一种体外培养诱导的调节型巨噬细胞用于心肌保护的方法技术

本发明专利技术公开了一种体外培养诱导的调节型巨噬细胞用于心肌保护的方法，包含以下步骤：S1：提取骨髓来源巨噬细胞，培养诱导调节型巨噬细胞，所有操作均在无菌情况下进行；S2：制备巨噬细胞悬液：调节型巨噬细胞使用前使用胰酶消化重悬至生理盐水中；S3：细胞移植。调节型巨噬细胞首次被提出用于心肌保护，调节型巨噬细胞作为新型心肌保护方法，兼顾提高心肌保护近期和远期效果，提高患者生活质量，进一步可为多种器官的缺血再灌注损伤和器官纤维化的治疗提供借鉴经验，骨髓穿刺取自体骨髓，经体外培养及诱导，培养出调节型巨噬细胞，移植至患者心肌，因其近远期的心肌保护效果，达到改善心功能、减少术后并发症、降低远期心脏纤维化的作用。

An in vitro culture induced macrophage for myocardial protection

The invention discloses a method for culturing induced regulatory macrophages for myocardial protection in vitro, which comprises the following steps: S1: extracting macrophages from bone marrow, culturing induced regulatory macrophages, all operations are carried out under aseptic conditions; S2: preparing macrophage suspension: making regulatory macrophages before use. Trypsin digestion was suspended to normal saline; S3: cell transplantation. Regulatory macrophages are proposed for myocardial protection for the first time. Regulatory macrophages as a new myocardial protection method can improve both short-term and long-term effects of myocardial protection and improve the quality of life of patients. It can provide reference for the treatment of multiple organ ischemia-reperfusion injury and organ fibrosis. Autologous bone marrow was cultured and induced in vitro to produce regulatory macrophages and transplanted into patients'myocardium. Because of its short-term and long-term myocardial protection effect, it can improve cardiac function, reduce postoperative complications and reduce long-term cardiac fibrosis.

【技术实现步骤摘要】
一种体外培养诱导的调节型巨噬细胞用于心肌保护的方法
本专利技术涉及心肌保护方法
，具体为一种体外培养诱导的调节型巨噬细胞用于心肌保护的方法。
技术介绍
目前心肌保护措施往往局限于对炎症损伤的干预，缺少对远期纤维化的干预，而心肌损伤后纤维化也是影响患者预后的重要因素之一，为此专利技术了一种体外培养诱导的调节型巨噬细胞用于心肌保护的方法用于解决上述弊端，调节型巨噬细胞有别称为M2b型巨噬细胞。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种体外培养诱导的调节型巨噬细胞用于心肌保护的方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种体外培养诱导的调节型巨噬细胞用于心肌保护的方法，该方法包括以下步骤：S1：提取骨髓来源巨噬细胞，培养诱导调节型巨噬细胞，所有操作均在无菌情况下进行，具体操作如下：一、骨髓穿刺取患者自体骨髓，体外重悬至RPMI-1640培养基中，200目滤网过滤，500g离心5min，弃上清，红细胞裂解液裂解红细胞，重悬细胞至BMM培养基；二、细胞置于37℃、50mL/LCO2培养箱，每2-3天换液(每次换液需加新鲜M-CSF)，7天成为成熟单核本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种体外培养诱导的调节型巨噬细胞用于心肌保护的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：S1：提取骨髓来源巨噬细胞，培养诱导调节型巨噬细胞，所有操作均在无菌情况下进行，具体操作如下：一、骨髓穿刺取患者自体骨髓，体外重悬至RPMI‑1640培养基中，200目滤网过滤，500g离心5min，弃上清，红细胞裂解液裂解红细胞，重悬细胞至BMM培养基；二、细胞置于37℃、50mL/L CO2培养箱，每2‑3天换液(每次换液需加新鲜M‑CSF)，7天成为成熟单核‑巨噬细胞(M0)；三、诱导成熟的M0如下刺激48h：鸡卵清蛋白(OVA)‑lgG免疫复合物(15μg/ml OVA和150μg/ml抗OVA‑l...

【技术特征摘要】
1.一种体外培养诱导的调节型巨噬细胞用于心肌保护的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：S1：提取骨髓来源巨噬细胞，培养诱导调节型巨噬细胞，所有操作均在无菌情况下进行，具体操作如下：一、骨髓穿刺取患者自体骨髓，体外重悬至RPMI-1640培养基中，200目滤网过滤，500g离心5min，弃上清，红细胞裂解液裂解红细胞，重悬细胞至BMM培养基；二、细胞置于37℃、50mL/LCO2培养箱，每2-3天换液(每次换液需加新鲜M-CSF)，7天成为成熟单核-巨噬细胞(M0)；三、诱导成熟的M0如下刺激48h：鸡卵清蛋白(OVA)-lgG免疫复合物(15μg/mlOVA和150...

【专利技术属性】
技术研发人员：岳媛，王乐旬，杨潇，黄穗青，梁孟亚，陈光献，梅波，杨嵩，侯建，李华扬，黄少杰，吴钟凯，
申请(专利权)人：中山大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：广东,44