一种生物肽复合抗氧化剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种生物肽复合抗氧化剂的制备方法，属于抗氧化剂制备技术领域。本发明专利技术为了提高迷迭香提取率，在浸取之前将植物原料冷冻干燥，这样有助于细胞膜和细胞壁的破裂，脂质过氧化会使食品酸败，影响其风味、味道和营养价值，食品中添加抗氧化剂的主要目的就是为了延迟、阻止或抑制食品的自氧化，本发明专利技术的菜籽油酸首先能提高迷迭香提取物和生物肽的油溶性能，并且在氧气因素作用下，发生氧化反应生成烷基自由基和烷基过氧自由基，这样氮氧自由基不断重生，在重生过程中，不断释放氢原子，使生物肽的抗氧化作用得到重生，使得抗氧过程得以延续下去，抗氧化时间长，生成的抗氧剂中间体受到苯环的共轭作用，具有很高的稳定性，应用前景广阔。

Preparation method of biological peptide compound antioxidant

The invention discloses a preparation method of biological peptide composite antioxidant, belonging to the field of antioxidant preparation technology. In order to improve the extraction rate of rosemary, plant raw materials are freeze-dried before extraction, which is helpful to the rupture of cell membrane and cell wall. Lipid peroxidation can make food rancid and affect its flavor, taste and nutritional value. The main purpose of adding antioxidants in food is to delay, prevent or inhibit food. The rapeseed oleic acid of the present invention can first improve the oil-solubility of rosemary extract and bio-peptide, and under the action of oxygen factor, the oxidation reaction occurs to produce alkyl radical and alkyl peroxide radical, so that the nitrogen and oxygen radicals are constantly regenerated, and hydrogen atoms are continuously released in the process of regeneration to make the bio-peptide. The antioxidant reactivation makes the antioxidant process continue and the antioxidant time is long. The antioxidant intermediates generated are conjugated by benzene rings, which have high stability and broad application prospects.

【技术实现步骤摘要】
一种生物肽复合抗氧化剂的制备方法
本专利技术公开了一种生物肽复合抗氧化剂的制备方法，属于抗氧化剂制备

技术介绍
抗氧化剂是阻止氧气不良影响的物质。为了适应从海洋生物演变为陆地生物，陆生植物开始产生海洋生物所不具有的抗氧化剂，比如维生素C、多酚和生育酚，而生物学对抗氧剂的研究早期集中在是如何使用抗氧化剂来避免不饱和脂肪酸氧化引起的酸败。抗氧化剂除了对生物体的健康有影响外，还可作为食品防腐剂、工业稳定剂使用。生物学对抗氧剂的研究早期集中在是如何使用抗氧化剂来避免不饱和脂肪酸氧化引起的酸败。可以通过将一块脂肪置于一个充氧的密封容器后对其氧化速率进行测定的简单方法度量抗氧化活性。然而随着具有抗氧化作用的维生素A、C、E的发现和确认，人们意识到抗氧化剂在生物体内起到生化作用的重要性。当认识到具有抗氧化活性的物质可能本身就容易被氧化的事实后，对抗氧化剂可能作用机理的探索首先开始。通过研究维生素E如何防止脂质过氧化，明确了抗氧化剂作为还原剂通过与活性氧物质反应来避免活性氧物质对细胞的破坏，达到抗氧化的效果。根据溶解性抗氧化剂可分为两大类：水溶性抗氧化剂和脂溶性抗氧化剂。水溶性抗氧化剂通常存在于细胞质基质和血浆中，脂溶性抗氧化剂则保护细胞膜的脂质免受过氧化。这些化合物或在人体内生物合成或通过膳食摄取。不同抗氧化剂以一定范围的浓度分布于体液和组织中。谷胱甘肽和辅酶Q10主要存在于细胞中，而其他抗氧化剂比如尿酸它们的分布更为广泛。一些抗氧化剂由于既有抗氧化作用也是重要的病原体和致病因子所以只存在于某些特定机体组织中。目前天然抗氧化物质主要是从动植物中提取的，如维生素类、酶类和天然药物类等。人工合成抗氧化剂用于防止食用油脂氧化败坏时存在着食用安全隐患，并且抗氧化活性低，抗氧化剂的油溶性差，通过酶解动植物蛋白得到的生物活性肽具较好的抗氧化活性，但是抗氧化时间短的缺陷。因此，专利技术一种抗氧化性好且抗氧化时间长的生物肽复合抗氧化剂对抗氧化剂制备
具有积极意义。
技术实现思路
本专利技术主要解决的技术问题，针对目前人工合成抗氧化剂用于防止食用油脂氧化败坏时存在着食用安全隐患，并且抗氧化活性低，抗氧化剂的油溶性差，通过酶解动植物蛋白得到的生物活性肽具较好的抗氧化活性，但是抗氧化时间短的缺陷，提供了一种生物肽复合抗氧化剂的制备方法。为了解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案是：一种生物肽复合抗氧化剂的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）取新鲜的藿香叶置于冷冻干燥机中冷冻，将藿香叶从冷冻干燥机中取出，粉碎藿香叶并过筛，收集得到藿香叶干粉；（2）将藿香叶干粉分散于无水乙醇中，以200～250r/min的转速进行搅拌，并加热升温，搅拌分散2～4h，得到提取液，将提取液置于高速离心机中离心处理，分离去除下层沉淀，收集上层液；（3）将上述上层液置于蒸馏瓶中加热升温，回流得到迷迭香提取物，将迷迭香提取物进行超临界二氧化碳萃取，合并收集得到一级分离釜和二级分离釜中的迷迭香萃取液，备用；（4）将菜籽油、氢氧化钠、乙醇溶液按质量比混合搅拌15～20min，得到混合液，将混合液置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入盐酸，调节混合液pH，静置分液去除水层得到油层，用蒸馏水水洗油层3～5次后，得到菜籽油酸；（5）将活性干酵母加水配制成酵母乳，用柠檬酸钠溶液调节酵母乳的pH，加热升温，加入混合蛋白酶，酶解得到酶解液；（6）按重量份数计，将40～50份上述酶解液、20～25菜籽油酸、30～35迷迭香萃取液混合置于高速剪切机中，同时添加4～5份抗坏血酸，剪切乳化，得到混合乳液，将混合乳液放入旋蒸仪中，旋蒸10～15min，取下旋蒸瓶置于真空干燥箱中干燥，得到生物肽复合抗氧化剂。步骤（1）所述的冷冻干燥温度为-30～-20℃，冷冻时间为4h～5h，冷冻干燥压强为10～15MPa，所过筛规格为200目。步骤（2）所述的料液质量比为1:8，加热升温后温度为40～50℃，高速离心机离心转速为3000～3500r/min，离心处理时间为20～30min。步骤（3）所述的加热升温后温度为100～110℃，回流时间为4～5h，控制超临界萃取压力为20～22MPa，萃取温度为48～50℃，一级分离压力为8.5～9.0MPa，二级分离压力为5.0～6.0MPa，萃取时间为4～5h。步骤（4）所述的乙醇溶液的质量分数为75%，菜籽油、氢氧化钠、乙醇溶液混合质量比为5︰1︰10，盐酸的质量分数为20%，调节混合液pH为2～3，静置时间为5～8min。步骤（5）所述的酵母乳的质量分数为15％，柠檬酸钠溶液的质量分数为20%，调节酵母乳的pH为4.5～5.0，加热升温后温度为50～55℃，加入的混合蛋白酶为酵母乳质量0.5%，其中混合蛋白酶由木瓜蛋白酶和细菌蛋白酶按质量比2:1混合而成，酶解时间为4～6h。步骤（6）所述的剪切转速为3000～4000r/min，剪切乳化时间为20～25min，旋蒸温度为90～110℃，干燥温度为50～60℃，干燥时间为3～4h。本专利技术的有益效果是：（1）本专利技术以新鲜的藿香叶为原料，冷冻干燥后粉碎成藿香叶干粉，将藿香叶干粉分散于乙醇中，通过加热搅拌的方式得到提取液，对提取液进行离心处理，收集上层液，再将上层液蒸馏浓缩得到迷迭香提取物，进行超临界二氧化碳萃取，收集两级分离釜的迷迭香萃取液，将菜籽油、氢氧化钠、乙醇溶液混合并用盐酸酸化，静置分液并水洗，得到菜籽油酸，将活性干酵母配制成酵母乳，用柠檬酸钠溶液调节pH，加热处理并添加混合蛋白酶，酶解得到酶解液，最后将酶解液、菜籽油酸、迷迭香萃取液混合剪切，同时添加抗坏血酸防氧化，得到混合乳液，经过旋蒸处理后，真空干燥旋蒸瓶，得到生物肽复合抗氧化剂，本专利技术为了提高迷迭香提取率，在浸取之前将植物原料冷冻干燥，这样有助于细胞膜和细胞壁的破裂，溶剂也容易进入细胞内部直接溶解溶质，从而高效提取出高抗氧化性的迷迭香提取物；（2）脂质过氧化会使食品酸败，影响其风味、味道和营养价值，食品中添加抗氧化剂的主要目的就是为了延迟、阻止或抑制食品的自氧化，以延长食品的保质期和减少营养物质的损失，脂质过氧化包括夺氢形成脂质自由基，脂质自由基与氧反应形成脂质氢过氧自由基，脂质氢过氧自由基从另一个脂质分子中夺氢引发反应链，抗氧化剂通过提供氢原子来阻断反应链，本专利技术的菜籽油酸首先能提高迷迭香提取物和生物肽的油溶性能，并且在氧气因素作用下，发生氧化反应生成烷基自由基和烷基过氧自由基，这些烷基自由基和烷基过氧自由基与迷迭香提取物中的酚酸类物质和活性生物肽反应生成氮自由基和活性较低的醇和酸类化合物，氮自由基在苯环共轭效应影响下变的非常稳定，没有足够的活性与酯类油分子反应，只能与其他自由基反应，它们会和过氧自由基继续反应生成氮氧自由基，这样氮氧自由基不断重生，在重生过程中，不断释放氢原子，从而阻断脂质的氧化反应链，使生物肽的抗氧化作用得到重生，使得抗氧过程得以延续下去，抗氧化时间长，生成的抗氧剂中间体受到苯环的共轭作用，具有很高的稳定性，应用前景广阔。具体实施方式取新鲜的藿香叶置于冷冻干燥机中，在-30～-20℃条件下冷冻4～5h，冷冻干燥的压强为10～15MPa，将藿香叶从冷冻干燥机中取出，粉碎藿香叶，并过200目筛，收集得到藿香叶干粉本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生物肽复合抗氧化剂的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）取新鲜的藿香叶置于冷冻干燥机中冷冻，将藿香叶从冷冻干燥机中取出，粉碎藿香叶并过筛，收集得到藿香叶干粉； （2）将藿香叶干粉分散于无水乙醇中，以200～250r/min的转速进行搅拌，并加热升温，搅拌分散2～4h，得到提取液，将提取液置于高速离心机中离心处理，分离去除下层沉淀，收集上层液；（3）将上述上层液置于蒸馏瓶中加热升温，回流得到迷迭香提取物，将迷迭香提取物进行超临界二氧化碳萃取，合并收集得到一级分离釜和二级分离釜中的迷迭香萃取液，备用；（4）将菜籽油、氢氧化钠、乙醇溶液按质量比混合搅拌15～20min，得到混合液，将混合液置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入盐酸，调节混合液pH，静置分液去除水层得到油层，用蒸馏水水洗油层3～5次后，得到菜籽油酸； （5）将活性干酵母加水配制成酵母乳，用柠檬酸钠溶液调节酵母乳的pH，加热升温，加入混合蛋白酶，酶解得到酶解液；（6）按重量份数计，将40～50份上述酶解液、20～25菜籽油酸、30～35迷迭香萃取液混合置于高速剪切机中，同时添加4～5份抗坏血酸，剪切乳化，得到混合乳液，将混合乳液放入旋蒸仪中，旋蒸10～15min，取下旋蒸瓶置于真空干燥箱中干燥，得到生物肽复合抗氧化剂。...

【技术特征摘要】
1.一种生物肽复合抗氧化剂的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）取新鲜的藿香叶置于冷冻干燥机中冷冻，将藿香叶从冷冻干燥机中取出，粉碎藿香叶并过筛，收集得到藿香叶干粉；（2）将藿香叶干粉分散于无水乙醇中，以200～250r/min的转速进行搅拌，并加热升温，搅拌分散2～4h，得到提取液，将提取液置于高速离心机中离心处理，分离去除下层沉淀，收集上层液；（3）将上述上层液置于蒸馏瓶中加热升温，回流得到迷迭香提取物，将迷迭香提取物进行超临界二氧化碳萃取，合并收集得到一级分离釜和二级分离釜中的迷迭香萃取液，备用；（4）将菜籽油、氢氧化钠、乙醇溶液按质量比混合搅拌15～20min，得到混合液，将混合液置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入盐酸，调节混合液pH，静置分液去除水层得到油层，用蒸馏水水洗油层3～5次后，得到菜籽油酸；（5）将活性干酵母加水配制成酵母乳，用柠檬酸钠溶液调节酵母乳的pH，加热升温，加入混合蛋白酶，酶解得到酶解液；（6）按重量份数计，将40～50份上述酶解液、20～25菜籽油酸、30～35迷迭香萃取液混合置于高速剪切机中，同时添加4～5份抗坏血酸，剪切乳化，得到混合乳液，将混合乳液放入旋蒸仪中，旋蒸10～15min，取下旋蒸瓶置于真空干燥箱中干燥，得到生物肽复合抗氧化剂。2.根据权利要求1所述的一种生物肽复合抗氧化剂的制备方法，其特征在于：步骤（1）所述的冷冻干燥温度为-30～-20℃，冷冻时间为4h～5h，冷冻干燥压强为10～15MPa，所过筛规格为200目。3.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘茂龙，邓博，朱彩娣，
申请(专利权)人：佛山皖阳生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44