用于检测C反应蛋白的试剂的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种制备用于检测CRP的试剂的方法，包括1)使用缓冲液稀释第一微球和第一抗体，得到所述第一微球与第一抗体的混合溶液，加入交联剂进行孵育，加入封闭剂封闭，得到经标记的第一微球；2)使用缓冲液稀释第二微球和第二抗体，得到所述第二微球与第二抗体的混合溶液，加入交联剂进行孵育，加入封闭剂封闭，得到经标记的第二微球；3)将所述经标记的第一微球与经标记的第二微球混合；其中，所述第一微球和第二微球为直径不同的羧基微球；所述第一抗体与第二抗体不同；所述缓冲液的pH为6.3～9.5。本发明专利技术还涉及由该方法制备得到的试剂及含有该试剂的试剂盒。

Preparation of reagents for the detection of C reactive protein

The invention relates to a method for preparing reagents for CRP detection, including 1) diluting the first microsphere and the first antibody with a buffer, obtaining a mixture solution of the first microsphere and the first antibody, incubating with a cross-linking agent, sealing with a blocking agent, and obtaining a labeled first microsphere; 2) diluting the second microsphere with a buffer. The labeled second microsphere is obtained by mixing the second microsphere with the second antibody, incubating with crosslinking agent, sealing with blocking agent, and mixing the labeled first microsphere with the labeled second microsphere, in which the first microsphere and the second microsphere are carboxylic with different diameters. The first antibody is different from the second antibody; the pH of the buffer is 6.3 to 9.5. The invention also relates to a reagent prepared by the method and a kit containing the reagent.

【技术实现步骤摘要】
用于检测C反应蛋白的试剂的制备方法
本专利技术属于免疫检测领域，具体涉及一种制备用于检测C反应蛋白的试剂的方法。
技术介绍
C-反应蛋白(C-reactiveprotein，CRP)由肝细胞合成，在胎儿期产生，非母体胎盘传递。其产生机理是：当机体受感染或组织受损伤时巨噬细胞和其他白细胞等被激活，产生白细胞介素-6、白细胞介素-1、肿瘤坏死因子TNF-a等细胞因子及其他介导物，这些细胞因子和介导物到达肝脏，刺激肝细胞和上皮细胞合成CRP。在结构上，CRP含5个多肽链亚单位，非共价地结合为盘形多聚体，分子量为11.5万～14万，CRP是一种典型的急性时相蛋白。CRP可用于评价感染，组织损伤和炎症性疾病。参考值通常被认为是临床上含量高于10mg/L。在健康人群血液中CRP水平低于5mg/L，而在各种条件下，急性炎症4～8小时内，CRP值达到约20至500mg/L。作为急性炎症评估指标比红细胞沉降率(ESR)和白细胞计数更敏感、更可靠。研究表明，低浓度的CRP(＜3mg/L)也可作为心血管疾病风险识别的辅助手段。配合传统的急性冠脉综合征临床诊断使用，可作为冠状动脉疾病或急性冠脉综合征复发的预本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备用于检测CRP的试剂的方法，所述方法包括以下步骤：1)使用缓冲液稀释第一微球和第一抗体，得到所述第一微球与第一抗体的混合溶液，加入交联剂进行孵育，加入封闭剂封闭，得到经标记的第一微球；2)使用缓冲液稀释第二微球和第二抗体，得到所述第二微球与第二抗体的混合溶液，加入交联剂进行孵育，加入封闭剂封闭，得到经标记的第二微球；3)将所述经标记的第一微球与经标记的第二微球混合；其中，所述第一微球和第二微球为直径不同的羧基微球；所述第一抗体与第二抗体不同；所述缓冲液的pH为6.3～9.5。

【技术特征摘要】
1.一种制备用于检测CRP的试剂的方法，所述方法包括以下步骤：1)使用缓冲液稀释第一微球和第一抗体，得到所述第一微球与第一抗体的混合溶液，加入交联剂进行孵育，加入封闭剂封闭，得到经标记的第一微球；2)使用缓冲液稀释第二微球和第二抗体，得到所述第二微球与第二抗体的混合溶液，加入交联剂进行孵育，加入封闭剂封闭，得到经标记的第二微球；3)将所述经标记的第一微球与经标记的第二微球混合；其中，所述第一微球和第二微球为直径不同的羧基微球；所述第一抗体与第二抗体不同；所述缓冲液的pH为6.3～9.5。2.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤1)中的缓冲液的pH为7.0～9.0。3.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤1)中的缓冲液是离子强度为3～30mM的Good’s缓冲液，或者是离子强度为10～500mM的氨基酸类缓冲液。4.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：耿英利，甘萍萍，黎明，吴昌英，龙腾镶，
申请(专利权)人：迈克生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51