚圆机、干燥剂、包衣机进行制粒、滚圆、低温真空干燥、包衣，经检测合格后即得到肠道益生菌制剂。进一步地，在步骤(1)中，发酵培养的培养基配方为：大豆肽0.1-5.0g、乳清粉1.0-5.0g、葡萄糖5.0-15.0g、乳糖2.0-6.0g、胰酶水解酪蛋白2.0-15.0g、牛肉膏2.0-10.0g、酵母膏1.5-5.5g、柠檬酸钠1.0-5.0g、醋酸钠1.0-5.5g、磷酸氢二钾0.2-2.5g、硫酸镁0.1-0.75g、L-半胱氨酸盐酸盐0.001-0.1g、西红柿汁2.0-25g、吐温-800.5-2.0mL、加水定容至1000mL，pH6.0-7.0，105℃灭菌15分钟。进一步地，在步骤(1)中，发酵培养的具体方法为：首先分别培养试管斜面菌种，斜面菌种培养基中加入2％的琼脂，培养16-24小时，然后接入三角瓶液体培养基中进行分别培养，30℃-45℃培养18-72小时，再逐级进行扩大培养，然后再分别进行大罐发酵培养，30℃-45℃培养18-72小时。进一步地，在步骤(1)中，当发酵液中益生菌总数达到1.5-5.0×109cfu/mL时，结束发酵培养。进一步地，在步骤(2)中，离心转速为5000-10000r/min，收集菌体沉淀，用无菌水洗涤菌体沉淀1-2次，得到活性湿菌泥。进一步地，步骤(2)中的保护剂的原料包括：聚γ-谷氨酸(γ-PGA)、甘油、低聚异麦芽糖、低聚果糖、脱脂乳粉、大豆肽、多孔淀粉。更进一步地，步骤(2)中的保护剂的原料包括：聚γ-谷氨酸(γ-PGA)0.2％-2.0％、甘油0.2％-5.0％、低聚异麦芽糖0.5％-10％、低聚果糖0.5％-10％、脱脂乳粉0.5％-5.0％、大豆肽0.5％-5.0％、多孔淀粉10.0％-80.0％。在一个优选的实施方案中，步骤(2)中的保护剂的原料包括：聚γ-谷氨酸(γ-PGA)1.0％-2.0％、甘油0.5％-3.0％、低聚异麦芽糖2.0％-10％、低聚果糖0.5％-8.0％、脱脂乳粉1.0％-4.5％、大豆肽1.0％-4.0％、多孔淀粉15.0％-80.0％。更进本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肠道益生菌制剂的工业生产方法，其特征在于包括以下步骤：(1)分别发酵培养干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、两歧双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种，当发酵液中益生菌总数达标时，结束发酵培养；(2)收集步骤(1)所得的各菌种的发酵液并混合，离心并洗涤后得到活性湿菌泥，将湿菌泥与保护剂混合均匀，得到菌泥保护剂混合物，其中湿菌泥与保护剂的比例为1：1；(3)将步骤(2)所得到的菌泥保护剂混合物依次经过制粒机、滚圆机、干燥机、包衣机进行制粒、滚圆、低温真空干燥、包衣，经检测合格后即得到肠道益生菌制剂。

【技术特征摘要】
1.一种肠道益生菌制剂的工业生产方法，其特征在于包括以下步骤：(1)分别发酵培养干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、两歧双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种，当发酵液中益生菌总数达标时，结束发酵培养；(2)收集步骤(1)所得的各菌种的发酵液并混合，离心并洗涤后得到活性湿菌泥，将湿菌泥与保护剂混合均匀，得到菌泥保护剂混合物，其中湿菌泥与保护剂的比例为1：1；(3)将步骤(2)所得到的菌泥保护剂混合物依次经过制粒机、滚圆机、干燥机、包衣机进行制粒、滚圆、低温真空干燥、包衣，经检测合格后即得到肠道益生菌制剂。2.按照权利要求1所述的肠道益生菌制剂的工业生产方法，其特征在于，步骤(1)中发酵培养的培养基配方为：大豆肽0.1-5.0g、乳清粉1.0-5.0g、葡萄糖5.0-15.0g、乳糖2.0-6.0g、胰酶水解酪蛋白2.0-15.0g、牛肉膏2.0-10.0g、酵母膏1.5-5.5g、柠檬酸钠1.0-5.0g、醋酸钠1.0-5.5g、磷酸氢二钾0.2-2.5g、硫酸镁0.1-0.75g、L-半胱氨酸盐酸盐0.001-0.1g、西红柿汁2.0-25g、吐温-800.5-2.0mL、加水定容至1000mL，pH6.0-7.0，105℃灭菌15分钟。3.按照权利要求1所述的肠道益生菌制剂的工业生产方法，其特征在于，步骤(1)中发酵培养的具体方法为：首先分别培养试管斜面菌种，斜面菌种培养基中加入2％的琼脂，培养16-24小时，然后接入三角瓶液体培养基中进行分别培养，30℃-45℃培养18-72小时，再逐级进行扩大培养，然后再分别进行大罐发酵培养，30℃-45℃培养18-72小时。4.按照权利要求1所述的肠道益生菌制剂的工业生产方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁金钟，秦琦，肖雯娟，林枫翔，
申请(专利权)人：哈尔滨美华生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23