The invention discloses a method for obtaining tissue culture seedlings by using the roots of tight panicle wild rice as explants, which includes pretreatment, induction culture, multiplication culture, differentiation culture, strong seedling culture, rooting culture and seedling transplanting steps. The invention utilizes the roots of wild rice with tight panicles as explants, washes them with clean water, sterilizes them, and washes them with sterile water, then inserts them into the callus induction medium for callus induction culture, callus proliferation, and then inserts them into the differentiation medium for differentiation culture, differentiation subculture, strong seedling culture, rooting culture, and finally transplants and enlarges the seedlings. Field harvested seeds. In the process of callus induction, callus proliferation, differentiation culture, differentiation subculture, strong seedling culture and rooting culture, different combinations of phytohormones and the most suitable volume combination were used. Various culture conditions were adopted at different culture stages, and the roots of tight panicle wild rice were successfully used as explants to induce callus. Tissue culture plantlets were obtained from injured tissues.
【技术实现步骤摘要】
一种利用紧穗野生稻根为外植体获得组培苗的方法
本专利技术属于植物组织培养
，具体涉及一种利用紧穗野生稻根为外植体获得组培苗的方法。
技术介绍
野生稻资源是水稻育种中获得有利外源基因的一个重要来源。紧穗野生稻（Oryzaeichingeri）原产于非洲，斯里南卡，具有CC染色体组，与栽培稻亲缘关系较远，并具有许多优良特性，如抗虫、抗病、抗旱、植株高大、功能叶片耐衰老、良好生长优势等。目前，紧穗野生稻的繁殖手段主要是茎干扦插和分根移栽，以及种子繁殖，利用茎干扦插和分根移栽繁殖紧穗野生稻后代，繁殖过程繁琐、繁殖率低、时间长；利用种子进行繁殖，种子落粒性强，种子品质较差，种子萌发率较低，这样严重妨碍了紧穗野生稻的保存、保护和利用。为了更多、更好、更快地获得紧穗野生稻后代，开发一种拓宽紧穗野生稻繁殖范围的方法是非常必要的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种利用紧穗野生稻根为外植体获得组培苗的方法。本专利技术的目的是这样实现的，包括前处理、诱导培养、增殖培养、分化培养、壮苗培养、生根培养和炼苗移栽步骤，具体包括：A、前处理：选择2~3月份往年的稻莊刚冒新芽植株连根拔起，清洗灭菌的带稻根备用；B、诱导培养：将前处理后的稻根切成0.8~1.0cm长，接种到诱导培养基上，于温度25~30℃下暗培养20~40天，更换诱导培养基一次，再培养5~15天得到诱导愈伤组织；C、增殖培养：将诱导愈伤组织切成0.4~0.6cm接入增殖培养基中，于温度25~30℃暗培养25~30天，更换增殖培养基一次，继续培养20~40天得到增殖愈伤组织；D、分化培养：将增殖愈伤组织接入分化培...
【技术保护点】
1.一种利用紧穗野生稻根为外植体获得组培苗的方法，其特征在于包括前处理、诱导培养、增殖培养、分化培养、壮苗培养、生根培养和炼苗移栽步骤，具体包括：A、前处理：选择2~3月份往年的稻莊刚冒新芽植株连根拔起，清洗灭菌的带稻根备用；B、诱导培养：将前处理后的稻根切成0.8~1.0cm长，接种到诱导培养基上，于温度25~30℃下暗培养20~40天，更换诱导培养基一次，再培养5~15天得到诱导愈伤组织；C、增殖培养：将诱导愈伤组织切成0.4~0.6cm接入增殖培养基中，于温度25~30℃暗培养25~30天，更换增殖培养基一次，继续培养20~40天得到增殖愈伤组织；D、分化培养：将增殖愈伤组织接入分化培养基中，于温度25~30℃、光照为1500~2500Lx下进行光照培养25~35天后，得到分化愈伤组织；E、继代培养：将分化愈伤组织接入继代培养基中，于温度25~30℃、光照为1500~2500Lx下进行光照培养15~20天至愈伤组织出现淡绿点，继续培养10~25天得到独立小苗；F、壮苗培养：将小苗接入壮苗培养基中，于温度25~30℃、光照为2500~3500Lx下进行光照培养30~35天得到健壮无...
【技术特征摘要】
1.一种利用紧穗野生稻根为外植体获得组培苗的方法，其特征在于包括前处理、诱导培养、增殖培养、分化培养、壮苗培养、生根培养和炼苗移栽步骤，具体包括：A、前处理：选择2~3月份往年的稻莊刚冒新芽植株连根拔起，清洗灭菌的带稻根备用；B、诱导培养：将前处理后的稻根切成0.8~1.0cm长，接种到诱导培养基上，于温度25~30℃下暗培养20~40天，更换诱导培养基一次，再培养5~15天得到诱导愈伤组织；C、增殖培养：将诱导愈伤组织切成0.4~0.6cm接入增殖培养基中，于温度25~30℃暗培养25~30天，更换增殖培养基一次，继续培养20~40天得到增殖愈伤组织；D、分化培养：将增殖愈伤组织接入分化培养基中，于温度25~30℃、光照为1500~2500Lx下进行光照培养25~35天后，得到分化愈伤组织；E、继代培养：将分化愈伤组织接入继代培养基中，于温度25~30℃、光照为1500~2500Lx下进行光照培养15~20天至愈伤组织出现淡绿点，继续培养10~25天得到独立小苗；F、壮苗培养：将小苗接入壮苗培养基中，于温度25~30℃、光照为2500~3500Lx下进行光照培养30~35天得到健壮无根苗；G、生根培养：将健壮无根苗接入生根培养基中，于温度25~30℃、光照为2500~3500Lx下进行光照培养5~20天得到生根苗；H、炼苗移栽：将生根苗的根部培养基冲洗干净，加水淹没根部，于温度25~30℃、光照为1500~2500Lx下过渡培养2~4天，再加入腐殖土继续培养5~15天至长出新根，即移栽至大田中；其中，所述的诱导培养基为：MS4.0~5.0g/L+2,4-D8~12mg/L+琼脂粉8~10g/L+蔗糖20~40g/L，pH5.0~7.0；所述的增殖培养基为：MS4.0~5.0g/L+2,4-D8~12mg/L+琼脂粉8~10g/L+蔗糖20~40g/L，pH5.0~7.0；所述的分化培养基为：MS4.0~5.0g/L+6-BA6mg/L+ZT3~5mg/L+NAA0.02~0.04mg/L+琼脂粉8~10g/L+蔗糖20~40g/L，pH5.0~7.0；所述的继代培养基为：MS4.0~5.0g/L+6-BA6mg/L+ZT3~5mg/L+NAA0.02~0.04mg/L+KT2~4mg/L+琼脂粉8~10g/L+蔗糖20~40g/L，pH5.0~7....
【专利技术属性】
技术研发人员：王玲仙，陈越，殷富有，柯学，程在全，付坚，钟巧，肖素勤，张敦宇，王波，陈玲，曾民，余腾琼，雷涌涛，
申请(专利权)人：云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所，
类型：发明
国别省市：云南,53
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