The invention discloses a method for culturing immune cells, which comprises the following steps: S1. isolation of mononuclear cells; S2. separation and inactivation of plasma; S3. induction and culture of immune cells in vitro; S4. cell activity analysis and phenotypic analysis. The method of immune cell culture of the invention has simple steps and high culture efficiency, and is beneficial to carrying out a large number of immune cell application tests or clinical use of immune cells in clinic. Experiments show that the immune cell culture method of the present invention has the advantages of fast growth rate, high value-added rate and larger colony formation, which is beneficial to improving the culture efficiency of immune cells, and has a considerable application prospect in clinical practice of immune cells.
【技术实现步骤摘要】
一种免疫细胞培养方法及其应用
本专利技术涉及免疫细胞
，具体地，涉及一种免疫细胞培养方法及其应用。
技术介绍
自然杀伤细胞(naturalkillercell，NK)是机体重要的免疫细胞，不仅与抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节有关，而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生，能够识别靶细胞、杀伤介质。虽然NK细胞行使重要的免疫监视功能,但在一些情形下NK细胞的过度活化会导致不必要的组织损伤、甚至危及生命，因而，机体需要通过某种方式维持NK细胞的活性,使之处于可控的范围内,从而维持NK细胞对自身的耐受。与T、B细胞的免疫耐受相比较，维持NK细胞对自身耐受的研究较少，目前认为可以通过抑制性受体介导的方式或活化后诱导的细胞凋亡来实现，而抑制性受体在NK细胞与辅助细胞之间相互作用的过程中发挥重要的调控功能。在富含NK细胞的肝脏中，NK细胞与辅助细胞之间的相互作用是NK细胞介导的天然免疫应答的重要环节，通过研究抑制性受体在NK细胞介导的肝脏天然免疫应答中的调控作用及对后者造成的病理变化的影响，将有助于了解NK细胞维持自身耐受的机制。
技术实现思路
针对现有技术的上述不...
【技术保护点】
1.一种免疫细胞培养方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.分离单个核细胞；S2.血浆的分离与灭活；S3.免疫细胞的体外诱导培养；S4.细胞活性分析及表型分析。
【技术特征摘要】
1.一种免疫细胞培养方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.分离单个核细胞；S2.血浆的分离与灭活；S3.免疫细胞的体外诱导培养；S4.细胞活性分析及表型分析。2.根据权利要求1所述的免疫细胞培养方法，其特征在于，步骤S1还包括以下步骤：(1)将血液置于有抗凝剂的试管中，再将血液轻轻倒入含有淋巴细胞分离液试管中，不需要将血液和淋巴细胞分离液混匀，25℃，1000rpm，离心20min，上下加速度均为0；(2)离心后，血液被分为四层，上层的血浆、血浆和分离液之间的单核细胞处于第二层、第三层的淋巴细胞分离液及第四层的红细胞；用吸管将第2层单核细胞以及3层分离液收集至灭菌过的离心管中，加入等量的PBS，然后25℃，2000rpm，离心10min，上下加速度均为0；(3)重复上述步骤2次，最后进行重悬调整，计数备用。3.根据权利要求1所述的免疫细胞培养方法，其特征在于，步骤S2还包括以下步骤：(1)用无菌吸管采集上层的血浆，倒入灭菌过的离心管中，不要吸取到第2层的单核细胞；(2)然后置于62-65℃水浴锅中热灭活10min，25℃，1000rpm，离心10min，吸取上清液于灭菌的离...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐智峰，张新，
申请(专利权)人：广州沙艾生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44
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